一种地蒽酚治疗银屑病的新制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及医疗技术领域,具体为一种地蒽酚治疗银屑病的新制剂及其制备方法。
背景技术
银屑病(Psoriasis,PS)是一种常见的遗传因素与环境因素共同作用下诱发,由免疫介导的慢性、复发性、炎症性、系统性疾病,多种环境因素如外伤、感染及药物等均可诱导易感者发病,其典型临床表现为鳞屑性丘疹、斑块,局限性或广泛分布,无传染性,但治疗困难,常罹患终身。银屑病的病因涉及遗传、免疫、环境等多种因素,通过以T淋巴细胞介导为主、多种免疫细胞共同参与的免疫反应引起角质形成细胞过度增殖或关节滑膜细胞与软骨细胞发生炎症。全世界范围内银屑病的患病率约占人口的2%~3%,严重影响患者的生活质量,目前的治疗措施虽然有效,但不能达到长期缓解,对人类的身心健康有着深远的影响。
根据最新指南显示,银屑病的分型主要包括点滴型银屑病、斑块型银屑病、脓疱型银屑病、红皮病型银屑病、关节病型银屑病,以及特殊部位包括头皮银屑病、甲银屑病、反向银屑病,和特殊人群银屑病包括儿童银屑病、孕妇和哺乳期妇女银屑病、老年人群银屑病。虽然根治困难,但目前局部治疗一直是银屑病治疗的一线推荐方案,包括糖皮质激素、维生素D3衍生物、维生素A酸、地蒽酚制剂、焦油制剂和钙调神经抑制剂,但结果远远不能令人满意。
发明内容
为了克服上述不足,本发明提供一种地蒽酚治疗银屑病的新制剂及其制备方法。
一种地蒽酚治疗银屑病的新制剂,包括纳米粒和海藻酸钠凝胶的混合液,其中纳米粒的成分是:
5mg/mL地蒽酚原药溶于DMSO100uL,
1mg/mL壳聚糖3.5mL,
1mg/mLTPP0.5 mL,TPP是三聚磷酸钠;
海藻酸钠凝胶的成分是:
1.5g海藻酸钠,
1.0gβ-GP,
0.5g羧甲基纤维素钠,
10mL 1%CaCl2。
2.一种地蒽酚治疗银屑病的新制剂的制备方法,其特征在于:
第一步,制备纳米粒,制备过程如下:
用5mL的一次性塑料注射器吸取3.5mL提前配置好的壳聚糖溶液,加入10mL的玻璃瓶中,瓶中加入转子不断搅拌,1mL的一次性塑料注射器吸取 0.1mL浓度为5mg/mL的DIT溶解液,缓慢注入壳聚糖溶液中,然后汲取1 mg/mLTPP溶液0.5mL,以60滴/min的速度逐滴滴加至不断搅拌的液体中,之后用细胞破碎仪超声,持续时间20min,得到DIT-CTS-NPs混悬液;
第二步,制备凝胶,制备过程如下:
(1)将1.5g海藻酸钠溶于30mL水中溶胀24h,制成A;
(2)在A中加入1.0gβ-GP交联搅拌均匀,制成B;
(3)精准称取0.5g羧甲基纤维素钠溶于10mL水中,获得溶液C;
(4)将液体C加入液体B充分搅拌,得到D;
(5)用无水氯化钙配置1%CaCl210mL,为溶液E;
(6)将E加入D中充分混合后得到海藻酸钠凝胶;
将得到DIT-CTS-NPs混悬液用蒸馏水透析2天,之后冷冻干燥得到纯净 DIT-CTS-NPs,少量纯净水稀释后加入制备好的凝胶中搅拌均匀。
本发明的有益效果:
1.利用离子交联法得到粒径合适且分散系数最优的地蒽酚壳聚糖纳米粒且制作方法及过程简洁。FT-IR、粒径测量、PDI及zeta、热重分析表明 DIT-CS-NPs的热稳定性较高,内部成分结构较稳定。
2.体外细胞实验证实,DIT组与DIT-CS-NPs组的IC50值均在 3.2~6.4ug/mL浓度范围之间。与对照组相比,单独使用CAP作用时间>300s 可以抑制HaCaT细胞生长,且DIT-CS-NPs和CAP协同抑制了HaCaT细胞的生长最优。ROS结果示产生的活性氧可间接的诱导细胞凋亡。两者的作用机理都与氧化应激相关,所以两种方式的协同会大大提高疗效。DIT为地蒽酚。
3.动物实验表明,DIT-CS-NPs凝胶可减轻表皮增殖,减少了皮损处红斑、鳞屑和浸润,降低了细胞因子水平,明显缓解地蒽酚对小鼠皮损的刺激性,同时也存在增强水溶性和维持地蒽酚释放方面的作用。且证实了该制剂联合 CAP照射对治疗斑块型银屑病的疗效,对增加银屑病治疗的多样性提供了可能。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
一种地蒽酚治疗银屑病的新制剂,包括纳米粒和海藻酸钠凝胶的混合液,其中纳米粒的成分是:
5mg/mL地蒽酚原药溶于DMSO100uL;
1mg/mL壳聚糖3.5mL,
1mg/mLTPP0.5 mL,
海藻酸钠凝胶的成分是:
1.5g海藻酸钠,
1.0gβ-GP,
0.5g羧甲基纤维素钠,
10mL 1%CaCl2。
2.一种地蒽酚治疗银屑病的新制剂的制备方法,其特征在于:
第一步,制备纳米粒,制备过程如下:
用5mL的一次性塑料注射器吸取3.5mL提前配置好的壳聚糖溶液,加入 10mL的玻璃瓶中,瓶中加入转子不断搅拌,1mL的一次性塑料注射器吸取 0.1mL浓度为5mg/mL的DIT溶解液,缓慢注入壳聚糖溶液中,然后汲取1 mg/mLTPP溶液0.5mL,以60滴/min的速度逐滴滴加至不断搅拌的液体中,之后用细胞破碎仪超声,持续时间20min,得到DIT-CTS-NPs混悬液;
第二步,制备凝胶,制备过程如下:
(1)将1.5g海藻酸钠溶于30mL水中溶胀24h,制成A;
(2)在A中加入1.0gβ-GP交联搅拌均匀,制成B;
(3)精准称取0.5g羧甲基纤维素钠溶于10mL水中,获得溶液C;
(4)将液体C加入液体B充分搅拌,得到D;
(5)用无水氯化钙配置1%CaCl210mL,为溶液E;
(6)将E加入D中充分混合后得到海藻酸钠凝胶;
将得到DIT-CTS-NPs混悬液用蒸馏水透析2天,之后冷冻干燥得到纯净 DIT-CTS-NPs,少量纯净水稀释后加入制备好的凝胶中搅拌均匀。
DIT组与DIT-CS-NPs组的IC50值均在3.2~6.4ug/mL浓度范围之间。与对照组相比,单独使用CAP作用时间>300s可以抑制HaCaT细胞生长,且DIT-CS-NPs和CAP协同抑制了HaCaT细胞的生长最优。ROS结果示产生的活性氧可间接的诱导细胞凋亡。两者的作用机理都与氧化应激相关,所以两种方式的协同会大大提高疗效。
DIT为地蒽酚。
DIT-CS-NPs为地蒽酚负载的壳聚糖纳米粒凝胶。
CAP为大气压冷等离子体。
HaCaT为人永生化角质形成细胞。
ROS为活性氧。
TPP为三聚磷酸钠。
DMSO是二甲基亚砜。
β-GP是β-甘油磷酸二钠水合物。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例,对于本领域的普通技术人员而言,可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型,本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。