一种动物饲料用替抗添加剂及制备方法
技术领域
本发明涉及一种饲料添加剂，具体涉及一种动物饲料用替抗添加剂及制备方法。
背景技术
20世纪中叶，抗生素的发现以及化学抗菌物质合成的成功，首先在人类投入使用，随后被广泛用作饲料添加剂，在动物保健和畜牧生产中发挥了重要作用。但由于对这些添加剂的长期使用及滥用，其弊端日益得到广泛的重视。
1、抗生素在畜禽产品肉、蛋、奶、毛、皮中残留，危害人体健康，如产生“三致”、过敏，甚至产生人类目前的科学水平还未能了解的疾病或潜在危害；
2、导致畜禽体内外的微生物对抗生素产生耐药性或抗药性，药效降低，用药量不断增加，使养殖成本不断增加的同时也使药物残留更为严重，形成恶性循环；
3、畜禽长期使用或滥用抗生素后，在抑制致病微生物的同时，也杀灭了动物体内正常的有益微生物菌群，使机体正常微生态体系(医学界称之为“新的生理系统”)失衡，造成动物内源性感染或二重感染；
4、使畜禽对抗生素产生依赖，抑制动物免疫系统的生长发育或降低了动物的免疫功能，使抗病能力下降。
由于抗生素等药物添加剂带来的种种弊端日趋明显，我国在2019年发布了《中华人民共和国农业农村部公告第194号》、《中华人民共和国农业农村部公告第246号》，以废止仅有促生长用途的药物饲料添加剂等品种质量标准，注销相关兽药产品批准文号和进口兽药注册证书；世界各国的科学家都在努力寻求和开发无毒副作用的科学饲料替抗饲料添加剂。因此，开发无毒副作用的科学替抗饲料添加剂刻不容缓。
发明内容
本发明的目的在于提供一种动物饲料用替抗添加剂及制备方法。该替抗添加剂利用植物精油、酸化剂和β-葡聚糖的相互协同作用，作为一种饲料用替抗添加剂，可以减少或替代抗生素药物的使用，是一种有良好饲养效果和经济效果的动物饲料用替抗添加剂。本发明提供的诸多技术方案中的优选技术方案所能产生的诸多技术效果详见下文阐述。
为实现上述目的，本发明提供了以下技术方案：
本发明提供的一种动物饲料用替抗添加剂，其制备包括下述主料：植物精油、酸化剂和β-葡聚糖。
进一步的，各主料的重量份分别为：植物精油50-100份；酸化剂820-1840份；β-葡聚糖30-100份。
进一步的，各主料的重量份分别为：植物精油50-80份；酸化剂840-880份；β-葡聚糖40-80份。
进一步的，各主料的重量份分别为：植物精油80份；酸化剂880份；β-葡聚糖40份。
进一步的，所述植物精油为桉叶油。
进一步的，所述酸化剂为柠檬酸、丙酸或乳酸。
进一步的，其制备还包括辅料，所述辅料为包被剂，所述包被剂与植物精油的重量比为12-18:10-15，且包被剂的重量要重于植物精油的重量。
进一步的，所述包被剂与植物精油的重量比为15:12。
进一步的，所述包被剂为二氧化硅。
本发明提供的动物饲料用替抗添加剂的制备方法，包括下述步骤：
S1、将植物精油进行包被处理，得包被颗粒；
S2、将步骤S1中所得的包被颗粒与酸化剂以及β-葡聚糖混合搅拌均匀，即得动物饲料用替抗添加剂成品。
进一步的，所述S1中，进行包被处理时，所得包被颗粒的粒径为300-800nm。
本发明中应用的原料的功效：
1、桉叶油作用效果
植物精油，又称芳香油，是以植物为原料提取的有特殊气味的低相对分子质量的植物源次生代谢产物。桉叶油，又称白千层脑、桉树脑，是一种无色油状液体，在桉树油、玉树油、樟脑油、月桂叶油等物质中提取而来，具有抑菌、促生长、抗氧化和提高免疫力等作用。
1.1抑菌和促生长
桉叶油最主要的作用就是抑菌作用，桉叶油的抑菌作用机理不是通过某一特定的作用机理实现的，而是通过作用于细胞膜和进入细胞内部两种途径来实现。桉叶油对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌等肠道有害菌群有很好的抑菌效果。很多研究也表明桉叶油可以促进动物采食和生长，桉叶油通过特有的气味刺激动物大脑三叉神经进而诱发食欲。也有学者认为，香味被大脑嗅觉神经感知，促使大脑前叶分泌脑啡肽和内啡肽，调节机体的机能。此外，桉叶油能刺激消化道内消化液(唾液、胃液、肠液和胆汁等)和各种消化酶的分泌，促进肠道绒毛发育，增加绒毛的高度从而增加和食糜的接触面积，从而提升肠道内饲料转化率。
1.2调节免疫力
在提高免疫力方面，桉叶油能提高机体免疫器官指数、促进抗体及补体生成。研究表明，饲料中添加桉叶油降低了嗜水气单胞菌攻毒后斑点叉尾鮰死亡率，这表明植桉叶油够提高动物疾病抵抗能力。补体、免疫球蛋白和细胞因子含量高低常能反映动物机体免疫力强弱。虹鳟试验发现，桉叶油显著提高血清中总补体含量和溶菌酶活性；仔猪中也得到了同样结果，桉叶油显著提高仔猪血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、补体3(C3)和补体4(C4)含量。
炎症反应是一种重要的免疫应答，过度的炎症反应会损害动物健康。研究表明，饲料中添加桉叶油能缓解肉鸡及小鼠的肠道炎症反应，并降低断奶仔猪腹泻指数，进一步研究发现，桉叶油分别降低了肠道上皮细胞和单核巨噬细胞中促炎因子TNF-α和IL-6的含量。核转录因子-kB(NF-kB)是调控细胞因子或其它炎症反应相关基因表达的重要转录因子。研究发现，桉叶油降低了小鼠乳腺上皮细胞和巨噬细胞NF-kB%20p65磷酸化水平，并可通过抑制小鼠上皮细胞中NF-kB的激活降低促炎细胞因子的产生。以上结果表明，桉叶油能通过降低促炎因子和NF-kB%20p65信号途径来缓解动物炎症反应，促进动物健康。
1.3抗氧化
桉叶油通过直接和间接的方式发挥抗氧化的作用，其能阻止自由基生成并与过氧自由基结合形成稳定的物质，进而抑制或阻止自由基链式反应的发生。桉叶油能增强动物体内抗氧化酶的活性，抑制蛋白质的氧化以及膜脂质与金属盐的过氧化反应。张强等研究表明，在低能量仔猪日粮中添加桉叶油能提高血清中类胰岛素生长因子-1含量，使超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性增强。Hashemipour等研究表明，在肉鸡日粮中添加桉叶油能提高血清中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性。在虹鳟试验中发现，桉叶油能降低肌肉中丙二醛(MDA)含量，提高血清中过氧化氢酶(CAT)及肌肉谷胱甘肽硫转移酶(GST)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性。抗氧化酶活性与其基因表达密切相关，而抗氧化酶基因表达受到核因子相关因子2(Nrf2)信号分子的调控。研究发现，桉叶油上调成肌细胞Nrf2的蛋白表达，表明桉叶油可能通过Nrf2调控抗氧化酶基因表达。以上结果表明，桉叶油能降低动物脂质过氧化产物，调节抗氧化物质，且可能通过Nrf2信号分子调控氧化酶的基因表达，提高抗氧化酶活性，降低动物机体氧化损伤。
2、葡聚糖作用效果
β-葡聚糖是一类由葡萄糖单元通过糖苷键连接起来的高分子聚合物。其中，β-1,3-D-葡聚糖因其独特和多样的生物活性及功能受到人们最广泛的关注。
2.1免疫调节
β-葡聚糖作为免疫调节剂参与先天免疫和获得性免疫，它可以直接或间接作用于免疫系统，通过激活单核细胞、巨噬细胞和中性粒细胞促发一系列免疫活性。β-葡聚糖口服后穿过肠道进入体内，再由吞噬细胞经淋巴系统运送至免疫器官，后将其释放进入血液中发挥作用。β-葡聚糖主要通过识别先天性免疫细胞上的受体对免疫系统进行调节，这在宿主防御中起重要作用，也为宿主免疫应答提供了机会。这些受体被称为模式识别受体(PRRs)，主要包括Dectin-1、Toll样受体(TLRs)、补体受体3(CR3)、清道夫受体(SRs)和乳糖神经酰胺(LacCer)，它们由不同的免疫细胞表达在细胞表面或细胞内，包括但不限于巨噬细胞、单核细胞、中性粒细胞、树突状细胞和自然杀伤细胞。
我们大量的研究表明，新型β-葡聚糖具有较强免疫调节作用。乳仔猪的试验中发现，添加新型β-葡聚糖能够调节血液中γ干扰素(IFN-γ)含量。IFN-γ作为一种重要的免疫调节因子，可以通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白，从而抑制病毒的复制。添加50mg/kg和100mg/kg新型β-葡聚糖使血液中IgM水平分别提高了33.33％和31.25％。仔猪攻毒试验中，对感染流行性胃肠炎病毒(PEDV)的仔猪饲喂200mg/kg新型β-葡聚糖，与攻毒组相比，日采食量、日增重和料肉比均显著性改善，恢复到正常生长水平。饲粮添加新型β-葡聚糖可显著提高空肠黏膜中sIgA、IL-4和IFN-γ水平(P<0.05)，显著降低空肠黏膜中IL-2水平(P<0.05)，并显著缓解了PEDV攻毒对仔猪空肠黏膜中sIgA、IL-2、IL-4和IFN-γ的影响(P<0.05)。在小鼠试验中同样发现了，新型β-葡聚糖不仅能够调节血液中γ干扰素(IFN-γ)含量，日粮中添加0.025％β-葡聚糖，血液中IgG含量提高了12.18％，IgM水平较对照组也有升高趋势。
2.2改善肠道健康
肠道是动物机体最重要的消化器官之一，也是体内最大的免疫器官，各种营养物质主要在此吸收转运，经由肠道感染病原微生物是引起动物死淘的重要原因。近年来，肠道健康受到了养殖从业者们的广泛关注，尤其是肠道菌群对机体免疫调节的作用。动物肠道中定植了数量最庞大、种类最丰富的菌群，肠道菌群功能是肠道功能中的重中之重。大量试验表明，新型β-葡聚糖能够改善肠道菌群结构，维持微生态平衡，促进肠道健康。在仔猪日粮中添加100mg/kg新型β-葡聚糖后发现，空肠和结肠中双歧杆菌显著增加，盲肠中乳酸杆菌显著增加，显著降低盲肠大肠杆菌数量，对总菌数无显著影响。仔猪PEDV攻毒试验显示，PEDV攻毒显著降低仔猪盲肠内容物中双歧杆菌、乳酸杆菌和总菌的数量(P<0.05)，显著增加盲肠内容物中大肠杆菌的数量(P<0.05)。饲粮添加新型β-葡聚糖可显著提高仔猪盲肠内容物中双歧杆菌、乳酸杆菌和总菌数量(P<0.05)，并有效缓解PEDV攻毒降低仔猪盲肠内容物中双歧杆菌、乳酸杆菌和总菌数量的影响(P<0.05)。在小鼠喂养新型β-葡聚糖试验中，小鼠盲肠内乳酸杆菌和双歧杆菌显著性增加，经qPCR证实，其相对数量分别增加了3.12倍和6.18倍。犊牛、AA肉鸡和育肥猪中饲喂β-葡聚糖后均能提升肠道中乳酸杆菌和双歧杆菌含量。
β-葡聚糖增加肠道益生菌可能是由于动物肠道中不含有葡聚糖酶，β-葡聚糖到达动物消化道后肠，乳酸杆菌和双歧杆菌能够利用β-葡聚糖发酵代谢产生大量的短链脂肪酸。并且诱导Hif%201α转录水平增加，Hif%201α使肠道始终处于厌氧的化境中，激发抗菌肽和短链脂肪酸的产生，促使肠道pH降低，从而在不改善多样性的前提下，使肠道厌氧有益菌增值，稳定肠道内微环境，抵抗病菌入侵。
2.3消除氧化应激
氧化应激即机体自由基生成增加或清除能力降低，高活性分子如活性氧自由基(ROS)进而活性氮自由基(RNS)产生过多，引起机体氧化系统和抗氧化系统紊乱，导致自由基在体内积累而引起的氧化损伤过程。抗氧化酶是生物体在漫长的进化过程中，形成的应对氧化应激的重要生物防线之一，能够有效清除体内的活性氧，包括超氧化物歧化酶、谷胱甘肽还原酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶等。其中超氧化物歧化酶是动物体内最重要的抗氧化物酶之一，具有特殊的生物活性，能清除生物体内新陈代谢过程中产生的有毒物质，是超氧阴离子的清除因子，通常作为衡量动物机体抗氧化能力的一个重要指标，同时也常与机体的免疫水平密切相关。
β-葡聚糖在提高机体抗氧化能力，清除体内自由基方面有显著作用效果。我们在凡纳滨对虾日粮中添加200mg/kg新型β-葡聚糖后发现，与对照组相比，总超氧化物歧化酶、总抗氧化能力、酚氧化物酶和酸性磷酸酶含量显著增加，体内丙二醛含量显著降低。在其它对虾试验中也得到了相似结果，沈文英等在凡纳滨对虾中也发现，添加β-葡聚糖后对过氧化物酶、溶菌酶、酸性磷酸酶都显著提高。以上试验表明β-葡聚糖对增强对虾抗氧化能力有增强作用。吴春玉在花鲈中添加β-葡聚糖能显著增加花鲈血清超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力，提升谷胱甘肽或氧化物酶，清除过氧化氢，降低血清中丙二醛含量。在蟹中，β-葡聚糖也具有抗氧化活性。目前为止，以β-葡聚糖为主的多糖，在抗氧化应激功能方面受到从业者广泛关注，其抗氧化能力也受到广泛认可。
2.4替代抗生素
我们在仔猪试验中发现，200mg/kg使用剂量的β-葡聚糖能完全代替50mg/kg使用剂量的喹烯酮对于生长性能和肠道粘膜屏障功能的影响。添加β-葡聚糖后与喹烯酮组相比，绒毛高度、隐窝深度和屏障相关基因表达量均无显著差异，而肠道中双歧杆菌和乳酸杆菌数量显著高于抗生素组(P<0.05)。结果显示，β-葡聚糖除通过肠道物理屏障和生物学屏障功能以外，还通过增强肠道局部免疫抵抗力来实现。我们还完成了β-葡聚糖和喹乙醇在断奶仔猪的对比试验，结果显示200mg/kg的β-葡聚糖能完全替代20g/t的喹乙醇在肠道和生长性能的作用效果，并对肠道炎症、抗氧化指标和肠道微生态均有改善作用。β-葡聚糖在未来的应用中，替代抗生素将会是最重要的作用功效。我们完成的β-葡聚糖替抗试验和替抗解决方案，希望能为饲料企业在无抗饲料的研发提供借鉴和参考。
3、柠檬酸作用效果
目前，用做饲料添加剂的酸有甲酸、富马酸、醋酸、乳酸、柠檬酸、丙酸、山梨酸和各种混合酸等。在饲料中添加酸化剂有如下作用：1)降低动物胃肠道的pH，保持各种消化酶的活力，从而促进动物消化。2)提高动物的采食量。3)抑制有害类物质生物胺的生成，从而减少有毒物质。
3.1柠檬酸提高生长性能
仔猪早期断奶后，由于自身消化机能发育不完全，特别是胃酸分泌不足，加之断奶后营养、环境和心理变化的刺激，肠道受损伤，食物不能被很好地消化，可引起大肠杆菌等病原菌大量繁殖，产生腹泻等症状，严重影响了仔猪的生产。为了解决这些不利因素，可以通过添加柠檬酸来提高仔猪胃酸酸度从而提高其消化吸收功能。Valchev在6～20kg仔猪饲粮中添加柠檬酸0.3％和0.5％，与对照组相比，添加柠檬酸组仔猪平均日增重提高7％～9％，病原性及与病原性相关的微生物数量也相应减少。
3.2柠檬酸降低肠道pH，肠道菌群的影响
有机酸(包括短链脂肪酸)能减少猪肠道中病原微生物的数量，如肠球菌、酵母菌、乳酸菌等。其机理有：1)有机酸进入病原菌的细胞膜，破坏了原生质，从而抑制或杀死病菌。2)在猪小肠的肠壁上形成H+(氢离子)保护层，抑制病原菌的繁殖，保护了肠壁不被细菌破坏。3)在胃部水解产生大量的H+，激活了胃蛋白酶，抑制或杀死部分病原菌。4)有机酸也是肠黏膜生长发育的调节剂，促进上皮细胞的生长和营养物的吸收。5)有机酸是合成必须氨基酸和DNA的前体物质。6)加快血液流动速度，消除血胆固醇过少等现象。
3.3柠檬酸对腹泻的影响
适宜的酸度可以改善断奶仔猪消化道酸度，维持仔猪消化道系统正常生理功能，调节猪体内酸碱平衡，同时提高断奶仔猪的日增重和饲料利用率，降低断奶仔猪的腹泻率。肠道菌群特别是厌氧菌(乳酸杆菌、双歧杆菌)对外袭菌起屏障作用。正常情况下，仔猪胃肠道微生物都保持一种特定的平衡状态，但外界等条件改变时，可导致微生物菌群的不平衡，如有害菌的比例升高，有益菌的比例下降，最终导致腹泻。
基于上述技术方案，本发明实施例至少可以产生如下技术效果：
(1)本发明提供的动物饲料用替抗添加剂及制备方法，应用的植物精油、酸化剂和β-葡聚糖都具有替抗功效，但单一型添加剂的作用效果尚不理想；β-葡聚糖作为益生元可以选择性促进肠道内有益微生物的增殖，抑制有害微生物生长，提高机体免疫能力，改善动物的生产性能；而酸化剂不仅能使饲料适口性得到改善，而且能促进仔猪消化机能提早成熟，促进消化道内有益菌的生长，抑制有害菌的繁殖，从而防治仔猪腹泻的发生，提高仔猪生长性能；植物精油以其无毒、抗菌性好、微量高效等优点，并且是一种天然的调味剂，能刺激动物，尤其是幼龄动物食欲；所以由三种添加剂组成的产品在功能上能起到相辅相成的作用效果，植物精油、酸化剂和β-葡聚糖不仅在理论作用机理上具有相互协同的作用方式，并且在应用中也展现出了相互协同的作用效果。
(2)本发明提供的动物饲料用替抗添加剂及制备方法，应用的β-葡聚糖为天然水溶性的小分子β-葡聚糖，纯度在90％以上，其具有良好的吸收效果；且β-葡聚糖中的β-1,3-糖苷键的占比达到75％以上，更有利于动物的吸收。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。
原料说明：
β-葡聚糖：采用的是四川大想生物科技有限公司售卖的水溶性β-1,3葡聚糖，为固体粉末。
一、制备实施例：
实施例1：
制备肉鸡饲料添加剂：
1.1原料
按重量份，桉叶油50份；柠檬酸820份；β-葡聚糖30份；二氧化硅60份。
1.2制备方法
S1、将植物精油和包被剂加入包被机内进行包被处理，得包被颗粒，所得包被颗粒的粒径为500nm；
S2、将步骤S1中所得的包被颗粒与酸化剂以及β-葡聚糖混合搅拌均匀，即得动物饲料用替抗添加剂成品。
实施例2：
制备蛋鸡饲料添加剂：
2.1原料
按重量份，桉叶油80份；柠檬酸880份；β-葡聚糖40份；二氧化硅96份。
2.2制备方法
S1、将植物精油和包被剂加入包被机内进行包被处理，得包被颗粒，所得包被颗粒的粒径为300nm；
S2、将步骤S1中所得的包被颗粒与酸化剂以及β-葡聚糖混合搅拌均匀，即得动物饲料用替抗添加剂成品。
植物精油50-100份；酸化剂820-1840份；β-葡聚糖40-100份。
实施例3：
制备幼龄猪饲料添加剂：
3.1原料
按重量份，桉叶油100份；柠檬酸1840份；β-葡聚糖60份；二氧化硅125份。
3.2制备方法
S1、将植物精油和包被剂加入包被机内进行包被处理，得包被颗粒，所得包被颗粒的粒径为800nm；
S2、将步骤S1中所得的包被颗粒与酸化剂以及β-葡聚糖混合搅拌均匀，即得动物饲料用替抗添加剂成品。
实施例4：
制备育肥猪饲料添加剂：
4.1原料
按重量份，桉叶油80份；柠檬酸880份；β-葡聚糖40份；二氧化硅96份。
4.2制备方法
S1、将植物精油和包被剂加入包被机内进行包被处理，得包被颗粒，所得包被颗粒的粒径为600nm；
S2、将步骤S1中所得的包被颗粒与酸化剂以及β-葡聚糖混合搅拌均匀，即得动物饲料用替抗添加剂成品。
实施例5：
制备母猪饲料添加剂：
5.1原料
按重量份，桉叶油100份；柠檬酸840份；β-葡聚糖60份；二氧化硅107份。
5.2制备方法
S1、将植物精油和包被剂加入包被机内进行包被处理，得包被颗粒，所得包被颗粒的粒径为400nm；
S2、将步骤S1中所得的包被颗粒与酸化剂以及β-葡聚糖混合搅拌均匀，即得动物饲料用替抗添加剂成品。
实施例6：
制备水产饲料添加剂：
5.1原料
按重量份，桉叶油80份；柠檬酸820份；β-葡聚糖100份；二氧化硅96份。
5.2制备方法
S1、将植物精油和包被剂加入包被机内进行包被处理，得包被颗粒，所得包被颗粒的粒径为600nm；
S2、将步骤S1中所得的包被颗粒与酸化剂以及β-葡聚糖混合搅拌均匀，即得动物饲料用替抗添加剂成品。
二、实验例
1、将实施例1-6中制备的添加剂进行性能检测，检测其耐酸性和耐温性，检测结果如下表1所示：
耐酸性实验：为了验证饲料添加剂过胃酸的能力，需要在pH≤2，2-4小时检测其存留量。
耐温性实验：为了验证在饲料调质条件下存留率，耐温试验需要在80℃-125℃温度下，水浴5分钟。
表1实施例制备的添加剂性能
2、将实施例1-6中制备的添加剂进行投喂实验：
下述投喂实验中使用的抗生素为：
金霉素：金河生物科技股份有限公司生产，金霉素，ANADA200-510；
喹烯酮：中牧实业股份有限公司生产，喹烯酮的CAS编号：23696-28-8，EINECS编号为：245-832-7；
氧化锌：山东宏祥锌业有限公司生产，氧化锌的CAS编号：1314-13-2，EINECS编号为：215-222-5；
吉他霉素：浙江海正药业股份有限公司生产，兽药添字(2006)110272044。
实验例1：
肉鸡投喂实验
实验对象：选择生长条件、健康状况一致，1天龄的30只肉鸡，随机分成三组(对照组、阳性对照组、试验组)，每组均为10只；
对照组：常规日粮；
阳性对照组：常规日粮，常规日粮中添加有抗生素，抗生素的添加按下述标准：
1-21天：吉他霉素50g/T+喹烯酮50g/T+氧化锌3kg/MT；
22-42天：金霉素75g/T+杆菌肽锌100g/T+喹烯酮50g/T；
试验组：常规日粮，常规日粮中按0.05kg/t添加有实施例1中制备的肉鸡饲料添加剂；
试验周期：1-42天
检测指标：生长性能(1-21天的料肉比、采食量、平均日增重；21-42天的料肉比、采食量、平均日增重)、死淘率、免疫器官指数、屠宰率和肉品质。
实验结果：如下表2所示：
表2肉鸡投喂实验结果
实验例2：
蛋鸡投喂实验：
实验对象：选择生长条件、健康状况一致，40周龄的30只蛋鸡，随机分成三组(对照组、阳性对照组、试验组)，每组均为10只；
对照组：常规日粮；
阳性对照组：常规日粮，常规日粮中添加有抗生素，抗生素的添加标准为：吉他霉素50g/T+喹烯酮50g/T+氧化锌3kg/MT；
试验组：常规日粮，常规日粮中按0.075kg/t添加有实施例2中制备的蛋鸡饲料添加剂；
试验周期：41-48周；
检测指标：产蛋数量、产蛋重量、采食量、料蛋比、蛋壳强度、蛋壳厚度、哈氏单位、蛋鸡死亡率和血清中球蛋白、总蛋白含量。
实验结果：如下表3所示：
表3蛋鸡投喂实验结果
实验例3：
幼龄猪投喂实验：
实验对象：选择生长条件、健康状况一致，断奶后28天的30只幼龄猪，随机分成三组(对照组、阳性对照组、试验组)，每组均为10只；
对照组：常规日粮；
阳性对照组：常规日粮，常规日粮中添加有抗生素，抗生素的添加标准为：吉他霉素50g/T+喹烯酮50g/T+氧化锌3kg/MT；
试验组：常规日粮，常规日粮中按0.15kg/t添加有实施例3中制备的幼龄猪饲料添加剂；
试验周期：断奶28天后开始投喂；
检测指标：腹泻率、生长指标(平均日增重、料肉比、平均采食量)、血液免疫指标和肠道菌群。
实验结果：如下表4所示：
表4幼龄猪投喂实验结果
实验例4：
育肥猪投喂实验：
实验对象：选择生长条件、健康状况一致，25kg的30只育肥猪，随机分成三组(对照组、阳性对照组、试验组)，每组均为10只；
对照组：常规日粮
阳性对照组：常规日粮，常规日粮中添加有抗生素，抗生素的添加标准为：吉他霉素50g/T+喹烯酮50g/T+氧化锌3kg/MT；
试验组：常规日粮，常规日粮中按0.1kg/t添加有实施例4中制备的育肥猪饲料添加剂；
试验周期：25kg-110kg
检测指标：生长指标(平均日增重、料肉比、平均采食量)、屠宰率(胴体长、肉色、肉质pH值、滴水损失等)和肠道菌群。
实验结果：如下表5所示：
表5育肥猪投喂实验结果
实验例5：
母猪投喂实验
实验对象：选择生长条件、健康状况一致，妊娠后期85d的30只母猪，随机分成三组(对照组、阳性对照组、试验组)，每组均为10只；
对照组：常规日粮
阳性对照组：常规日粮，常规日粮中添加有抗生素，抗生素的添加标准为：吉他霉素50g/T+喹烯酮50g/T+氧化锌3kg/MT；
试验组：常规日粮，常规日粮中按0.15kg/t添加有实施例5中制备的母猪饲料添加剂；
试验周期：妊娠后期85d-哺乳期结束；
检测指标：母猪便秘程度、繁殖性能(窝产仔数、死胎、畸形胎)、仔猪初生重、断奶平均体重、断奶仔猪存活率、血液免疫指标等。
实验结果：如下表6所示：
表6母猪投喂实验结果
实验例6：
南美白对虾投喂实验：
实验对象：选择南美白对虾优质种苗3000尾，随机分成三组(对照组、阳性对照组、试验组)，每组均为1000尾；
对照组：常规日粮
阳性对照组：常规日粮，常规日粮中添加有抗生素，抗生素的添加标准为：吉他霉素50g/T+喹烯酮50g/T+氧化锌3kg/MT；
试验组：常规日粮，常规日粮中按0.16kg/t添加有实施例6中制备的水产饲料添加剂；
试验周期：初始体重1.00±0.02g，10周；
检测指标：成活率(SR)、增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、饵料系数(FCR)、肥满度(CF)、抗氧化指标(总抗氧化力、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、丙二醛)、溶菌酶。
实验结果：如下表7所示：
表7南美白对虾投喂实验结果
实验例7：
大黄鱼投喂实验：
实验对象：选择优质的大黄鱼苗3000尾，随机分成三组(对照组、阳性对照组、试验组)，每组均为1000尾；
对照组：常规日粮
阳性对照组：常规日粮，常规日粮中添加有抗生素，抗生素的添加标准为：吉他霉素50g/T+喹烯酮50g/T+氧化锌3kg/MT；
试验组：常规日粮，常规日粮中按0.15kg/t添加有实施例6中制备的水产饲料添加剂；
试验周期：12周
检测指标：成活率(SR)、增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、饵料系数(FCR)、肥满度(CF)、抗氧化指标(总抗氧化力、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、丙二醛)、溶菌酶。
实验结果：如下表8所示：
表8大黄鱼投喂实验结果
由表2-表8可以看出，试验组的投喂效果要明显优于对照组和阳性对照组，产品用量少，且动物吸收效果好，说明本发明中的植物精油、酸化剂和β-葡聚糖在应用中具有良好的相互协同作用的效果。
3、核算实验例1-7中添加剂的投喂成本以及收入，结果如下表9所示：
表9添加剂投喂成本及收入对比
由表9可以看出，本发明中制备的添加剂的添加成本要低于现有技术中的抗生素，且其增收的价值要远高于抗生素的价值，可以看出本发明中的添加剂替抗效果明显且成本低。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
