一种添加菊花提取物的能降低口腔风险的加热卷烟烟支
技术领域
本发明属于烟草卷烟烟支技术领域，具体涉及一种添加菊花提取物的能降低口腔风险的加热卷烟烟支。
背景技术
20世纪末21世纪初，随着世界卫生组织《烟草控制框架公约》（FCTC）的签署和生效，掀起了全球第四次禁烟浪潮，控烟运动的形式已由个人、组织或国家的行为提升成全球范围内有组织、有计划统一行动，禁烟浪潮正在席卷全球的每一个角落。截止到目前，世界卫生组织《烟草控制框架公约》缔约国已达到177个，覆盖全球88%的人口。同时，随着人们生活水平不断提高，人们更加注重自己的身心健康和环境保护，对烟草有了新认识。为了应当前形势，国外各大烟草集团纷纷投入巨资，投入新技术及新产品研发，新型烟草制品得以迅猛发展。
加热不燃烧卷烟（新型卷烟或低温卷烟）是利用特殊热源（500℃以下甚至更低）对烟丝进行加热，但不使其燃烧的新型烟草制品。国内外研究表明，烟草烟气有害成分释放量与加热、燃烧温度密切相关，降低加热或燃烧温度可显著降低烟气有害成分释放量。新型卷烟产品装填的是烟草物质，有传统烟支外观，但改变了传统卷烟燃烧方式，采取“只加热不燃烧”的方式向人体传送烟碱和香味，产生可见烟雾。与电子烟和无烟气烟草制品相比，加热不燃烧卷烟在生理感受、心理感知、吸食方式等方面最接近传统卷烟，同时具有明显的减害特征，如几乎不产生“二手烟”，可见的主流烟气非常少，吸烟者摄入有害物质种类和摄入量大幅度下降，具有很好的发展潜力。口腔是人体最早接触食物并开始消化的器官。口腔上皮中，大多数部位并没有角化层（和皮肤相比），也没有粘液形成的粘液层（和胃肠道相比），因此口腔上皮细胞直接暴露于外界环境中，当卷烟烟气中的部分物质对上皮细胞产生死亡时，口腔不适随之发生。虽然加热不燃烧卷烟和传统卷烟相比，对口腔的刺激性大大下降，但是仍然具有一定刺激性。
菊花为短日照植物，在短日照下能提早开花。喜阳光，忌荫蔽，较耐早，怕涝。喜温暖湿润气候，但亦能耐寒，严冬季节根茎能在地下越冬。花能经受微霜，但幼苗生长和分枝孕蕾期需较高的气温。菊花的药用部位是植物的干燥头状花絮。菊花具有治疗风热感冒，头痛眩晕，目赤肿痛，眼目昏花，疮痈肿毒的功效。如桑菊饮（《温病条辩》）、羚角钩藤汤（《通俗伤寒论》）、杞菊地黄丸（《医级》）、甘菊汤（《揣摩有得集》）。
如何利用菊花来制备一种添加菊花提取物的能降低口腔风险的加热卷烟烟支以克服现有技术的不足是目前烟草卷烟烟支技术领域亟需解决的问题。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术的不足，提供一种添加菊花提取物的能降低口腔风险的加热卷烟烟支。本发明发现人在长期吸食加热卷烟时，口腔细胞暴露在高浓度烟气中会导致细胞死亡，在加热不燃烧烟气总粒相物中加入菊花提取物可以改善因为其引起的细胞死亡，能显著降低吸食加热卷烟引起的口腔风险。在加热不燃烧卷烟中直接加入菊花提取物也可以降低使用加热卷烟引起的口腔细胞死亡。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一种添加菊花提取物的能降低口腔风险的加热卷烟烟支，包括按照重量份数计的如下组分：
烟草原料30~70份、发烟剂10~30份、不燃性无机填料10~50份、粘合剂5~20份、香精香料1~20份、菊花提取物5~20份；
所述的烟草原料为再造烟叶，或者再造烟叶和烟丝的组合物；
所述的菊花提取物的制备方法为取菊花粉碎后，用超纯水震荡提取多次，合并提取液，4℃下离心，取上清液，上清液冻干后保存备用，得到菊花提取物。
本发明提取次数优选3-8次。
进一步，优选的是，所述的再造烟叶采用烤烟、晾晒烟、白肋烟中一种或多种制成；所述的再造烟叶采用烟叶、烟丝、烟梗中一种或多种制成。
进一步，优选的是，所述的再造烟叶制造方法为辊压法、造纸法或稠浆法。
进一步，优选的是，所述发烟剂为丙二醇、丙三醇、三甘醇、山梨醇、木糖醇、乙二醇中的一种或多种的混合物。
进一步，优选的是，所述不燃性无机填料为碳酸钙、氧化镁、硫酸镁、二氧化硅、白垩、珍珠岩、硅藻土中的一种或多种的混合物。
进一步，优选的是，所述粘合剂为有机粘合剂和/或不燃性无机粘合剂。
进一步，优选的是，所述有机粘合剂为甲基纤维素、乙基纤维素、羧甲基纤维素、乙酰纤维素、藻酸粘合剂、果胶粘合剂或凝胶；所述不燃性无机粘合剂为硅酸钾或氧化镁。
进一步，优选的是，所述香精香料为咖啡提取物、香草醛、巨豆三烯酮、茄酮、甘草、咖啡、β-大马酮和烟草提取物中的一种或多种的混合物。
进一步，优选的是，提取次数为3次，每次超纯水震荡提取20分钟，菊花与每次超纯水的用量比为：1000g：200ml：1000ml：500ml；离心参数为13000g、30分钟；冻干温度为-30℃，冻干时间为22小时。
本发明同时提供上述菊花提取物在制备防治由于渗透压导致的口腔上皮细胞死亡的药物、保健品、烟草制品中的应用。
本发明再造烟叶的生产工艺可以为：
辊压法：将烟末、梗签等烟草物质粉碎后与胶黏剂、保润剂、水等物质按照一定比例混合搅拌均匀后，形成松散的团粒状，然后通过辊压机辊压形成片状进行干燥，最后分切成一定规格的再造烟叶或经再造烟叶切丝机直接切成再造烟叶丝。
造纸法：借助于造纸技术和设备，先将烟草物质用温水浸泡萃取，将可溶物与纤维及不溶物分离，然后将纤维和不溶物打浆，用造纸机成型，同时将可溶物萃取浓缩后，喷回到成型基片上，经干燥后分切成再造烟叶。
稠浆法：将烟草物质粉碎后掺入带有胶黏剂和保润剂的水溶液中，搅拌均匀后使之形成浆糊状，然后将稠状物铺展在一条环形不锈钢带上进行烘干，铲剥后即形成再造烟叶。
将经前处理工艺处理后的加热不燃烧专用再造烟叶经过纸质滤棒的聚拢工艺加工形成芯材，利用分条切丝工艺及其设备，将干法再造烟叶分条切丝成横向半断、纵向连续的状态，再经纸基嘴棒成型机制备成长120mm基棒。后经过复合成型工艺和滤棒进行复合，再经过分切工艺最终得到能适配烟具的专用烟支。
本发明与现有技术相比，其有益效果为：
1、本发明发现人在长期吸食加热卷烟时，烟气能够导致口腔上皮细胞死亡，而在烟支中加入菊花提取物能显著降低吸食加热卷烟引起的口腔风险，即显著降低口腔细胞的死亡率。
2、本发明加热卷烟烟支能够大大改善现有的加热卷烟烟支由于产生高渗环境导致口腔上皮细胞死亡的情况，可以显著降低加热卷烟烟支引起的口腔风险。
附图说明
图1为在培养中添加菊花提取物抑制细胞死亡结果图。**：t检验P<0.01；结果表明：添加菊花提取物能够降低加热不燃烧卷烟烟气总粒相物引起口腔上皮细胞死亡。
图2为直接在烟液中添加菊花提取物抑制细胞死亡结果图；结果表明：在加热不燃烧卷烟制作过程中直接加入菊花提取物，和不加入菊花提取物的加热不燃烧卷烟相比，其烟气总粒相物诱导的细胞死亡比例下降。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的详细描述。
本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用材料或设备未注明生产厂商者，均为可以通过购买获得的常规产品。
以下实施例中未有特别说明，百分比均为重量百分比，比例均为质量比。
实施例1
一种添加菊花提取物的能降低口腔风险的加热卷烟烟支，包括按照重量份数计的如下组分：
烟草原料30份、发烟剂10份、不燃性无机填料10份、粘合剂5份、香精香料1份、菊花提取物5份；
所述的烟草原料为再造烟叶；
所述的菊花提取物的制备方法为取菊花粉碎后，用超纯水震荡提取多次，合并提取液，4℃下离心，取上清液，上清液冻干后保存备用，得到菊花提取物。
实施例2
一种添加菊花提取物的能降低口腔风险的加热卷烟烟支，包括按照重量份数计的如下组分：
烟草原料30份、发烟剂10份、不燃性无机填料10份、粘合剂5份、香精香料1份、菊花提取物5份；
所述的烟草原料为再造烟叶和烟丝的组合物（质量比为19：1）；
所述的菊花提取物的制备方法为取菊花粉碎后，用超纯水震荡提取多次，合并提取液，4℃下离心，取上清液，上清液冻干后保存备用，得到菊花提取物。
所述的再造烟叶采用烤烟烟叶、烟梗制成（质量比为2：1）。
所述的再造烟叶制造方法为辊压法。
所述发烟剂为三甘醇。
所述不燃性无机填料为氧化镁。
所述粘合剂为甲基纤维素。
所述香精香料为咖啡提取物。
实施例3
一种添加菊花提取物的能降低口腔风险的加热卷烟烟支，包括按照重量份数计的如下组分：
烟草原料70份、发烟剂30份、不燃性无机填料50份、粘合剂20份、香精香料20份、菊花提取物20份；
所述的烟草原料为再造烟叶；
所述的菊花提取物的制备方法为取菊花粉碎后，用超纯水震荡提取多次，合并提取液，4℃下离心，取上清液，上清液冻干后保存备用，得到菊花提取物。
所述的再造烟叶采用晾晒烟、白肋烟的烟叶制成。
所述的再造烟叶制造方法为造纸法。
所述发烟剂为山梨醇和木糖醇（质量比为1：1）。
所述不燃性无机填料为硫酸镁、二氧化硅和白垩（质量比为2：1：1）。
所述粘合剂为氧化镁。
所述香精香料为甘草提取物。
实施例4
一种添加菊花提取物的能降低口腔风险的加热卷烟烟支，包括按照重量份数计的如下组分：
烟草原料50份、发烟剂20份、不燃性无机填料30份、粘合剂10份、香精香料12份、菊花提取物15份；
所述的烟草原料为再造烟叶；
所述的菊花提取物的制备方法为取菊花粉碎后，用超纯水震荡提取多次，合并提取液，4℃下离心，取上清液，上清液冻干后保存备用，得到菊花提取物。
提取次数为3次，每次超纯水震荡提取20分钟，菊花与每次超纯水的用量比为：1000g：200ml：1000ml：500ml；离心参数为13000g、30分钟；冻干温度为-30℃，冻干时间为22小时。
所述的再造烟叶采用烤烟的烟叶、晾晒烟的烟丝、白肋烟的烟梗制成（质量比为1：1：1）。
所述的再造烟叶制造方法为稠浆法。
所述发烟剂为乙二醇。
所述不燃性无机填料为硅藻土。
所述粘合剂为乙酰纤维素和硅酸钾（质量比为3：1）。
所述香精香料为咖啡、β-大马酮和烟草提取物（质量比为2：1：1）。
应用施例1
1、一种添加菊花提取物的能降低口腔风险的加热卷烟烟支
a、云南烤烟（B2F）（30%）、福建烤烟（C3F）（30%）、云南晒黄烟（20%）、土耳其香料烟（20%）的烟叶经造纸法制成再造烟叶。
b、菊花提取物的制备
（1）称取菊花1000g，粉碎后，分别用200 ml、1000 ml和500ml的超纯水震荡提取各一次，每次提取时间为20小时。
（2）合并提取液，13000 g高速冷冻离心（4℃，13000g，30分钟），留取上清液，弃沉淀。
（3）上清液冻干后保存备用，得到菊花提取物，冻干条件为：-30℃，22小时。
c、再造烟叶经制丝和卷制后制成加热卷烟，包括按照重量份数计的如下组分：再造烟叶50份、丙二醇10份、甘油10份、碳酸钙10份、果胶5份、香草醛2份、巨豆三烯酮2份、菊花提取物6份、硅酸钾5份。
2、烟气总粒相物的提取
加热卷烟参照GB16450-2004、GB19609-2004标准方法进行抽吸和测试。将加热卷烟在恒温恒湿箱中平衡48 h，选取重量和吸阻一致的烟支。按上述标准方法，分别在全自动转盘式吸烟机上抽吸20支卷烟，用剑桥滤片捕集器中剑桥滤片捕集烟气的总粒相物。剑桥滤片用MCDB151浸泡，超声波提取20 min，最后定容至 10 mg TPM/ml DMSO，-80 ℃低温保存备用。
3、口腔上皮细胞死亡检测
（1）细胞培养与传代：永生化的人口腔上皮细胞hTERT-OME购自Abmgood公司，并培养于含有1%胎牛血清（体积分数）（Hyclone产品）的MCDB151培养基（Sigma-Aldrich产品）的25cm2培养瓶中。细胞生长至80%融合状态后，弃培养液，用PBS洗涤一次，加入0.5-1mL0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化液（Sigma-Aldrich产品），37℃消化1-5分钟。细胞变圆后，弃去消化液。加入含10%胎牛血清（体积分数）的MCDB151培养基，吹打重悬细胞，600g离心5分钟，弃上清，细胞重悬于15 ml前述含1%胎牛血清的MCDB151培养基中，按照1:3的比例传代。每2-3天换液一次，半量换液，换液的时候是换成新的前述含有1%胎牛血清的MCDB151培养基。
（2）将处在对数生长期的hTERT-OME接种于96孔板中，每孔细胞数量为8000个，培养基体积为100 μl，采用无血清MCDB151培养基。细胞贴壁培养24小时后，更换细胞培养基为含有2 mg /ml 烟气总粒相物的MCDB151，同时在培养基中加入菊花提取物以检测其是否可以抑制烟气总粒相物导致的细胞死亡（0-1mg/ml）。继续培养24小时。
（3）在细胞培养终点，使用Promega的MTS试剂盒检测存活细胞，在每个细胞培养孔中加入10 μl MTS溶液，37℃孵育2小时。测定490 nm各孔的吸光值。在实验中，同时设置空白组（培养基和MTS溶液，无细胞），对照组对照组（不添加烟液，不添加菊花提取物的正常培养细胞，图1中的0 mg/ml组），每组设置三个复孔。对照组减去空白组的数值设置为100%（如）。
细胞存活率=（OD490[实验组]-OD490[空白组]）/(OD490[对照组]-OD490[空白组])×100%；
（4）在某产品Heatsticks（菲莫国际，购于香港）的提取的烟气总粒相物中添加菊花提取物后细胞的存活比例如图1所示。
（5）在制作加热不燃烧卷烟时加入菊花提取物后的烟气总粒相物对细胞的存活比例如图2所示。其中，添加卷烟为a-c步骤制得的产品，对照卷烟与添加卷烟的区别在于不加入菊花提取物，其余均相同；对照组为其中，对照组为不添加烟液，不添加菊花提取物的正常培养细胞。
结论：添加了菊花提取物的加热卷烟烟支能明显降低口腔风险，降低口腔上皮细胞死亡比例。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
