磷脂浓缩物生产方法
技术领域
本发明涉及磷脂浓缩物的生产方法等。
背景技术
磷脂作为生物体构成成分而言很重要，其中尤其是例如缩醛磷脂等作为具有增强记忆能力等各种效果的功能性材料受到关注。因此，期望有高效地制备磷脂的方法。
目前为止，已经开发出了例如从禽类胸脯肉中利用乙醇提取来提取磷脂等成分的方法。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特开2006－232967号公报
专利文献2：日本特开2010－63406号公报
专利文献3：日本特开2010－65167号公报
专利文献4：日本特开2016－210696号公报
发明内容
发明所要解决的问题
尝试过在从禽类胸脯肉中利用乙醇提取有用成分后、将被认为特别重要的成分的一种、即磷脂浓缩的做法。通常，在提纯油的情况下，使来自动植物的提取物接受脱胶工序，除去胶质。但是，由于磷脂是主要包含于胶质中的成分，因此为了有效地浓缩磷脂，研究了将禽类胸脯肉的乙醇提取物浓缩并使之接受脱胶工序、回收通过离心分离而沉淀的胶质的做法。
利用该方法，能够进行磷脂的浓缩，然而该方法中以离心分离作为必需工序，因此难以扩大制造规模，因而需要开发不使用离心分离地高效地生产磷脂浓缩物的方法。
本发明的目的在于，提供一种方法，在使禽类胸脯肉的乙醇提取液浓缩物接受脱胶工序、回收胶质而得到磷脂浓缩物时，即使不使用离心分离也能够高效地生产磷脂浓缩物，适合于扩大生产规模。
用于解决问题的方法
本发明人等发现了通过将禽类胸脯肉的乙醇提取液浓缩物与特定的含水乙醇的混合液在特定的条件下静置而能够解决上述问题的可能性，进一步反复改良而完成了本发明。
本发明例如包含以下的项中记载的主題。
项1.一种生产磷脂浓缩物的方法，该方法包括(B)将禽类胸脯肉的乙醇提取液浓缩物与40～60质量％乙醇水溶液的质量比为1：0.8～1.2的混合液在40～60℃静置的工序。
项2.根据项1中记载的方法，其中，静置时间为1小时以上。
项3.根据项1或2中记载的方法，其中，禽类胸脯肉的乙醇提取液浓缩物的水分含量为1质量％以下。
项4.根据项1～3中任一项记载的方法，其中，在工序(B)前还包括(A)将禽类胸脯肉的乙醇提取液浓缩物与40～60质量％乙醇水溶液以质量比1：0.8～1.2混合的工序。
项5.根据项1～4中任一项记载的方法，其中，在工序(B)后还包括(C)从静置后分离为上层、中层、以及下层的3层的混合液中回收下层的工序。
项6.根据项5中记载的方法，其中，利用上层及中层的除去来进行下层的回收，该上层及中层的除去通过如下操作来进行：
(i)从分离为3层的混合液中除去上层、在10℃以下的温度静置至下层变为凝胶状后除去中层；或者
(ii)将分离为3层的混合液在10℃以下的温度静置至下层变为凝胶状后除去上层及中层。
项7.根据项1～6中任一项记载的方法，其中，禽类胸脯肉为鸡胸肉。
项8.一种生产磷脂浓缩物的方法，该方法包括(b)将混合液在40～60℃静置的工序，所述混合液包含禽类胸脯肉的乙醇提取物、乙醇、以及水，并且乙醇含量为20～43.5质量％。
项9.根据项8中记载的方法，其中，所述混合液的水分含量为16～36.5质量％。
项10.根据项8或9中记载的方法，其满足以下的(α1)～(α5)的要件中的至少1个要件。
(α1)：静置时间为1小时以上；
(α2)：禽类胸脯肉的乙醇提取液浓缩物的水分含量为1质量％以下；
(α3)：在工序(b)后还包括(c)从静置后分离为上层、中层、以及下层的3层的混合液中回收下层的工序；
(α4)：满足要件(α3)，并且利用上层及中层的除去来进行下层的回收，该上层及中层的除去通过如下操作来进行：
(i)从分离为3层的混合液中除去上层、在10℃以下的温度静置至下层变为凝胶状后除去中层；或者
(ii)将分离为3层的混合液在10℃以下的温度静置至下层变为凝胶状后除去上层及中层；
(α5)：禽类胸脯肉为鸡胸肉。
项11.一种浓缩禽类胸脯肉中含有的磷脂的方法，该方法包括(B)将禽类胸脯肉的乙醇提取液浓缩物与40～60质量％乙醇水溶液的质量比为1：0.8～1.2的混合液在40～60℃静置的工序。
项12.根据项11中记载的方法，其满足以下的(α1)～(α5)的要件中的至少1个要件。
(α1)：静置时间为1小时以上；
(α2)：禽类胸脯肉的乙醇提取液浓缩物的水分含量为1质量％以下；
(α3)：在工序(b)后还包括(c)从静置后分离为上层、中层、以及下层的3层的混合液中回收下层的工序；
(α4)：满足要件(α3)，并且利用上层及中层的除去来进行下层的回收，该上层及中层的除去通过如下操作来进行：
(i)从分离为3层的混合液中除去上层、在10℃以下的温度静置至下层变为凝胶状后除去中层；或者
(ii)将分离为3层的混合液在10℃以下的温度静置至下层变为凝胶状后除去上层及中层；
(α5)：禽类胸脯肉为鸡胸肉。
需要说明的是，上述的所谓满足(α1)～(α5)的要件中的至少1个要件，是指从这些5个要件的全部组合中选择的至少1种组合。即，是指5！种的组合中的任意一种。
发明效果
本发明中包含的生产磷脂浓缩物的方法，在使禽类胸脯肉的乙醇提取液浓缩物接受脱胶工序、回收胶质而得到磷脂浓缩物时，即使不使用离心分离也能够高效地生产磷脂浓缩物，可以说是适合于扩大生产规模的方法。
附图说明
图1表示进行鸡胸肉的乙醇提取液浓缩物与乙醇水溶液的混合及静置并进行混合液的分离的结果。
图2表示对图1的各分离层进行TLC分析的结果。
图3表示进行鸡胗的乙醇提取液浓缩物与乙醇水溶液的混合及静置并进行混合液的分离的结果。
图4表示对图3的各分离层进行TLC分析的结果。
具体实施方式
以下，对本发明的各实施方式进一步详细说明。
本发明中包含的由禽类胸脯肉生产磷脂浓缩物的方法(以下有时称作“本发明的磷脂浓缩物生产方法”)包括(B)将禽类胸脯肉的乙醇提取液浓缩物与40～60质量％乙醇水溶液的质量比为1：0.8～1.2的混合液在40～60℃静置的工序。
需要说明的是，本说明书中，只要没有特别指出，质量％就是表示w/w％。
作为禽类胸脯肉，优选食用禽类(例如鸡、家鸭、鹌鹑、野鸭、野鸡、火鸡等)的胸脯肉，特别优选鸡胸肉。禽类胸脯肉可以裁切为适当的大小。另外，也可以是经过干燥(特别是冷冻干燥)的禽类胸脯肉。
作为禽类胸脯肉的乙醇提取的方法，没有特别限定，可以使用公知的方法、或能够容易地与公知的方法相当的方法。例如，可以通过相对于禽类胸脯肉加入质量比1～5倍左右的乙醇、并搅拌或静置来进行。搅拌或静置也可以加热进行。加热例如可以在30～50℃、或35～45℃左右进行。另外，搅拌或静置的时间没有特别限制，例如可以举出0.5～24小时、或1～12小时左右。所得的提取液根据需要可以利用过滤等进行固液分离。另外，可以对提取残渣进行同样的操作，再次得到提取液，合计到先前得到的提取液中。
需要说明的是，在气温低(特别是冬季)的情况下，有可能在该提取工序中产生析出。此种温度只要是产生析出的温度，就没有限制，具体而言例如可以举出10℃以下、9℃以下、8℃以下、7℃以下、6℃以下、5℃以下、4℃以下、3℃以下、2℃以下、1℃以下、或0℃以下。由于在该析出中包含磷脂，因此若任由析出不管地继续乙醇提取操作，则析出中含有的磷脂不包含于乙醇提取液中，由此最终得到的磷脂浓缩物中含有的磷脂量有可能波动。因而，在产生析出的情况下，优选首先加热而使析出溶解，或者在不产生析出的温度下进行该工序。在加热而使析出溶解的情况下，加热的温度只要是使析出溶解、并且对品质不造成影响的范围，就没有特别限制，例如可以例示出20～30℃左右。另外，在不产生析出的温度下进行乙醇提取工序的情况下，例如可以在20～30℃左右的温度下进行该工序。
作为将所得的乙醇提取液浓缩的方法，没有特别限定，可以使用公知的方法、或能够容易地与公知的方法相当的方法。例如，可以举出减压浓缩、或加热浓缩等。
浓缩优选进行至使所得的乙醇提取液浓缩物的水分含量达到1质量％以下为止，更优选进行至达到0.9质量％以下、0.8质量％以下、0.7质量％以下、0.6质量％以下、或0.5质量％以下为止，进一步优选进行至达到0.4质量％以下、0.3质量％以下、或0.2质量％以下为止。需要说明的是，该水分含量是利用卡尔费休法求出的值。
另外，所得的乙醇提取液浓缩物的乙醇含量优选为15质量％以下，更优选为14质量％以下、13质量％以下、12质量％以下、11质量％以下、10质量％以下、9质量％以下、或8质量％以下。需要说明的是，该乙醇含量是从利用干热干燥法(105℃、3小时)求出的干燥减量中减去上述水分含量而得的值。例如，在该干热干燥减量为90质量％、上述水分含量为1质量％的情况下，乙醇含量为100－90－1＝9(质量％)。
将禽类胸脯肉的乙醇提取液浓缩物与40～60质量％乙醇水溶液以质量比1：0.8～1.2混合。该质量比的下限例如可以为1：0.85、0.9、0.95、或1。另外，该质量比的上限例如可以为1：1.15、1.1、1.05、或1。另外，所用的乙醇水溶液的浓度的下限例如可以为41、42、43、44、45、46、47、48、49、或50质量％。另外，所用的乙醇水溶液的浓度的上限例如可以为59、58、57、56、55、54、53、52、51、或50质量％。
将如此所述地得到的混合液在40～60℃静置。由此，混合液分离为3层(上层、中层、下层)，磷脂浓缩于下层。
静置时的温度的下限例如可以为41、42、43、44、45、46、47、48、49、或50℃。另外，静置时的温度的上限例如可以为59、58、57、56、55、54、53、52、51、或50℃。另外，静置时的温度只要为该温度范围，则也可以变化，然而优选尽可能恒定，即使在发生变化的情况下，也优选变化幅度小(例如变化幅度为1～5℃、或1～3℃左右)，另外变化的速度也优选尽可能慢。
作为静置的时间，只要是混合液被层分离的范围，就没有特别限制，例如优选为1小时以上。也可以为2小时以上、3小时以上、4小时以上、5小时以上、或6小时以上。静置时间的上限没有特别限制，例如可以例示出24小时以下、18小时以下、12小时以下、或10小时以下。
如上所述，在分离为3层的混合液的下层浓缩有磷脂。因而，本发明的磷脂浓缩物生产方法可以还包括从静置后分离为3层的混合液中回收下层的工序。
下层的回收例如可以通过如下操作来进行，即，(i)从分离为3层的混合液中除去上层，在10℃以下的温度静置至下层变为凝胶状后除去中层；或者(ii)将分离为3层的混合液在10℃以下的温度静置至下层变为凝胶状后除去上层及中层。
无论在(i)、(ii)的哪一个中，这些工序中的静置温度都为10℃以下，例如可以为9℃以下、8℃以下、7℃以下、6℃以下、5℃以下、4℃以下。另外，作为该静置时间，只要是下层变为凝胶状的范围，就没有特别限制，例如可以例示出12小时以上。
另外，对于禽类胸脯肉的乙醇提取液浓缩物与40～60质量％乙醇水溶液的质量比为1：0.8～1.2的混合液而言，若也考虑上述的乙醇提取液浓缩物的乙醇含量的优选范围，则例如可以说是如下的混合液，即，包含禽类胸脯肉的乙醇提取物、乙醇、以及水，并且乙醇含量为20～43.5质量％。该混合液的乙醇含量的下限可以为21、22、23、24、25、26、27、28、29、或30质量％。另外，该混合液的乙醇含量的上限可以为43、42、41、40、39、38、37、36、35、34、或33质量％。另外，对于该混合液的水含量而言，若也考虑上述的乙醇提取液浓缩物的水分含量的优选范围，则例如可以说是16～36.5质量％。该混合液的水含量的下限可以为17、18、19、20、21、22、23、或24质量％。另外，该混合液的水含量的上限可以为36、35、34、33、32、31、30、29、28、27、或26质量％。
另外，本发明还包含将禽类胸脯肉中含有的磷脂浓缩的方法，该方法包括(B)将禽类胸脯肉的乙醇提取液浓缩物与40～60质量％乙醇水溶液的质量比为1：0.8～1.2的混合液在40～60℃静置的工序。该方法可以经过与上述的生产磷脂浓缩物的方法相同的工序，因此，关于上述的生产磷脂浓缩物的方法的说明也直接适用于将该磷脂浓缩的方法。
需要说明的是，本说明书中所谓“包含”，也包括“本质上包含”和“由～组成”("comprising"一词包括"consisting essentially of”和"consisting of.")。
[实施例]
以下，对本发明进行更具体的说明，然而本发明并不限定于下述的例子。
需要说明的是，作为鸡胸肉，使用了经过冷冻干燥的鸡胸肉(FD鸡胸肉)。另外，只要没有特别指出，％就是表示质量(w/w)％。
乙醇提取
将FD鸡胸肉42kg投入提取釜。将FD鸡胸肉的4倍量(w/v)的99％乙醇(168L)投入提取釜并进行氮置换后，一边搅拌一边加热，达到40℃后，保持90分钟。以30目进行过滤后，将提取液回收到桶中。将第1次的提取残渣投入提取釜后，将FD鸡胸肉的2.5倍量(w/v)的99％乙醇(105L)投入釜中，进行氮置换后，一边搅拌一边加热，达到40℃后，保持90分钟。以30目进行过滤后，将提取液回收到桶中。对该提取液用10S滤纸进行抽滤。将所得的液体作为乙醇提取液使用。
乙醇提取液的减压浓缩
对乙醇提取液在内温40℃以下进行减压，减压浓缩至全量装入50L缸的程度的量(约8kg)为止。将该一次浓缩液装入50L缸中并在外温50～60℃进行减压。将所得的浓缩液以30目进行过滤后，测定出重量，其结果为5.12kg。将该浓缩液作为乙醇提取液浓缩物，在4℃保管至使用为止。
需要说明的是，分别利用干热干燥法(105℃、3小时)测定出乙醇提取液浓缩物的干燥减量，利用卡尔费休法测定出水分量。另外，利用扣除法(日文原文：差引法)算出乙醇浓度。结果如下所示。干燥减量：8.05％、水分：0.15％、乙醇：7.9％。
乙醇提取液浓缩物与乙醇水溶液的混合研究
＜研究1＞
相对于乙醇提取液浓缩物15g，等量添加(w/w)50、60、70、或80％乙醇水溶液，在室温下搅拌。在室温下静置3小时后，确认了分离状况。
＜研究2＞
相对于乙醇提取液浓缩物10g，等量添加(w/w)25、50、或75％乙醇水溶液，加热搅拌至50℃为止。在50℃静置3小时后，确认了分离状况。
＜TLC分析＞
对各研究中分离出的层中含有的成分利用薄层色谱法(TLC)进行了确认。更具体而言，使用以薄层板(硅胶)制作的薄层，利用流动相(氯仿/甲醇/水＝65/25/4)使研究1及研究2中分离出的各层展开而将中性脂肪与磷脂分离。作为检测溶液使用了10％硫酸。
在研究1中，在等量混合了50％乙醇水溶液的情况下，变为乳化状态，无法确认到分离。在等量混合了60、70、或80％乙醇水溶液的情况下，观察到2层的分离，然而在利用TLC确认各个层的脂质分布后，在任一层中都存在中性脂肪和磷脂，分离不充分。根据该结果可以明确，在室温条件下分离不充分。
在研究2中，在等量混合了25％乙醇水溶液的情况下，变为乳化状态，无法确认到分离，然而在等量混合了50或75％乙醇水溶液的情况下，分离为3层(图1)。根据TLC分析，在等量混合了75％乙醇的情况下，在磷脂最多的下层级分中也大量存在有中性脂肪、胆固醇。另一方面发现，在等量混合50％乙醇水溶液的情况下，在上层主要存在有中性脂肪，在下层主要存在有磷脂(图2)。需要说明的是，图2中，(A)表示上层，(B)表示中层，(C)表示下层。
根据该结果可知，通过等量混合50％乙醇水溶液并在50℃静置，对于禽类胸脯肉的乙醇提取液浓缩物，即使不使用离心分离，也能够高效地得到磷脂浓缩物。
另外，在发生了3层分离的状态下在4℃保存的结果是，仅上层和下层凝固。通过利用该特征，能够更加高效地仅回收下层。具体而言，首先在发生了3相分离的状态下仅将上层抽吸除去，在4℃静置一晩后，将中层(液状)与下层(凝胶状)固液分离而能够容易地仅采集下层。
需要说明的是，不使用鸡胸肉，而使用鸡胗或鸡皮进行了同样的研究(乙醇提取、乙醇提取液浓缩、以及乙醇提取液浓缩物与乙醇水溶液的混合及静置)，其结果是，中性脂肪与磷脂的分离不充分。图3中表示出进行鸡胗的乙醇提取液浓缩物与乙醇水溶液的混合及静置并进行混合液的分离的结果，图4中表示出对图3的各分离层进行TLC分析的结果。需要说明的是，图4中，乙醇浓度(含量)50％的(A)表示上层，(B)表示中层，(C)表示下层，乙醇浓度(含量)75％的(A)表示上层，(B)表示下层(乙醇浓度75％时仅分离为2层)。
根据这些结果可知，该方法特别适合用于禽类胸脯肉。
