饲料添加剂、营养强化饲料及其利用方法和营养强化禽蛋
技术领域
本发明涉及生物技术和饲料加工领域，进一步涉及动物饲料或动物饲料添加剂，涉及通过饲料的优化而改善禽类产品营养特征的方法，以及由此获得的营养强化禽蛋。
背景技术
功能性脂质是一类具有特殊生理功能的脂肪酸、伴随物及衍生物的统称，是具有生理作用，对人体有一定保健功能的一类脂质。
花生四烯酸(arachidonic%20acid,ARA)是人体内不可缺少的ω-6系列长链多不饱和脂肪酸(long%20chain%20polyunsaturated%20fatty%20acids,LCPUFA)，在调节脂质代谢、生物进程及免疫反应等生理过程中具有重要的作用，对婴幼儿大脑和神经系统的发育具有重要影响，成年人摄取ARA能够改善认知障碍，提高记忆力。由于人体内碳链延长酶和去饱和酶含量有限，ARA的转化效率仅有3％左右，难以满足婴儿等特定人群的需要。
α-亚麻酸(α-Linolenic%20acid,ALA)是一种ω-3必需脂肪酸,作为结构物质和代谢调控物质，发挥结构功能和调控功能。
二十二碳五烯酸(docosapentaenoic%20acid,DPA)是一种ω-3系列长链多不饱和脂肪酸，是人脑组织、神经细胞的主要组成成份，主要存在于海洋哺乳动物的油脂中。DPA具有促进和提高人体的免疫能力的功能，比二十碳五烯酸(EPA)吸收更快，且对婴儿的发育非常重要。
二十二碳六烯酸(docosahexaenoic%20acid,DHA)是一种ω-3系列长链多不饱和脂肪酸，是大脑中的主要功能物质。DHA具有保证细胞正常生理功能、促进视网膜和脑发育、延缓脑的衰老、预防和治疗心血管疾病、抗肿瘤、防癌等作用，还可调节机体免疫机能、抑制炎症反应，因此对人的动物的生长和生产性能均有积极作用。
角鲨烯的化学名为2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯，是一种开链三萜类脂质不皂化物。角鲨烯是重要的化学活性物质，因其具有抗肿瘤、缓衰老、抗病毒等多种生理功能而被广泛应用于医药、食品、化妆品等领域。但是角鲨烯昂贵的价格限制了其使用和普及。目前角鲨烯主要来源于深海鲨鱼，然而深海鲨鱼属于稀缺资源，并且对维护海洋生态环境平衡非常重要，加之角鲨烯较高的生产成本及鲨鱼自身安全卫生问题，使寻找角鲨烯的新来源显得十分迫切。
ARA、DPA、DHA、角鲨烯等脂类本身虽然具有重要的生理功能，但由于其不饱和碳链的固有特性，容易氧化，不利于生产和储存。另外，如果直接将其制成保健品，也面临着生物利用率低的问题。
禽蛋营养丰富，含有高品质的蛋白质、脂质、维生素、矿物质等。禽蛋的成分和结构特性，为功能性蛋的开发提供了良好的载体。目前对改善脂肪酸成分的功能性禽蛋的研究，主要是利用营养强化饲料饲喂蛋鸡等家禽，从而改善禽蛋的功能性脂肪酸含量。
但是，现有技术中对生产功能性禽蛋的方案还存在一些不足。
例如，中国专利公开CN109392831A提供了一种营养强化鸡饲料，及用该饲料饲喂蛋鸡获得的鸡蛋。但该专利公开仅限于富集了DHA和ARA的鸡蛋，没有涉及其他形式的长链多不饱和脂肪酸，另外所添加的饲料营养强化剂热纤梭菌干粉制备困难，且含有乙醇和有机酸，不利于蛋鸡的生长。
又例如，中国专利公开CN106578413A公开了一种鸡饲料及其制备方法，该饲料饲喂的鸡所产的鸡蛋富含DHA和α-亚麻酸。此公开没有涉及富集其他形式的长链多不饱和脂肪酸。
又如，中国专利公开CN106489833A提供了由鱿鱼卵粉、贝壳粉、大豆粉末磷脂和氯化钠组成的饲料添加剂，鱿鱼卵粉含有的丰富的磷脂型DHA可以在较短时间内进入鹌鹑蛋中，且该添加剂不会造成鹌鹑产蛋量的下降。此专利公开没有涉及其他形式的长链多不饱和脂肪酸。
因此，现有技术中对禽蛋的功能性脂质成分的改善集中于少数几种的长链不饱和脂肪酸，其种类有限，尚不能满足消费者，特别是婴幼儿及孕妇等特殊群体对多种多不饱和脂肪酸的同时需求及特殊需求的问题；现有技术亦存在强化饲料制备不便、禽类摄取饲料后对饲料中多不饱和脂肪酸成分的吸收转化效率低、饲料对禽类生长存在负面影响、功能性禽蛋总体生产成本高等问题。
发明内容
发明要解决的问题
现有的用于生产营养加强禽蛋的禽饲料存在制备不便、禽类对饲料添加剂耐受不良、饲料添加剂成分利用度不高等问题，且现有的营养加强禽蛋产品中的功能性脂类的种类、比例和含量还存在不足，不能满足消费者特别是婴幼儿及孕妇对多种功能性脂类的同时需求。
用于解决问题的方案
有鉴于现有技术存在的不足，本公开提供一种营养强化禽蛋，所述营养强化禽蛋含有角鲨烯。
在本公开进一步的实施方案提供的营养强化禽蛋中，所述营养强化禽蛋含有ARA、DPA、DHA和角鲨烯。
在本公开进一步的实施方案提供的营养强化禽蛋中，所述营养强化禽蛋中ARA的含量为200mg/枚以上，DPA的含量为50mg/枚以上，DHA的含量为200mg/枚以上，角鲨烯的含量为3.5mg/枚以上。
在本公开进一步的实施方案提供的营养强化禽蛋中，所述营养强化禽蛋中DHA和ARA含量之比为1:1.5-1:2。
本公开还提供一种饲料添加剂，该饲料添加剂用于生产本公开的营养强化禽蛋，所述饲料添加剂包含选自由被孢霉菌、破囊壶藻、小环藻、海洋球石藻、裂殖壶藻、吾肯氏壶藻、寇氏隐甲藻组成的组的一种或多种组分。
本公开进一步的实施方案提供的饲料添加剂由被孢霉菌、破囊壶藻和裂殖壶藻组成。
本公开进一步的实施方案提供的饲料添加剂由被孢霉菌、海洋球石藻和裂殖壶藻组成。
本公开进一步的实施方案提供的饲料添加剂由被孢霉菌、破囊壶藻和裂殖壶藻以0.5-2.5：0.5-1.5：0.5-1.5的干重比混合而成。
本公开进一步的实施方案提供的饲料添加剂由被孢霉菌、海洋球石藻和裂殖壶藻以0.5-2.5：0.5-1.5：0.5-1.5的干重比混合而成。
本公开还提供一种营养强化饲料，该营养强化饲料是将本公开的饲料添加剂添加到基础家禽饲料中而得到。
在本公开进一步的实施方案提供的营养强化饲料中，所述饲料添加剂的重量占所述营养强化饲料的重量的5％-15％。
本公开还提供一种生产营养强化禽蛋的方法，所述方法包括：
用本公开的营养强化饲料连续饲喂家禽15天以上；
收集所述家禽所产的禽蛋。
发明的效果
本公开通过对禽类饲料成分、禽类饲养方法的改进，获得了含有多种多不饱和脂肪酸及其他健康脂质(如角鲨烯)的禽蛋，解决了现有技术中一方面或多方面的问题。本公开实现了以下有利技术效果：
1)饲料添加剂简单易得，成本低，利用饲料添加剂制备营养强化饲料的方法简便易行；
2)家禽容易适应以本公开的营养强化饲料进行饲喂，未发现本公开的营养强化饲料对家禽有不良影响；
3)本公开首次提供了含有角鲨烯的禽蛋，并且角鲨烯与蛋黄卵磷脂结合，氧化稳定性高、生物利用度好，克服了现有的含角鲨烯的保健品中角鲨烯成分不稳定、利用率低的问题；
4)本公开提供的禽蛋含有多种具有重要生理功能的多不饱和脂肪酸，其含量高，且存在形式稳定，生物利用率高；
5)本公开提供的禽蛋富含多种健康脂质，解决了功能性脂质来源稀缺、摄取不便的问题，并能够实现DHA和ARA的合理配比，适合包括婴幼儿、孕产妇在内的广泛人群食用。
具体实施方式
本公开提供一种饲料添加剂，用于添加到常规的基础家禽饲料中，形成供饲喂家禽的营养强化饲料。饲料添加剂提供多种功能性脂类的来源，家禽摄入含有饲料添加剂的营养强化饲料后，通过吸收和/或代谢，产出营养强化禽蛋。
其中，饲料添加剂提供功能性脂类(如ARA、DPA、角鲨烯、DHA)的来源。具体而言，饲料添加剂包含选自由被孢霉菌(Mortierella%20alpina)、破囊壶藻(Thraustochytrids)、小环藻(Cyclotella)、海洋球石藻(Emiliania)、裂殖壶藻(Schizochytrium)、吾肯氏壶藻(Ulkenia%20amoeboida)、寇氏隐甲藻(Crypthecodinium%20cohnii)组成的组的一种或多种组分；优选饲料添加剂由选自由被孢霉菌、破囊壶藻、小环藻、海洋球石藻、裂殖壶藻、吾肯氏壶藻、寇氏隐甲藻组成的组的一种或多种组分组成。从改善生产的便利性、提高产品的稳定性等角度出发，优选被孢霉菌、破囊壶藻、小环藻、海洋球石藻、裂殖壶藻、吾肯氏壶藻、寇氏隐甲藻原料的形式是通过发酵、分离、干燥得到的干粉。
优选地，饲料添加剂由被孢霉菌、破囊壶藻和裂殖壶藻组成，或者饲料添加剂由被孢霉菌、海洋球石藻和裂殖壶藻组成。
如果饲料添加剂由被孢霉菌、破囊壶藻和裂殖壶藻组成，被孢霉菌、破囊壶藻和裂殖壶藻的重量比(以各配料的干重计)优选0.5-2.5：0.5-1.5：0.5-1.5，更优选0.8-2：0.8-1.2：0.8-1.2；
如果饲料添加剂由被孢霉菌、海洋球石藻和裂殖壶藻组成，被孢霉菌、海洋球石藻和裂殖壶藻的重量比(以各配料的干重计)优选0.5-2.5：0.5-1.5：0.5-1.5，更优选0.8-1.8：0.8-1.2：0.8-1.2。
基础家禽饲料的种类没有特别限制，根据禽类的品种，选择常规的基础饲料即可。将饲料添加剂加入到基础家禽饲料中配成营养强化饲料，优选饲料添加剂的加入量为配成的营养强化饲料的5％-15％(以重量百分比计)。优选的加入量可以使饲料添加剂中所含的功能性脂类及其前体得到有效利用，同时不明显改变基础饲料的性状，禽类易于适应。
配制好营养强化饲料后，利用其饲喂产蛋家禽，使家禽产出营养强化禽蛋。优选地，利用营养强化饲料饲喂家禽连续15天以上，可使家禽产出的营养强化禽蛋质量可控，功能性脂类含量稳定达标。
产蛋家禽的种类没有特别限制，从生产经济型的角度出发优选蛋鸡，包括但不限于罗曼蛋鸡、海兰蛋鸡等。
产蛋家禽摄入本公开的营养强化饲料后，通过对饲料中营养强化成分的吸收和/或代谢，产出营养强化禽蛋。就营养强化禽蛋的营养成分而言：
本公开的营养强化禽蛋含有角鲨烯；
优选地，本公开的营养强化禽蛋含有ARA、DPA、DHA和角鲨烯；
更优选地，本公开的营养强化禽蛋中ARA、DPA、DHA和角鲨烯的含量分别为：ARA含量为200mg/枚以上，DPA含量为50mg/枚以上，角鲨烯含量为3.5mg/枚以上，DHA含量为200mg/枚以上。
进一步优选地，本公开的营养强化禽蛋中ARA、DPA、DHA和角鲨烯的含量分别为：ARA含量为200mg/枚以上，DPA含量为50mg/枚以上，角鲨烯含量为5mg/枚以上，DHA含量为200mg/枚以上。
以下通过示例性的对比例和实施例对本发明进行说明。
对比例和实施例中对禽蛋的ARA、DPA、角鲨烯、DHA含量的通用检测方法如下：
(1)脂肪提取和脂肪酸甲酯化：取禽蛋蛋黄样品10g，加入100mL氯仿-甲醇混合溶液(2:1，V/V)，低速均质混匀，静置1h后过滤，往滤液中加入20mL饱和NaCl溶液，振荡混匀，静置分层，取下层清液于45℃水浴下用真空旋转蒸发器浓缩得到脂质样品。取提取的脂肪于试管中，加入2mL苯-石油醚混合溶液(1:1，V/V)，轻轻摇动后加入2mL%2014％三氟化硼-甲醇溶液，混匀，于45℃水浴中反应30min后依次加入1mL正己烷和适量饱和NaCl溶液，使全部有机相升至试管上部，澄清后取上清液过0.22μm滤膜，滤液装于样品瓶中待检测。
(2)气相色谱-质谱联用：HP-5MS毛细管色谱柱(30m×0.25mm×0.25pm)，载气He，流速1.0mL/min，不分流，7.6522psi恒压，进样口温度为250℃。升温程序：起始柱温50℃，保持2min，8℃/min升至140℃，保持5min，2℃/min升至150℃，10℃/min升至230℃，保持10min。检测温度250℃。质谱条件：离子源温度200。C，电离方式EI，电子能量70eV，灯丝电流150μA，扫描质量范围为35-400m/z。
对比例1
本例中，以基础家禽日粮(不添加特殊的营养强化剂)饲养家禽，得到禽蛋。
基础家禽日粮的组成(重量百分数)如下：
玉米，60.5％；
豆粕，21.4％；
棉籽粕，5％；
菜籽粕，3％；
石粉：8.3％；
磷酸氢钙：1.5％；
食盐：0.3％。
试验选用体重和产蛋率相近的150日龄罗曼白蛋鸡450只。采用半开放式鸡舍三层立体笼养，每排相连的两架(共15个45cm×30cm×30cm鸡笼)作为1个重复组，每个鸡笼3只鸡。
投喂方式：每日饲料投喂量为120-150g/只鸡；每天8:00和14:30各喂料一次。
收集以基础家禽饲料连续喂养15天以后产出的鸡蛋，每组收集60个。对收集的鸡蛋进行检测，结果(取平均值)如下：
表1%20对比例1使用的饲料和所得鸡蛋的成分分析结果
结论：使用常规基础家禽日粮饲喂蛋鸡得到的禽蛋，其蛋黄磷脂中ARA、DHA和DPA含量极低，且无角鲨烯。
对比例2
本例中，以与对比例1相同配方的基础家禽日粮作为基础，向基础家禽日粮中添加各种富含多不饱和脂肪酸的饲料添加剂，制得预混饲料，用于饲喂蛋鸡。除了使用的饲料不同以外，对比例2的其他试验条件和方法与对比例1相同。
对收集的鸡蛋进行检测，结果如下(下表中的百分数是指饲料添加剂的各成分占预混饲料的重量百分比)：
表2 对比例2使用的饲料和所得鸡蛋的成分分析结果
结论：对比例2中，虽然向基础家禽日粮添加了富含多不饱和脂肪酸的添加剂，但蛋鸡对饲料中添加的不饱和脂肪酸利用不充分，产出的禽蛋中DPA含量仍然很低，ARA、DHA含量也偏低，DHA和ARA的比例失衡，并且无法获得蛋黄磷脂中含角鲨烯的禽蛋。
实施例1
本例中，将干燥的被孢霉菌粉、破囊壶藻粉和裂殖壶藻粉按1:1:1的比例进行混合，制成实施例1的饲料添加剂。以与对比例1相同配方的基础家禽日粮作为基础，向基础家禽日粮中添加饲料添加剂，制得营养强化饲料，用于饲喂蛋鸡。除了使用的饲料不同以外，实施例1的其他试验条件和方法与对比例1相同。
对收集的鸡蛋进行检测，结果如下(下表中的百分数是指饲料添加剂占营养强化饲料的重量百分比)：
表3 实施例1使用的饲料和所得鸡蛋的成分分析结果
结论：实施例1中，向基础家禽日粮中按不同的比例添加本发明的饲料添加剂，制得营养强化饲料，用营养强化饲料饲喂蛋鸡，蛋鸡对饲料中的脂质成分吸收/转化效率高，所得的禽蛋中多不饱和脂肪酸ARA、DPA和DHA的含量丰富，并且特别地含有角鲨烯，提高了禽蛋的健康功效。
实施例2
本例中，将干燥的被孢霉菌粉、破囊壶藻粉或海洋球石藻粉、裂殖壶藻粉按不同的组合方式和比例混合，制成四种不同配方的饲料添加剂。以与对比例1相同配方的基础家禽日粮作为基础，向基础家禽日粮中添加饲料添加剂，制得营养强化饲料，用于饲喂蛋鸡。除了使用的饲料不同以外，实施例1的其他试验条件和方法与对比例1相同。
对收集的鸡蛋进行检测，结果如下(下表中的百分数是指饲料添加剂的各成分占营养强化饲料的重量百分比)：
表4 实施例2使用的饲料和所得鸡蛋的成分分析结果
结论：实施例2中，向基础家禽日粮中按不同配方和比例添加本发明的饲料添加剂，制得营养强化饲料，用营养强化饲料饲喂蛋鸡，蛋鸡对饲料中的脂质成分吸收/转化效率高，所得的禽蛋中多不饱和脂肪酸ARA、DPA和DHA的含量丰富，且DHA和ARA的比例处于1:1.5至1:2的区间，该配比特别适合婴幼儿、孕产妇等人群，此外禽蛋中特别地含有角鲨烯，提高了禽蛋的健康功效。
实施例1、2制得的禽蛋中富集了ARA、DPA、DHA等有利于人体健康的多不饱和脂肪酸，且首次实现了禽蛋中含有对人体有较强生物活性的角鲨烯。通过产出富含功能性脂质的禽蛋，解决了功能性脂质来源稀缺的问题，且禽蛋生产成本低，易于普及。另外，在禽蛋中功能性脂质与蛋黄卵磷脂结合，有效增加了脂质的氧化稳定性和生物利用率，为储存和人群摄取提供了很大便利。
以上已经描述了本公开的各实施例，上述说明是示例性的，并非穷尽性的，并且也不限于所披露的各实施例。在不偏离所说明的各实施例的范围和精神的情况下，对于本技术领域的普通技术人员来说许多修改和变更都是显而易见的。本文中所用术语的选择，旨在最好地解释各实施例的原理、实际应用或对市场中的技术改进，或者使本技术领域的其它普通技术人员能理解本文披露的各实施例。
