一种诱导湖羊批量生产的同期发情和人工授精方法
技术领域
本发明属于绵羊高效繁殖技术领域，具体涉及一种诱导湖羊批量生产的同期发情和人工授精方法。
背景技术
湖羊的育成和饲养已有800多年历史，因产于我国浙江和江苏两省交界处的太湖流域而得名。在自然环境和人为选择的影响下，湖羊被逐步培育成具有诸多优良种质特性的绵羊品种。分别于2000年、2006年、2008年和2014年被农业部列入《国家级畜禽遗传资源保护目录》。产后1～2日的羔皮以其独特的“S”型弯曲形成的波浪状花纹而著称，在国际上享有“中国软宝石”的美誉。具有性成熟早，繁殖能力强，四季发情的特点。母羊母性好，具有保姆行为。湖羊在我国南北各地广泛养殖，批量化生产已成为一种必然趋势。
同期发情技术是利用外源性激素有计划地对母羊发情周期进行同期化处理，人为调整母羊发情进程，使一定数量的母羊在预定时间内发情，配种和妊娠。由诱导发情演变而来，是人工授精、胚胎移植等肉羊综合繁殖技术的关键上游技术，利于工厂集约化、批次化生产，减少劳动力。同期发情的药物主要分为两类，延长黄体期抑制卵泡发育母畜发情的常用药物有孕酮、甲孕酮和氯地孕酮等；缩短黄体期促使黄体溶解，卵泡提前摆脱内源性孕激素控制的常用药物有前列腺素及其类似物。辅助药物包括PMSG(孕马血清促性腺激素)、LHRH-A3(促黄体素释放激素)、FSH(促卵泡素)和GnRH(促性腺激素释放激素)等。
目前，绵羊同期发情方法趋于多样化，主要采取海绵阴道栓埋置13天+PMSG的方法，取栓时每只母羊肌肉注射330IU PMSG，然而，若此时体内孕酮水平较高将影响排卵，易引发卵巢囊肿。埋栓时间过长容易引起母羊阴道炎，丢栓率也会提高；埋栓时间过短，孕激素的抑制作用不明显，达不到同期的目的。另外，同期发情效果与处理方法、激素使用、母畜品种和自身繁殖机能等因素密切相关，需要调整和优化激素组合以实现湖羊高效繁殖。
发明内容
针对现有技术中存在的问题一个或多个，本发明提供一种诱导湖羊批量生产的同期发情和人工授精方法，其包括以下步骤：
1)将诱导湖羊同期发情的第一辅助药物放置于湖羊母羊阴道深处，放置当天记为第0天；具体为用放栓枪将第一辅助药物放于阴道深处；
2)在第一辅助药物放置的第9天，每只母羊肌肉注射第二辅助药物，促使母羊发情和排卵；
3)将第一辅助药物从母羊的阴道中取出后，利用公羊对母羊进行试情处理，以使母羊发情，其中母羊站立不动，接受爬跨，即为发情；
4)母羊发情后，对母羊进行人工授精。
上述第一辅助药物为FGA。
上述第二辅助药物为PGF2α和PMSG。
上述方法中，将所述第一辅助药物放置于湖羊母羊阴道深处共11天。
上述方法中，步骤2)中每只母羊肌肉注射第二辅助药物的量为：PMSG 325～335IU和PGF2α0.08～0.12mg。
上述方法中，步骤3)中利用公羊对母羊进行试情处理的具体操作为：将试情公羊按公母比1:(10～12)的比例放入母羊群中，试情的时间点为：将第一辅助药物取出后24h、36h、48h、60h和72h。
上述方法中，步骤4)中对母羊进行人工授精的具体操作为：将精液和脱脂牛奶按1:(2～
4)比例稀释后，向母羊子宫颈口0.5～1.0cm处缓慢输入精液，具体为操作者用开膣器打开母羊阴道，找到子宫颈口，将输精枪沿开膣器插入子宫颈口0.5～1.0cm处，随后缓慢输入精液。
上述方法中，每只湖羊一次输精剂量的有效精子数为7000万个以上，输精时精子活率不低于0.7，畸形率不超过14％。
上述方法中，母羊发情后24h、36h和48h各输精1次，共输精3次。
上述方法还包括：
5)对母羊进行人工授精30天后，B超检测母羊受胎情况。
基于以上技术方案提供的诱导湖羊批量生产的同期发情和人工授精方法将诱导湖羊同期发情的激素(即辅助药物)组合由现有的FGA+PMSG改为FGA+PGF2α+PMSG，埋栓时间由13天缩短为11天，该方法降低了母羊丢栓率和阴道发炎率，减少了卵巢囊肿的发生，保障母羊健康生产，延长母羊利用年限。激素注射时间由撤栓后改为撤栓前2天，阴道栓放置第9天，每只母羊肌肉注射PMSG 330IU和PGF2α0.1mg，实施例结果证明，母羊发情率由76.67％提高到83.33％。输精次数由2次改为3次，输精时间由母羊发情后立即输精改为母羊发情后24h、36h和48h各输精1次，实施例结果证明，母羊受胎率由73.91％提高到76.92％。精液和脱脂牛奶的稀释比例由现有的1:1改为1:(2～4)，优选为1:3，增加了精子的活力。试情或输精的时间由早或晚改为取栓后24h、36h、48h、60h和72h等具体的时间点，可操作性强。本发明利用外源激素调控湖羊发情周期，能够节约成本，提高养殖效益。另外，本发明方法可为湖羊两年三产繁育计划，固化生产周期5-1-9模式(五月份配种，十月份产羔，次年一月份配种，六月份产羔，九月份再次配种)提供上游技术，从而可以加快我国湖羊产业发展进程。
附图说明
图1为本发明的一个实施例提供的诱导湖羊批量生产的同期发情和人工授精方法的流程图；
图2为实施例中不同处理对湖羊同期发情时间的影响柱状图。
具体实施方式
以下结合具体实施例详细说明本发明的内容，应当理解，实施例的目的在于帮助理解本发明，而不限制本发明的内容。
实施例1：
该实施例旨在提供一种诱导湖羊批量生产的同期发情和人工授精方法，如图1所示，为该实施例提供的诱导湖羊批量生产的同期发情和人工授精方法的流程图，其包括：
1)同期发情处理采用FGA(醋酸氟孕酮)+PGF2α(前列腺素)+PMSG的方法，用放栓枪将FGA放于阴道深处，放置当天记为第0天，埋置11天后撤栓。
2)阴道栓放置第9天，每只母羊肌肉注射PMSG 330IU和PGF2α0.1mg，促使母羊发情和排卵。
3)第11天撤栓后，挑选性欲旺盛的试情公羊按公母比1:10的比例放入经处理的母羊群中。母羊站立不动，接受爬跨，即为发情。
4)批次试情时间点为取栓后24h、36h、48h、60h和72h，根据需试情母羊数确定试情持续时间，一般30只羊需要试情30min。
5)采集种公羊的精液，经常规检测合格后，精液和脱脂牛奶按1：3比例稀释。
6)操作者用开膣器打开母羊阴道，找到子宫颈口，将输精枪沿开膣器插入子宫颈口0.5～1.0cm处，缓慢输入精液，湖羊一次输精剂量的有效精子数为7000万个以上，输精时要求精子活率不低于0.7，畸形率一般要求不超过14％。
7)母羊发情后24h、36h和48h各输精1次，共输精3次。
8)输精30天后，B超检测母羊受胎情况。
该实施例提供的诱导湖羊批量生产的同期发情和人工授精方法将诱导湖羊同期发情的激素(即辅助药物)组合由现有的FGA+PMSG改为FGA+PGF2α+PMSG，埋栓时间由13天缩短为11天，可以明显降低母羊丢栓率和阴道发炎率，减少了卵巢囊肿的发生，保障母羊健康生产，延长母羊利用年限。激素注射时间由撤栓后改为撤栓前2天，即阴道栓放置第9天，可以明显提高母羊的发情率。输精次数由2次改为3次，输精时间由母羊发情后立即输精改为母羊发情后24h、36h和48h各输精1次，可以提高母羊受胎率。精液和脱脂牛奶的稀释比例由现有的1:1改为1:(2～4)，优选为1:3，可以增加精子活力，有助于母羊受胎。
实施例2：
1材料与方法
1.1试验动物
选取年龄1.5～2.5岁，体重45.23±5.56kg，健康、膘情中等以上，无繁殖疾病的经产湖母羊150只(河北省某养殖场(北纬40°37′，东经115°8′，海拔680m))，随机分为I组、II组、III组、IV组和V组，每组30只。采集杜泊种公羊(河北省某养殖场(北纬40°37′，东经115°8′，海拔680m))精液进行配种。舍饲羊免疫和驱虫程序按养殖场方案进行。
1.2试验药品和材料
阴道栓(FGA，澳大利亚)，规格：醋酸氟孕酮45mg/枚；孕马血清促性腺激素(PMSG，宁波第二激素厂)，规格：1000IU/支；前列腺素(PGF2α，宁波第二激素厂)，规格：0.2mg/支；促黄体素释放激素A3(LHRH-A3，宁波第二激素厂)，规格：25mg/支，4℃下保存。
1.3处理方法
试验分五组进行，I组处理为FGA+PGF2α+LHRH-A3，II组处理为FGA+PGF2α+PMSG，III组处理为FGA+PGF2α+PMSG+LHRH-A3，IV组处理为FGA+PGF2α+PMSG，V组处理为FGA+PMSG。试验时间从2019年4月30日至2019年11月16日。每30个FGA用1g左右160万单位的青霉素钠均匀涂于表面，再使用放枪栓置于母羊阴道内，防止发生阴道炎。PMSG、PGF2α和LHRH-A3均采取肌肉注射。各组具体处理方法见表1，经济成本分析见表2。
表1：湖羊同期发情处理方法
表2：湖羊同期发情经济成本分析
1.4丢栓和发炎鉴定
取栓时有FGA脱落时记为丢栓；阴道有出血、恶臭、有脓性分泌物流出时记为发炎。
丢栓率计算公式：丢栓率＝(丢栓母羊只数/母羊总数)×100％。
发炎率计算公式：发炎率＝(发炎母羊只数/母羊总数)×100％。
1.5母羊发情鉴定
试情法鉴定发情母羊，将试情公羊按1:10的比例(系试情布)放入试情母羊圈，母羊站立不动，接受爬跨，即为发情。试情时间早晚各30min，统计取栓后24h、36h、48h、60h、72h发情母羊数。发情率计算公式：发情率＝(发情母羊只数/母羊总数)×100％。
1.6输精
输精员用开膣器打开阴道，找到子宫颈口，将输精枪沿开膣器插入子宫颈口0.5～1.0cm处，缓慢输入精液，输精量约为0.2mL。公羊精液经常规检测合格后，按精液和脱脂牛奶1:3比例稀释后输精。母羊发情24h、36h和48h各输精1次。
1.7母羊受胎和产羔
输精30d后，B超检测母羊受胎情况，计算受胎率。产羔后统计各试验组产羔母羊数、产活羔羊数和产单羔、双羔、多羔的母羊数。
受胎率计算公式：受胎率＝(妊娠母羊数/配种母羊数)×100％。
产羔率计算公式：产羔率＝(产活羔羊数/配种母羊数)×100％。
单羔率计算公式：单羔率＝(产单羔母羊数/产羔母羊数)×100％。
双羔率计算公式：双羔率＝(产双羔母羊数/产羔母羊数)×100％。
多羔率计算公式：多羔率＝(产多羔母羊数/产羔母羊数)×100％。
1.8数据统计
试验数据使用Excel 2010进行整理，SPSS 21.0统计软件进行差异性分析。
2结果
2.1不同处理对湖羊同期发情时间的影响
由图2所示，其中上面板为各组湖羊于取栓后24h、36h、48h、60h和72h的发情率柱状图，下面板为对应的各组湖羊的发情率数值，可见5个处理组发情多集中于取栓后36h和48h，其次为24h和60h，取栓后72h发情率有降低趋势，组间差异不显著(P＞0.05)。但总体可见，36h和48h两个时间点，I组共发情76.19％，II组共发情80.00％，III组共发情76.93％，IV组共发情75.00％，V组共发情73.91％，由此可知II组发情时间较集中。
2.2不同处理对湖羊发情与受胎的影响
由表3可知，不同处理对湖羊发情与受胎的影响差异不显著(P＞0.05)。在丢栓率方面，V组(6.67％)最高，I组、III组(0.00％)最低；在发炎率上，IV组(6.67％)最高，I组、II组和V组(0.00％)最低；在发情率和受胎率方面，III组最高，分别达到86.67％和80.77％，其次是II组(83.33％和76.92％)，I组最低，分别为70.00％和71.43％。
表3：不同处理对湖羊发情与受胎的影响
注：同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)；小写字母相同表示差异不显著(P＞0.05)。
2.3不同处理对湖羊产羔的影响
由表4可知，产羔率Ⅲ组最高，达到207.69％，与II组(192.00％)无显著差异，显著高于Ⅰ组(P＜0.05)，高60.07％。单羔率、双羔率和多羔率组间差异不显著(P＞0.05)，其中，单羔率Ⅰ组最高，为20.00％，Ⅲ组最低，为4.76％；双羔率Ⅱ组最高，高达70.00％，Ⅲ组和Ⅴ组双羔率仅次于Ⅱ组，分别为66.67％和64.71％；多羔率Ⅲ组最高(28.57％)，Ⅴ组最低(17.65％)。
表4：不同处理对湖羊产羔的影响
注：同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)；小写字母相同表示差异不显著(P＞0.05)。
综上所述，发情、受胎和产羔是衡量绵羊繁殖效率的重要指标，双羔率可以保障羔羊成活率，给养殖场带来较大的生产效益，便于集约化饲养管理。同期发情时，阴道栓放置时间的延长增加了丢栓和发炎的比率，PGF2α和PMSG的联合使用可以降低卵巢囊肿的风险，输精次数的增加和输精时间的延迟提高了母羊的受胎率。结合实际生产，考虑发情效果和发情成本，阴道栓放置11天的FGA+PGF2α+PMSG(II组)处理组在湖羊同期发情中更具有应用价值。具体操作为：用放栓枪把FGA海绵栓放入母羊阴道深部，埋栓当天记为0天，第9天每只母羊肌肉注射PMSG 330IU和PGF2α0.1mg，第11天撤栓。取栓后24h、36h、48h、60h和72h试情，母羊发情后24h、36h和48h各输精1次。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
