通过硫酸化多糖稳定并逆转动脉粥样硬化病变的方法
相关申请
本申请要求2017年12月14日提交的美国临时申请号62/598,839以及2018年5月24日提交的美国临时申请号62/676,185的权益，以上申请各自以引用方式并入本文。
背景技术
动脉粥样硬化是动脉壁硬化和增厚，会减少血流量并引起高血压、冠心病、颈动脉疾病、外周动脉疾病、动脉瘤、慢性肾脏疾病和勃起功能障碍等病症。动脉粥样硬化的特点是脂质(即胆固醇)在动脉壁上积聚，所引起的病变也称为斑块。
当动脉斑块侵蚀或破裂时，会发生急性心血管、脑血管或外周血管事件，诸如心脏病或中风。因此，进行了大量研究并作出了很多努力来识别易于侵蚀和破裂的动脉斑块(易损斑块)。易损斑块可以被定义为易于形成血栓的斑块和/或可能快速进展的斑块，因此在未来事件中变成罪犯斑块。最易损的斑块具有任何或所有以下特征：诸如较大的富含脂质的坏死核、溃烂和/或薄的纤维帽、活跃性局部炎症和血小板聚集、正性重构、浅表钙化结节、新生血管形成和斑块内出血，这些特征都会导致斑块破裂和凝块形成。另外，斑块病变附近的内腔大小与病变大小在一定程度上成比例地减小，导致血流受限和高血压增加。
历史上，人们认为动脉粥样硬化病变(或斑块)、特别是晚期病变是不可逆的。由于以前很难识别真正的易损斑块，因此对易损斑块理论也存在疑问。除外科选择诸如支架外，如何治疗这种病变存在很大的不确定性。最近的医学进展表明，某些药物诸如他汀类可稳定动脉粥样硬化斑块，如通过经过长期治疗减少了其富含脂质的坏死核所证明的那样。包括饮食和运动在内其它方法也可在一定程度上帮助稳定斑块。
发明内容
一种治疗动脉粥样硬化易损斑块(vulnerable atherosclerotic plaque)的方法可以包括识别动脉粥样硬化易损斑块，并且以足以稳定并逆转动脉粥样硬化易损斑块的量和频率将硫酸化多糖或其药学上可接受的盐或金属络合物施用于受试者。
一种用于治疗动脉粥样硬化易损斑块的治疗组合物可以包含足以稳定并逆转动脉粥样硬化易损斑块的量的硫酸化多糖或其药学上可接受的盐或金属络合物，以及药学上可接受的载体。在一些示例中，该治疗组合物还可以包含抗氧化剂、矿物质、膳食硝酸盐/亚硝酸盐和/或维生素。
一种口服剂型可以包含足以稳定并逆转动脉粥样硬化易损斑块的量的硫酸化多糖或其药学上可接受的盐或金属络合物，以及药学上可接受的载体。
因此，已对本发明的较重要的特征进行了广义的概述，以更好地理解接下来的本发明的具体实施方式，并且更好地认识本发明对本领域的贡献。通过本发明的以下具体实施方式结合附图和权利要求书，本发明的其它特征将变得更清晰，或者可通过本发明的实践了解到。
附图说明
图1是基于富含脂质的坏死核的大小对颈动脉斑块进行风险分类的流程图。
具体实施方式
虽然这些示例性实施方案足够详细地描述以使本领域的技术人员能够实践本发明，但是应当理解，其它实施方案也可以实现并且在不脱离本发明的实质和范围的情况下可对本发明作出各种改变。因此，如权利要求书所要求的，本发明的实施方案的以下更详细的描述并不旨在限制本发明的范围，但是仅仅为了说明而非限制的目的而呈现以描述本发明的特征和特性，阐述本发明的最佳操作模式，并且充分地使本领域的技术人员能够实践本发明。因此，本发明的范围仅由所附的权利要求书来限定。
定义
在描述和要求保护本发明时，将使用下面的术语。
除非上下文另外明确规定，否则单数形式“一种”、“一个”和“所述”包括复数指示物。因此，例如，提及“病变”包括提及一种或多种此类材料，并且提及“经受”是指一个或多个此类步骤。
如本文所用，术语“约”用于提供与给定术语、度量或值相关联的灵活性和不精确性。本领域的技术人员可以容易地确定特定变量的灵活程度。但是，除非另外阐明，否则术语“约”通常表示灵活性小于2％，最经常小于1％，并且在一些情况下小于0.01％。
如本文相对于标识的特性或环境所用，“基本上”是指足够小的偏差程度，以便不可测量地减损所标识的特性或环境。在一些情况下，容许的精确偏差度取决于具体情况。
如本文所用，“相邻”是指两个结构或元件接近。具体地讲，被识别为“相邻”的元件可邻接或连接。此类元件可还彼此靠近或接近，而不一定彼此接触。在一些情况下，精确的接近度可以取决于具体情况。
术语“剂量单位”或“剂量”应理解为是指适合施用于受试者以实现治疗效果或以其它方式有助于治疗效果的活性剂的量。在一些示例中，剂量单位可以指能够施用于对象或患者并且可容易地处理和包装从而保持为物理和化学稳定的单位剂量的单剂量。
如本文所用，“剂量给药方案”或“方案”诸如“治疗剂量给药方案”或“预防性剂量给药方案”是指可以或应当施用于受试者的活性剂或组合物剂量的方式、时间、量和持续时间，以实现预期的治疗或效果。
如本文所用，术语“治疗”是指向无症状或有症状的受试者施用治疗剂。换句话讲，“治疗”可以是减轻、改善或消除与受试者中存在的病症相关联的症状，或者可以是预防性的(即预防或减少受试者的症状的发生)。这种预防性治疗也可以称为病症预防。
如本文所用，术语“治疗剂”、“活性剂”等可以互换使用，是指当以适当或有效量施用于受试者时可以对受试者产生有益或积极效果的试剂。
短语“有效量”、“治疗有效量”或“治疗有效率”的活性成分是指基本无毒但足够量或递送率的活性成分，以在治疗针对其递送药物的疾病或病症中获得治疗效果。应当理解，各种生物因素可影响物质进行其预期任务的能力。因此，“有效量”、“治疗有效量”或“治疗有效率”在一些情况下可取决于这些生物因素。此外，虽然可由医师或其它合格的医务人员使用本领域中已知的评估来测量治疗效果的实现，但是应当认识到，个体差异和对治疗的反应可使治疗效果的实现成为主观决定。治疗有效量或递送率的确定完全在药物科学和医学领域的普通技术范围内。
如本文所用，“制剂”和“组合物”可以互换使用，并且是指至少两种成分的组合。在一些实施方案中，至少一种成分可以是活性剂或以其它方式具有当施用于受试者时发挥生理活性的性质。例如，羊水包括至少两种成分(例如水和电解质)，并且其本身是组合物或制剂。
如本文所用，“受试者”是指动物。在一个方面，动物可以是哺乳动物。在另一方面，哺乳动物可以是人类。
如本文所用，为方便起见，多个物品、结构元件、组成元件和/或材料可以在相同列表中表示。然而，这些列表应理解为列表的每个构件独立地识别为单独且唯一的构件。因此，在没有相反指示的情况下，不应单独地基于它们在相同组中的表现，将此类列表的任何单个构件理解为相同列表的任何其它构件的实际等同物。
如本文所用，术语“...中的至少一个”旨在与“...中的一个或多个”同义。例如，“A、B和C中的至少一个”明确地包括仅A、仅B、仅C，以及每一个的组合。
本文可能以范围格式表示浓度、量和其它数值数据。应当理解，此类范围格式的使用仅仅出于方便和简洁目的，并且应灵活解读为不仅包括明确引用为范围限值的数值，还包括涵盖在该范围内的所有单个数值或子范围，如同明确引用每个数值和子范围。例如，约1至约4.5的数值范围应被理解为不仅包括明确叙述的1至约4.5的限制，而且还包括单个数值(诸如2、3、4)和子范围(诸如1至3、2至4)等。相同原理适用于叙述仅一个数值的范围，诸如“小于约4.5”，这应被理解为包括所有上述值和范围。另外，这样的解释应不管范围的宽度或所描述的特性而应用。
任何方法或方法权利要求中所引用的任何步骤可以按任何顺序执行并且不限于权利要求书中提供的顺序。装置加功能或步骤加功能限制仅仅用在特定的权利要求书限制中，在这种限制中满足所有的下列条件：a)明确记载了“用于……的装置”或“用于……的步骤”；以及b)明确引用对应功能。在本文的说明中明确引用了支持装置加功能的结构、材料或行为。因此，本发明的范围应仅由所附权利要求书以及其合法等同条件确定，而非由本文给定的描述和示例确定。
稳定和减少动脉粥样硬化病变
当动脉(即从心脏向身体其它部位输送氧和营养物质的血管)变厚或变硬时，就会发生动脉硬化。在一些情况下，这会限制血液流向身体器官和组织，从而使它们缺乏所需的氧和营养物质。动脉粥样硬化是一种特殊类型的动脉硬化，通常是指物质在动脉壁中和动脉壁上堆积，这会限制血流。这种物质堆积可以称为动脉粥样硬化斑块或病变，并且可以由多种物质(诸如胆固醇、脂肪物质、细胞废物、钙、纤维蛋白等)形成。
根据斑块的严重程度和斑块形成的位置，动脉粥样硬化可导致许多不利的健康状况，诸如冠心病、心绞痛、颈动脉疾病、外周动脉疾病、慢性肾脏疾病等。此外，在一些情况下，一块斑块可能会破裂并被血流带走，直到被卡住，或者可能在斑块的表面形成血凝块。在任何一种情况下，动脉都有可能被阻塞。如果阻塞的动脉供应心脏或大脑，则可能发生心脏病或中风。如果向四肢供氧的动脉被阻塞，则可能发生坏疽(即组织死亡)。
根据美国心脏协会的分类，动脉粥样硬化斑块或病变可以通过病变的严重程度来表征，如下所示：I型，适应性内膜增厚；II型，脂纹；III型，转化或临界病变；IV型，动脉粥样化；V型，纤维性动脉粥样化或具有厚纤维帽的动脉粥样化；以及VI型，有表面缺陷和/或血肿出血和/或血栓形成的复杂斑块，如在以下文献中所定义的那样：Stary等人，ADefinition of Advanced Types of Atherosclerotic Lesions and a HistologicalClassification of Atherosclerosis，美国心脏协会动脉粥样硬化性血管病委员会的报告,Circulation,1995；92:1355-1374，该文献以引用方式并入本文。在一些情况下，IV-VI型斑块可以被视为易损斑块。更一般地，易损斑块可以包括具有高破裂风险从而导致血栓形成的任何斑块。
易损斑块特别不稳定，并且容易引起突发的重大问题，诸如心脏病或中风。易损斑块的一些定义特征可以包括薄和/或受损的纤维帽、较大的富含脂质的坏死核、活跃性局部炎症、钙化结节的存在、斑块内出血、严重的狭窄等。一个或多个这些特征会在动脉粥样化的纤维帽上形成高机械应力区并且/或者会降低斑块机械强度，从而使其容易破裂。
识别动脉粥样硬化易损斑块可能有些挑战。例如，由于动脉壁通常响应于斑块增大而增大，因此这些斑块通常不会产生很大的动脉内腔狭窄。因此，通常无法通过心脏压力测试或血管造影术检测到斑块。但是，有许多成像方法可以用于预测和识别动脉粥样硬化易损斑块。用于研究颈动脉和冠状动脉疾病的临床成像方式包括磁共振成像(MRI)、血管内超声(IVUS)、非侵入性超声成像、计算机断层扫描、血管造影术和光学相干断层扫描(OCT)，并且可以用于识别和表征动脉粥样硬化易损斑块。
常规的非侵入性超声可以用于测量颈动脉的内膜中层厚度(IMT)。可以使用带有换能器的标准超声机器执行该程序，沿着颈总动脉、颈动脉窦部和颈内动脉在横向和纵向平面上进行扫描。由于具有非侵入性、便携性和可承受性，IMT超声被美国心脏协会推荐用于临床，用作初始风险分层工具。全面扫描通常可在30-60分钟内完成。结果表明，斑块的回声率与脂质含量相关联，并且可以将通过超声检查的斑块大致分为硬斑块、软斑块或混合斑块。但是，关于易损斑块，尚未证明非侵入性超声成像具有能够准确区分斑块组成(包括出血和纤维帽)的能力。
血管内超声(IVUS)是一种侵入性冠状动脉粥样硬化斑块成像方式。IVUS本质上是一种安装有导管的超声换能器，并且遵循关于超声生成、信号接收、数据处理和图像呈现的相同原理。可以生成灰度图像，基于该灰度图像，可以将斑块大致分类为软斑块、中间斑块、钙化斑块和混合斑块。此外，添加的模块可以增强IVUS的组织表征能力，从而可以检测和量化不同的斑块结构。从广义上讲，这是通过除了分析反射信号幅度之外还分析其频率和功率来实现的。
关于易损斑块，IVUS及其模块化扩张可以可靠地评估斑块负担、扩张重构以及坏死核、钙化和新血管形成的存在和相对比例(造影增强；穿透深度，5mm)。还通过复合超声应变成像(另选地称为触摸描记/弹性描记)确认了与纤维斑块相比纤维动脉粥样化中更大的应变。但是，以目前的形式(20/40MHz换能器)，它无法可视化斑块帽，特别是较薄的斑块帽(分辨率＜100μm)。
光学相干断层扫描(OCT)是另一种侵入性成像方式，它以类似于超声检查的方式使用近红外光(例如波长为1.3μm)。从斑块结构反射的光可提供图像数据，而通过使用干涉测量技术可以消除散射光的背景效果。反射光束和参考光束之间的相长干涉或相消干涉会导致出现亮区或暗区。鉴于光的波长相较于超声要小得多，因此OCT分辨率要高1个数量级(约10μm)，从而可以正确可视化纤维帽、胶原蛋白含量(偏振敏感的OCT)、巨噬细胞(与炎症有关)、新血管(出现为微通道)、破裂和血栓。关于光谱下端的微钙化(直径<5μm)，OCT性能仍然不确定。因此，可以可视化易损性的几个但并非所有方面。OCT的局限性包括血液置换需要，这归因于OCT组件的散射效应高，图像采集时间长(尽管是较新的基于频域分析的处理方法)，伪影频繁，无法评估较深的斑块结构以及钙化区域与脂质核之间辨别力相对较差(假定两者都表现为信号差的区域)(分别具有清晰和分散的边界)。
一种较新形式的OCT即微OCT(μOCT)通过先进的频域分析并使用接近组织学水平的宽带宽光，提供了1μm至2μm数量级的轴向和横向分辨率。因此，可以可视化对动脉粥样硬化形成和进展来说至关重要的细胞和分子水平的事件，包括白细胞渗出、纤维蛋白链形成、ECM产生、内皮剥脱、微钙化和胆固醇晶体形成和纤维帽穿透。
计算机断层扫描冠状动脉造影(CTCA)利用计算机断层扫描(CT)扫描仪结合碘静脉注射染料来可视化冠状动脉。显著的优点源于其本质：非侵入性、能够对整个冠状脉管系统成像以及有潜力评估血管壁和内腔两者。随着技术的进步，可以用更少的扫描时间和辐射暴露获得改善的图像质量。例如，多切片(或多检测器)扫描仪拥有二维检测器阵列，可以同时采集多个平面图像(切片)，从而减少了检查时间并减少了运动伪影的可能性(阵列宽度为160mm的扫描仪可以在心脏的单次搏动中对其成像)。使用较软的重建内核可改善软组织的可视化效果，但是会牺牲空间分辨率。因此可以使用预期的门控，以使图像采集与心脏舒张(冠状动脉血流量增加)同步。此外，双能量单色扫描仪的出现可通过消除射束硬化效应来克服由邻近的强烈钙化引起的组织评估中的限制。最后，双源扫描仪仅需旋转半圈即可完成检查。钙评分的一种相关技术(虽然更简单)不使用静脉注射染料，而是主要关注冠状动脉钙的定量以预测随后事件的风险。
关于易损斑块，CTCA可以通过以Hounsfield单位(HU；核较大的斑块将导致衰减较小，因此单位值较低)对组织进行分级来可靠地评估坏死核的存在、大小和厚度。已经制定了具体的高风险斑块标准，诸如正性重构(重构指数[RI]≥1.1，也是斑块组成的替代表示)、(非常)低(假定≥10％坏死核的阈值为41HU)衰减斑块(LAP；<30HU)、餐巾圈标志(低衰减核被相对较高衰减的边缘包围，发病机理仍有争议)，以及存在斑点钙化(<3mm，与钙点(specs)在不稳定斑块中的作用一致)。
冠状动脉钙评分(CACS)是在无需静脉注射染料的情况下通过心脏CT测量的替代参数。评分是从总斑块面积和钙病变密度得到的斑块数量指标。通常，将受试者的CACS与性别和年龄相近的其它受试者进行比较，以确定百分等级。尽管与CTCA相比，CACS仅评估动脉粥样硬化的一个方面，但有人提出CTCA仅在中CACS至高CACS患者中提供另外的预后信息。
磁共振成像(MRI)也能够可视化动脉粥样硬化斑块的软组织组成以及新血管形成和扩散特性(壁渗透性)。重要的是，MRI可以前瞻性地确定与(药理学上诱导的)破坏特别相关的易损斑块特征。这些特征与斑块重构(正性重构以及与未来破裂相关联的斑块面积较大)和炎症指标(钆增强显著增加，表示新血管渗透性和细胞外空间扩张增加，如在强烈的凋亡/坏死中)相关联。使用多个脉冲序列诸如飞行时间(TOF)白血、双反转恢复(DIR)黑血和涡轮自旋回波(TSE)黑血序列，可以描绘斑块组成，诸如脂质核、纤维帽、钙化、出血和疏松基质。当前的限制包括运动伪影以及在心脏植入物或装置的情况下使用。
侵入性冠状动脉温度记录是一种旨在检测发热区域(通常伴有发炎和/或破裂的动脉粥样硬化斑块)中血管壁的微妙温度升高的方法。特制的导管包括翼型桨和基于气球的设计，确保热敏电阻模块在血管壁上充分并置。基于气球的设计还能够暂时闭合内腔，从而消除血流的任何基于冷却、对流的影响，并且加强潜在的梯度。在一些情况下，斑块与健康血管壁之间的差异≥0.5℃可能与不良事件可能性增加相关联。
用于检测易损斑块的不太广泛使用的技术包括正电子发射断层扫描(PET)、单光子发射计算机断层扫描(SPECT)、核成像、温度记录、血管镜检查、氢谱、血管内触摸描记、漫反射光谱(DRS)、本征荧光光谱(IFS)、拉曼光谱(RS)和光谱血管内光声成像(sIVPA)。
另外，使用最初为神经成像开发的近红外光谱(NIRS)技术，已经在斑块成像中显示出有前景的新结果。但是，该技术的临床使用仍处于试验阶段。近红外光谱(NIRS)利用斑块内容物与光子相互作用后产生的特征发射光谱(波长范围700nm至2500nm)。与可见光光谱相比，在诱导应答方面的低敏感性以及高穿透性使得该方法适于评估斑块的脂质含量，特别是在坏死核较大、位深、充满脂质的正性重构的情况下。使用NIRS进行的研究表明，较大的脂质含量而不是斑块负担与薄帽纤维性动脉粥样化特征相关联。已经表明，较大的脂质核负担可以准确地区分ST段抬高MI患者中的罪犯病变和非罪犯病变，并且与较高的围手术期心肌梗死风险相关。有趣的是，与OCT媲美，与IVUS组合可同时鉴别斑块结构和组成。
一种改良形式的NIRS即近红外自发荧光涉及主动刺激脂质组成以发射可检测的红外光。与OCT组合可以更好地可视化充满脂质的坏死核，此外，可以对其内巨噬细胞浓度最浓的区域进行准确定位。
分子成像(包括正电子发射断层扫描(PET)和单光子发射计算机断层扫描(SPECT)，涉及靶向并可视化生物过程的特定组分)也可以用于可视化动脉粥样硬化斑块，以帮助识别易损斑块。PET和SPECT被归类为核医学成像方式，它们通过分别跟踪正电子和伽马发射放射性同位素示踪剂的运动和积累来提供功能和代谢信息。从理论上讲，任何方式都可用于分子成像，只要可以开发出合适的示踪剂即可，例如发射或具有光子的顺磁性质。任何感兴趣的物质都可以用作靶标，只要它可以附接到示踪剂或被修饰为示踪剂。多种与易损性有关的过程可以进行成像，包括白细胞粘附(通过所涉及的蛋白质，诸如选择素和血管细胞粘附分子1(VCAM-1))、巨噬细胞含量(骨桥蛋白)、胶原蛋白降解(标记的基质金属蛋白酶[MMP]抑制剂)、细胞凋亡(使用与只存在于凋亡细胞膜外层的脂质结合的膜联蛋白)或坏死性凋亡(放射性标记的坏死活素(坏死性凋亡的优先抑制剂))和新血管形成(使用标记的抗血管内皮生长因子抗体作为示踪剂)。
除了成像生物标志物(分子成像)以外，循环或血清生物标志物(包括局部释放的生物标志物)也用于帮助识别易损斑块。这些生物标志物参与动脉粥样硬化斑块形成的不同阶段(即内皮损伤)和过程(即炎症)，因此被认为是易损斑块的潜在生物标志物。这些生物标志物中的一些是C反应蛋白(CRP)、白介素6(IL-6)、白介素18(IL-18)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、可溶性CD40配体(sCD40L)、基质金属蛋白酶(MMP)、可溶性细胞间粘附分子(sICAM)、可溶性血管细胞粘附分子(sVCAM)、E选择素、P选择素、妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、组织纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)、髓过氧化物酶、纤维蛋白原、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、新蝶呤、氧化的LDL、骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OPG)和microRNA(miRNA)。
这些和其它合适的方法可以用于帮助识别动脉粥样硬化易损斑块。应当注意，这些方法中的每一种方法都包括一些限制。因此，在一些示例中，可以使用本文描述的一种或多种识别方法的组合。在一些具体示例中，识别动脉粥样硬化易损斑块可以包括CTCA。在一些另外的具体示例中，识别动脉粥样硬化易损斑块可以包括磁共振成像(MRI)。在一些其它示例中，MRI可以包括颈动脉粥样硬化斑块MRI(CMRI)。(参见例如Atherosclerotic plaqueimaging by carotid MRI,Zhao,X.,Miller,Z.E.&Yuan,C.Curr Cardiol Rep(2009)11:70，该文献以引用方式并入本文。)在一些示例中，识别动脉粥样硬化易损斑块不包括侵入性技术。总体而言，在确定理想成像方法时要考虑的因素包括安全性、可用性、成本和有效性。在考虑这些因素时，MRI通常可能是目前可用的评估动脉斑块易损性的特别有效的选择。它不仅可以描绘狭窄程度，还可以描绘动脉壁上的斑块，包括富含脂质的坏死核、纤维帽、斑块内出血、钙化等。与CT和其它方法相比，MRI成像不会使患者暴露于电离辐射下并且可在不使用静脉注射的造影剂的情况下进行。MRI-PlaqueViewTM是目前唯一可用于表征和测量易损性的形态、斑块负担、斑块组成和颈动脉斑块组分的FDA批准的软件，但是可使用其它类似的软件。
目前用于动脉粥样硬化的治疗包括胆固醇药物，诸如他汀类、抗血小板药物、抗凝剂、β阻滞剂药物、血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、钙通道阻滞剂、利尿剂和其它药物。尽管这些疗法可能有价值，但是在接受目前最好的疗法的患者中，许多不良事件持续发生。此外，取决于受试者和病症的严重程度，这些药物中的许多药物会遇到混合和/或缓慢的结果。具体地，易损斑块的治疗特别具有挑战性。例如，稳定和减小动脉粥样硬化斑块、特别是动脉粥样硬化易损斑块的大小通常具有挑战性。因此，需要改进的组合物和方法来治疗动脉粥样硬化斑块，包括动脉粥样硬化易损斑块。
本公开内容描述了可以用于稳定动脉粥样硬化斑块(包括易损斑块)的许多组合物、剂型和方法。在一些示例中，本文所述的组合物、剂型和方法可以用于减小动脉粥样硬化斑块(包括易损斑块)的大小。
作为进一步的说明，在本公开中，应当注意，当讨论组合物、剂型和方法时，这些讨论中的每一项可以被认为适用于这些示例中的每一个示例，无论它们在该示例的上下文中是否被明确地讨论。因此，例如，在讨论关于组合物本身的细节时，这种讨论也指本文所述的剂型和方法，反之亦然。
更详细地讲，一种用于治疗动脉粥样硬化斑块诸如动脉粥样硬化易损斑块的治疗组合物可以包含治疗有效量的硫酸化多糖或其药学上可接受的盐或金属络合物。在一些示例中，该治疗组合物可以包含足以减小动脉粥样硬化易损斑块的大小的量的硫酸化多糖或其药学上可接受的盐或金属络合物。
几种藻类物质可以具有多种治疗特性。例如，一些藻类物质包括一种或多种生物活性多糖，诸如硫酸化多糖。这些生物活性多糖可以具有多种治疗特性，诸如抗氧化剂、抗肿瘤、免疫调节、抗炎、抗凝、抗病毒、抗原生动物、抗菌、抗血脂特性或其它生物活性特性。包括硫酸化多糖的海藻多糖的非限制性示例可以包括岩藻聚糖、岩藻依聚糖、角叉菜聚糖、帚叉胶、石莼聚糖(例如硫酸鼠李聚糖)、半乳聚糖等。在一些示例中，组合物可以包含硫酸化岩藻聚糖、岩藻依聚糖、角叉菜聚糖、石莼聚糖和硫酸化半乳聚糖中的一种或多种。在一些示例中，硫酸化多糖可以包括硫酸鼠李聚糖、硫酸岩藻依聚糖、硫酸阿拉伯聚糖、硫酸阿拉伯半乳聚糖、硫酸半乳聚糖、硫酸甘露聚糖等、它们的功能类似物或它们的组合。在一些示例中，治疗组合物可以包含硫酸鼠李聚糖。在一些示例中，治疗组合物可以包含硫酸岩藻依聚糖。在一些示例中，治疗组合物可以包含硫酸阿拉伯聚糖。在一些示例中，治疗组合物可以包含硫酸阿拉伯半乳聚糖。在一些示例中，治疗组合物可以包含硫酸半乳聚糖。在一些示例中，治疗组合物可以包含硫酸甘露聚糖。在一些示例中，功能类似物可以包括天然或合成的低聚糖。功能类似物的非限制性示例可以包括鼠李糖低聚糖、岩藻糖低聚糖、甲壳低聚糖、半乳糖低聚糖、果糖低聚糖、硫酸化鼠李糖低聚糖、硫酸化岩藻糖低聚糖、β-葡聚糖木糖低聚糖、甘露聚糖低聚糖、半乳糖甘露聚糖低聚糖、硫酸鼠李聚糖低聚糖、硫酸乙酰肝素低聚糖、硫酸软骨素低聚糖、硫酸角质素低聚糖等。
应当注意，不同种类的岩藻聚糖、岩藻依聚糖、角叉菜聚糖、帚叉藻胶(furcellaran)、石莼聚糖、半乳聚糖等可以从不同种的海藻中提取或得到。因此，例如，从两个不同种的褐藻得到的岩藻依聚糖可能有些不同。因此，从一个种中得到或提取的硫酸化多糖可能比从同一藻属内另一个种中得到或提取的类似硫酸化多糖具有更理想的特性。
考虑到这一点，在一些示例中，硫酸化多糖可以从红藻、棕藻、绿藻、微藻或它们的组合中提取或得到。在一些示例中，硫酸化多糖可以从红藻中提取或得到。在一些示例中，硫酸化多糖可以从褐藻中提取或得到。在一些示例中，硫酸化多糖可以从绿藻中提取或得到。在其它示例中，硫酸化多糖可以从微藻中提取或得到。在一些具体示例中，硫酸化多糖可以包括从选自由以下项组成的组的藻中提取或得到的多糖：礁膜(Monostromanitidum)、宽礁膜(Monostroma latissimum)、囊礁膜(Monostroma angicava)、石莼(Ulvalactuca)、肠浒苔(Enteromorpha intestinalis)、蕨藻属(Caulerpa spp.)、松藻属(Codium spp.)、墨角藻属(Fucus spp.)、普通马尾藻(Sargassum vulgare)、羊栖菜(Sargassum fusiforme)、苷苔(Ecklonia cava)、昆布(Ecklonia kurome)、海带属(Laminaria spp.)、皱波角叉菜(Chondrus crispus)、育叶藻(Phyllophora brodiei)、蜈蚣藻(Grateloupia indica)、咖啡形双眉藻(Amphora coffeaeformis)、松藻属(Codiumspp.)以及它们的组合。在一些另外的示例中，硫酸化多糖可以是或包括从礁膜中提取或得到的多糖。
从海藻中提取多糖的方法是本领域已知的。因此，这些方法将不作详细讨论。海洋多糖和低聚糖的组成和分子量可以随来源而变化。但是，它们通常可以在某些预处理(诸如清洗、干燥、研磨、脱矿、碱处理、酶处理等)之后用热水溶液提取。提取的多糖可通过分离柱和膜(诸如尺寸排阻色谱和离子交换色谱)进一步纯化。例如，商业角叉菜胶是从红藻耳突麒麟菜(Eucheuma cottonii)中提取的。将新鲜的海草清洗和干燥。然后将海草切碎至1cm长，然后在50℃至90℃下用50倍(重量比)的水提取1至5个小时。提取后，将混合物在50℃处以12,000RPM离心30分钟。将所得的上清液与2-丙醇以1:2的比例混合以沉淀多糖。回收沉淀剂并离心以进一步除去液体，然后将其冷冻干燥，制成商业角叉菜胶成品。
从海藻中提取或得到生物活性多糖的任何合适方法都可以用于获得本发明治疗组合物的硫酸化多糖。另选地，可以合成一些合适的等同物，特别是硫酸化低聚糖，而不是从天然源中提取。
硫酸化多糖可以以多种量存在于治疗组合物中，只要实现治疗效果即可。在一些示例中，硫酸化多糖可以以约10重量％至约100重量％的量存在于治疗组合物中。在其它示例中，硫酸化多糖可以以约20重量％至约50重量％的量存在。除非另外指明，否则本文所述的所有百分比是指组分的量占组合物的总量的百分比。
在一些其它示例中，治疗组合物还可以包含抗氧化剂。在一些情况下，抗氧化剂可以帮助抑制治疗组合物中硫酸化多糖或其它成分的氧化。在一些示例中，抗氧化剂在与硫酸化多糖结合施用时可以提供治疗效果。
多种抗氧化剂可以用于治疗组合物中。在一些示例中，抗氧化剂可以包括丁基化羟基茴香醚(BHA)、丁基化羟基甲苯(BHT)、抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、α-硫辛酸、N-乙酰基半胱氨酸、谷胱甘肽、类胡萝卜素、辅酶Q10、反式白藜芦醇、生育酚、生育三烯酚、偏亚硫酸氢钾、硫代硫酸钠、蒜氨酸、没食子酸丙酯、表没食子儿茶素没食子酸酯等或它们的组合。在其它示例中，抗氧化剂可以包括富含抗氧化剂的基于植物的粉末共混物，诸如多酚。抗氧化剂多酚可以有效减少氧化应激和活性氧(ROS)。就心血管疾病而言，氧化应激和ROS可以引起内皮损伤、动脉粥样硬化进展、持续性心肌梗死和/或局部缺血再灌注损伤等，或者它们的组合。一氧化氮(NO)依赖性血管舒张恶化是公认的会使个体易患心血管疾病的危险因素。抗氧化剂多酚可以帮助预防高胆固醇血症、高血压和血小板聚集，并改善内皮功能和动脉弹性。
基于植物的富含抗氧化剂的粉末的非限制性示例可以包括红葡萄皮提取物、红葡萄籽提取物、白葡萄皮提取物、白葡萄籽提取物、绿茶提取物、胡萝卜汁或提取物、番茄汁或提取物、西兰花汁或提取物、绿色卷心菜汁或提取物、洋葱汁或提取物、大蒜汁或提取物、芦笋汁或提取物、橄榄汁或提取物、黄瓜汁或提取物、越桔汁或提取物、柚子汁或提取物、木瓜汁或提取物、菠萝果汁或提取物、草莓汁或提取物、苹果汁或提取物、杏汁或提取物、樱桃汁或提取物、橙汁或提取物、黑醋栗汁或提取物、甜菜根、奇异果、西瓜、山楂果、芹菜、刺梨果、枣果、西兰花、蓝果忍冬、草莓、杨梅、紫甘薯、罗汉果、李子等或它们的组合。
抗氧化剂可以以多种量存在于治疗组合物中。在一些示例中，抗氧化剂可以以足以抑制硫酸化多糖氧化的量存在于治疗组合物中。在一些示例中，抗氧化剂可以以治疗有效量存在于治疗组合物中。在一些具体示例中，抗氧化剂可以以约10重量％至约90重量％，并且在一些情况下以20重量％至约80重量％的量存在于组合物中。
在一些其它示例中，治疗组合物还可以包含硝酸盐和/或亚硝酸盐源。膳食硝酸盐和亚硝酸盐是一氧化氮(NO)的前体，在血管健康中起着至关重要的作用。除内皮一氧化氮合酶外，还可通过由其它酶系统(存在于舌头上的共生革兰氏阴性细菌中)将硝酸盐还原为亚硝酸盐进而还原为一氧化氮来产生大量的系统性一氧化氮。一氧化氮是增加血流量的血管扩张剂。它还具有与动脉粥样硬化的形成有关的抗炎剂、抗凝剂、抗血小板剂和抗氧化剂活性。已经表明，膳食硝酸盐和亚硝酸盐可以降低人的血压。
治疗组合物可以包含多种硝酸盐和亚硝酸盐源。非限制性示例包括钠、钾、钙、镁、锰、铁、铜、铬和锌的硝酸盐和亚硝酸盐。许多水果和蔬菜也是很好的硝酸盐和亚硝酸盐源。不完全列表包括芹菜、水芹、生菜、山罗卜、甜菜根、菠菜、芥菜叶、卷心菜、茴香、韭菜、欧芹、芝麻菜、唐莴苣、绿叶菊苣、大头菜、萝卜等。许多草药诸如传统中草药也包含相当数量的硝酸盐和亚硝酸盐。它们包括但不限于丹参(Radix salvia miltorrhizae)、瓜蒌(Fructustrichosanthis)、薤白(Bulbus allii macrostemi)、三七(Radix notoginseng)、人参(Radix ginseng)、冰片(Borneolumsyntheticum)和龙脑(Cinnamomum)。在一些具体示例中，基于植物的硝酸盐和亚硝酸盐可以包括粉末状提取物的共混物。在其它示例中，基于植物的硝酸盐和亚硝酸盐可以包括液体提取物或汁的共混物。
在一些示例中，硝酸盐和亚硝酸盐可以以约10重量％至约90重量％的量存在于治疗组合物中。在其它示例中，硝酸盐和亚硝酸盐可以以约20重量％至约80重量％的量存在。
在一些另外的示例中，治疗组合物可以包含镁源。补充镁可以改善心肌代谢，可以抑制钙积聚和心肌细胞死亡，可以改善血管紧张度、外周血管阻力、后负荷和心脏输出，可以减少心律失常，可以改善脂质代谢等。镁还可以降低对氧衍生自由基的易损性，改善人内皮功能，并抑制血小板功能，包括血小板聚集和粘附。
治疗组合物可以包含多种镁源。非限制性示例可以包括氧化镁、柠檬酸镁、乳清酸镁、氯化镁、乳酸镁、硫酸镁、碳酸镁、甘氨酸镁、苹果酸镁、牛磺酸镁或它们的组合。另外，镁可以经由离子键或配位键或两者的组合化学附接到硫酸化多糖。与治疗组合物中的镁盐和硫酸鼠李聚糖的物理混合物相比，所得的镁多糖络合物诸如镁硫酸鼠李聚糖络合物将具有许多优点。
镁可以以多种量存在于治疗组合物中。在一些示例中，镁可以以约10重量％至约90重量％的量存在于组合物中。在其它示例中，镁可以以约20重量％至约80重量％的量存在于组合物中。在上述示例中，也可以使用锌、铜、碘、铁、钙、锰、钼、硼等的互补络合物代替镁。
治疗组合物还可以包含维生素K2甲萘醌源。已经表明维生素K2的摄入量高与动脉钙化和冠心病死亡率低发病率相关联。维生素K2可激活血管内皮中的基质gla蛋白(MGP)，从而抑制动脉钙化。
治疗组合物可以包含多种形式的维生素K2。非限制性示例可以包括甲萘醌-2(MK-2)、MK-3、Mk-4、MK-5、MK-6、MK-7、MK-8、MK-9、MK-10、MK-11、MK-12、MK-13和MK-14。维生素K2可以以多种量存在于治疗组合物中。在一些示例中，维生素K2可以以约10μg至约100,000μg的量存在于组合物中。在其它示例中，维生素K2可以以约50μg至500μg存在于组合物中。
治疗组合物还可以包含药学上可接受的载体。药学上可接受的载体的性质可以取决于预期的施用方式。在一些示例中，治疗组合物可以被配制用于经由注射施用。在其它示例中，治疗组合物可以被配制用于口服施用。在另一个示例中，治疗组合物可以被配制用于IV施用。
在治疗组合物被配制用于经由注射施用的情况下，药学上可接受的载体可以包含适合这种组合物的一种或多种组分。非限制性示例可以包括水、增溶剂或分散剂、张度剂、pH调节剂或缓冲剂、防腐剂、螯合剂、增量剂等或它们的组合。
在一些示例中，可注射治疗组合物可以包含增溶剂或分散剂。增溶剂或分散剂的非限制性示例可以包括聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯、卵磷脂、聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物、丙二醇、甘油、乙醇、聚乙二醇、山梨糖醇、聚乙氧基化蓖麻油、环糊精、羧甲基纤维素、阿拉伯胶、明胶、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等或它们的组合。
在一些示例中，可注射治疗组合物可以包含张度剂。张度剂的非限制性示例可以包括氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化镁、甘露醇、山梨糖醇、右旋糖、甘油、丙二醇、乙醇、海藻糖、磷酸盐缓冲盐水(PBS)、Dulbecco PBS、Alsever溶液、Tris缓冲盐水(TBS)、水、平衡盐溶液(BSS)(诸如Hank BSS、Earle BSS、Grey BSS、Puck BSS、Simm BSS、Tyrode BSS和BSSPlus)等或它们的组合。张度剂可以用于为治疗组合物提供适当张度。在一个方面，治疗组合物的张度可以为约250毫摩尔/升(mOsm/L)至约350mOsm/L。在另一方面，治疗组合物的张度可以为约277mOsm/L至约310mOsm/L。
在一些示例中，可注射治疗组合物可以包含pH调节剂或缓冲剂。pH调节剂或缓冲剂的非限制性示例可以包括多种酸、碱以及它们的组合诸如盐酸、磷酸、柠檬酸、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、乙酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、酒石酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液等或它们的组合。通常，治疗组合物的pH可以为约5至约9或约6至约8。
在一些示例中，可注射治疗组合物可以包含防腐剂。防腐剂的非限制性示例可以包括抗坏血酸、乙酰半胱氨酸、亚硫酸氢盐、偏亚硫酸氢盐、单硫代甘油、苯酚、间甲酚、苄醇、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、苯扎氯铵、苄索氯铵、丁基化羟基甲苯、肉豆蔻基γ-甲基吡啶鎓氯化物、2-苯氧基乙醇、硝酸苯汞、氯丁醇、硫柳汞、生育酚等或它们的组合。
在一些示例中，可注射治疗组合物可以包含螯合剂。螯合剂的非限制性示例可以包括乙二胺四乙酸、钙、二钠钙、二亚乙基三胺五乙酸等或它们的组合。
在一些示例中，可注射治疗组合物可以包含增量剂。增量剂的非限制性示例可以包括蔗糖、乳糖、海藻糖、甘露醇、山梨糖醇、葡萄糖、棉子糖、甘氨酸、组氨酸、聚乙烯吡咯烷酮等或它们的组合。
在治疗组合物被配制用于口服施用的情况下，药学上可接受的载体可以包含适合这种组合物的一种或多种组分。就固体口服组合物或剂型而言，药学上可接受的载体可以包含适合形成胶囊、片剂等的多种组分。就液体口服组合物或剂型而言，药学上可接受的载体可以包含适合形成分散体、悬浮液、糖浆、酏剂等的多种组分。
在一些具体示例中，治疗组合物可以被配制成片剂。在此类示例中，治疗组合物通常可以包含粘结剂。粘结剂的非限制性示例可以包括乳糖、磷酸钙、蔗糖、玉米淀粉、微晶纤维素、明胶、聚乙二醇(PEG)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、羟丙基纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素(CMC)、纤维素、其它纤维素衍生物等或它们的组合。
在治疗组合物被配制成片剂的情况下，在一些示例中，治疗组合物还可以包含崩解剂。崩解剂的非限制性示例可以包括交联PVP、交联CMC、改性淀粉、羟乙酸淀粉钠等或它们的组合。
在一些示例中，片剂还可以包含填充剂。填充剂的非限制性示例可以包括乳糖、磷酸二钙、蔗糖、微晶纤维素等或它们的组合。
在一些其它示例中，片剂可以包括外部包衣。此类包衣可以用多种材料形成，诸如羟丙基甲基纤维素(HPMC)、虫胶、玉米醇溶蛋白、各种多糖、各种肠溶剂等或它们的组合。
在一些示例中，根据需要，片剂可以包含多种其它成分，诸如抗粘剂(例如硬脂酸镁、硬脂酸钙)、着色剂(例如二氧化钛、胭脂红)、助流剂(例如热解法二氧化硅、滑石、碳酸镁)、润滑剂或抗结块剂(例如滑石、二氧化硅、硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸)、防腐剂、干燥剂和/或其它合适的片剂赋形剂。
在一些其它示例中，治疗组合物可以被配制成胶囊。在此类示例中，胶囊本身通常可以包含明胶、羟丙甲纤维素、HPMC、CMC、其它基于植物的胶囊物质等或它们的组合。多种赋形剂也可以包含在胶囊内，诸如粘结剂、崩解剂、填充剂、助流剂、抗结块剂、防腐剂、包衣等或它们的组合，诸如上文关于片剂所列的那些，或其它合适的变体形式。
在一些示例中，治疗组合物可以被配制成液体治疗组合物或液体口服剂型。液体口服剂型可以包含多种赋形剂，诸如液体媒介物、增溶剂、增稠剂或分散剂、防腐剂、张度剂、pH调节剂或缓冲剂、甜味剂等或它们的组合。液体媒介物的非限制性示例可以包括水、乙醇、甘油、丙二醇等或它们的组合。增溶剂的非限制性示例可以包括苯扎氯铵、苄索氯铵、氯化十六烷基吡啶、多库酯钠、壬苯醇醚-9、辛苯醇醚、聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物、聚氧基蓖麻油、聚氧基氢化蓖麻油、聚氧基油烯基醚、聚氧基十六烷基硬脂醇醚、聚氧基硬脂酸酯、聚山梨酸酯、月桂基硫酸钠、脱水山梨糖醇单月桂酸酯、脱水山梨糖醇单油酸酯、脱水山梨糖醇单棕榈酸酯、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、泰洛沙泊等或它们的组合。增稠剂或分散剂的非限制性示例可以包括藻酸钠、甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、HPMC、CMC、微晶纤维素、黄蓍胶、黄原胶、膨润土、角叉菜胶、瓜尔胶、胶态二氧化硅等或它们的组合。防腐剂、张度剂、pH调节剂或缓冲剂通常可以是上文关于可注射制剂描述的那些中的任一种，或者其它合适的防腐剂、张度剂、pH调节剂或缓冲剂。甜味剂可以包括天然和/或人造甜味剂，诸如蔗糖、葡萄糖、果糖、甜菊糖、赤藓糖醇、木糖醇、阿斯巴甜、三氯蔗糖、纽甜、乙酰磺胺酸钾、糖精、申糖精、山梨糖醇等或它们的组合。
在一些示例中，治疗组合物可以被配制成功能食物产品，诸如食品条、粉末或饮料。食品条可以被配制成适合不同的饮食方案以用于任何特定目的(诸如减肥、能量、代餐、高蛋白质、高纤维、低血糖等)。食品条通常包含提供产生能量的营养物质的成分，诸如碳水化合物、蛋白质和脂质以及其它大量和微量营养物质，包括但不限于维生素和矿物质。除填充剂、粘结剂、乳化剂、水、湿润剂、调味剂、色素、甜味剂、防腐剂等外，其它健康促进成分诸如水果和蔬菜粉末、膳食纤维、益生元和益生菌、抗氧化剂、其它植物化学物质和代谢调节剂也可包含在制剂中。治疗组合物可以与其它成分一起配制到食品条中，以实现期望的健康益处、味道、质地、风味和稳定性。类似地，治疗组合物可被配制成粉末，诸如蛋白质粉、代餐粉或功能饮料干混物。它也可以被配制成功能饮品。即饮型饮料可包含其它成分，包括各种营养物质、健康促进剂、pH调节剂(酸度调节剂)、电解质、调味剂、甜味剂、稳定剂、色素、防腐剂等。
在一些示例中，治疗组合物可以被配制成医疗食品(如“孤儿药法案(Orphan DrugAct)”(21U.S.C.360ee(b)(3))第5(b)(3)条所定义)，该医疗食品在医师的监督下肠内服用或施用，旨在对动脉粥样硬化进行特定膳食管理。
本公开还描述了口服剂型。口服剂型可以包含足以降低动脉粥样硬化斑块诸如动脉粥样硬化易损斑块的易损性的量的硫酸化多糖或其药学上可接受的盐或金属络合物。口服剂型还可以包含药学上可接受的载体。
上文关于治疗组合物一般性描述了可以包含在口服剂型中的硫酸化多糖的类型。在一些示例中，口服剂型可以包含硫酸化多糖，每剂量约15mg至约15,000mg的量的硫酸化多糖。在一些其它示例中，口服剂型可以包含每剂量约50mg至约1000mg的硫酸化多糖。在一些另外的示例中，口服剂型可以包含每剂量约30mg至约300mg的硫酸化多糖。在其它示例中，口服剂型可以包含每剂量约50mg至约200mg的硫酸化多糖。
在一些另外的示例中，口服剂型可以包含抗氧化剂，如上文关于治疗组合物所述。在一些示例中，口服剂型可以包含每剂量约20mg至约20,000mg的量的植物抗氧化剂。在其它示例中，抗氧化剂可以以每剂量约100mg至约600mg的量存在于口服剂型中。在其它示例中，抗氧化剂可以以每剂量约125mg至约350mg的量存在于口服剂型中。在一些具体示例中，抗氧化剂可以以具有抗氧化剂活性的可食用植物物质(诸如上述那些物质)的粉末状共混物的形式包含在口服剂型中。在其它示例中，抗氧化剂可以以具有抗氧化剂活性的可食用植物物质(诸如上述那些物质)的液体共混物的形式包含在口服剂型中。
在一些另外的示例中，口服剂型可以包含硝酸盐和亚硝酸盐源，如上文关于治疗组合物所述。在一些示例中，口服剂型可以包含每剂量约20mg至约2,000mg的硝酸盐和亚硝酸盐。在其它示例中，硝酸盐和亚硝酸盐可以以每剂量约50mg至约1,000mg的量存在于口服剂型中。在其它示例中，硝酸盐和亚硝酸盐可以以每剂量约200mg至约600mg的量存在于口服剂型中。在一些具体示例中，硝酸盐和亚硝酸盐可以以具有硝酸盐和亚硝酸盐的可食用植物物质(诸如上述那些物质)的粉末状共混物的形式包含在口服剂型中。在其它示例中，硝酸盐和亚硝酸盐可以以具有硝酸盐和亚硝酸盐的可食用植物物质(诸如上述那些物质)的液体共混物的形式包含在口服剂型中。
在一些另外的示例中，口服剂型可以包含镁，如上文关于治疗组合物所述。在一些示例中，镁可以以每剂量约10mg至约1000mg的量包含在口服剂型中。在其它示例中，镁可以以每剂量约25mg至约400mg的量包含在口服剂型中。
在一些另外的示例中，口服剂型可以包含维生素K2，如上文关于治疗组合物所述。在一些示例中，维生素K2可以以每剂量约10μg至约100,000μg的量包含在口服剂型中。在其它示例中，镁可以以每剂量约50μg至约500μg的量包含在口服剂型中。
在一些具体示例中，口服剂型可以是固体口服剂型。在这种情况下，固体口服剂型可以包含适合固体口服剂型的任何药学上可接受的载体组分。在一些具体示例中，固体口服剂型可以包含以下项中的一种或多种：粘结剂、崩解剂、填充剂、抗粘剂、着色剂、助流剂、润滑剂或抗结块剂、防腐剂、干燥剂等或它们的组合，诸如上文关于治疗组合物所述的那些。在一些示例中，固体口服剂型可以被配制成片剂。在其它示例中，固体口服剂型可以被配制成两件式硬胶囊或密封的软胶囊。
在一些另外的具体示例中，口服剂型可以是液体口服剂型。在这种情况下，液体口服剂型可以包含适合液体口服剂型的任何药学上可接受的载体组分。在一些具体示例中，液体口服剂型可以包含液体媒介物、增溶剂、增稠剂或分散剂、防腐剂、张度剂、pH调节剂或缓冲剂、甜味剂等或它们的组合，诸如上述那些。
在一些示例中，本文所述的剂型或治疗组合物可以被置于合适的容器中。此类容器可以包括多次使用的容器或一次使用的容器。非限制性示例可以包括瓶、小瓶、泡罩包装、袋等。在一些示例中，容器可以是琥珀色容器或者被构造成保护剂型或治疗组合物免受光照的其它合适的容器。在其它示例中，容器可以包括剂型或治疗组合物的说明书和剂量给药信息。容器可以包括多种材料，诸如聚乙烯、聚丙烯、聚碳酸酯、聚氯乙烯、玻璃等或它们的组合。
在另外的替代方案中，本文所述的治疗组合物可以用作食品添加剂以强化一般人群的食品供应。例如，可以将治疗组合物安全地引入系统性食品供应中，诸如但不限于研磨的谷物面粉、意大利面食、早餐谷物、面包、汤或汤混合物、食品条、调料、调味品、乳制品、饮料、饮品混合物、冷冻食品、糕点、饼干和薄脆饼干、小吃等。
本公开还描述了一种治疗动脉粥样硬化易损斑块的方法。该方法可以包括识别动脉粥样硬化易损斑块，并且以足以稳定并逆转动脉粥样硬化易损斑块的量和频率将硫酸化多糖或其药学上可接受的盐施用于受试者。
应当注意，可以在施用硫酸化多糖之前和/或之后进行识别动脉粥样硬化易损斑块。此外，在一些示例中，识别动脉粥样硬化易损斑块还可以包括在一段时间内监测动脉粥样硬化易损斑块。这种监测可以帮助确定是否已经稳定动脉粥样硬化易损斑块和/或是否已经减小其大小。易损性的降低可以经由一个或多个病变或斑块风险特性的变化来体现。这些风险特性可以包括但不限于总斑块大小和动脉狭窄减小(或内腔大小增加)、富含脂质的坏死核大小减小、活跃性炎症和血小板聚集减少、溃烂的薄纤维帽部分或完全修复、钙化结节的总面积减少、出血的总面积减少等。
将硫酸化多糖或其药学上可接受的盐或金属络合物施用于受试者可以以多种方式进行。在一些示例中，硫酸化多糖或其药学上可接受的盐或金属络合物可以口服方式施用。口服施用可以包括以固体口服剂型(例如片剂、胶囊等)或液体口服剂型(例如溶液、悬浮液、糖浆、酏剂、凝胶等)形式施用。在一些其它示例中，施用可以经由注射(例如静脉内、动脉内、肌内、皮下等)进行。此外，在经由注射施用硫酸化多糖的情况下，可以经由弹丸式注射或经由计量输注来注射硫酸多糖。其它施用形式还可以包括局部施用、透皮施用、吸入、眼内施用、鼻腔施用、耳内施用、作为栓剂施用等。
施用的特定硫酸化多糖可以是本文所述那些中的任一种等。此外，在一些示例中，硫酸化多糖可以作为组合物或剂型施用，诸如本文所述的那些。在一些示例中，硫酸化多糖可以以每剂量约15mg至约15,000mg的量施用。在一些其它示例中，口服剂型可以以每剂量约50mg至约1000mg硫酸化多糖的量施用。在一些另外的示例中，口服剂型可以以每剂量约30mg至约300mg硫酸化多糖的量施用。在其它示例中，口服剂型可以以每剂量约50mg至约200mg硫酸化多糖的量施用。还应当注意，在硫酸化多糖作为固体口服剂型的一部分施用的情况下，剂量可以包括一个、二个、三个、四个或更多个胶囊、片剂等。
硫酸化多糖或其药学上可接受的盐或金属络合物可以以多种频率施用。在一些示例中，一剂硫酸化多糖可以以每天一次至每天四次的频率施用。在一些示例中，一剂硫酸化多糖可以每天一次、每天两次、每天三次、每天四次或更多次施用。在其它示例中，硫酸化多糖或其药学上可接受的盐可以以例如约每两天、三天、五天或七天一次的频率施用。因此，多种合适的施用频率可以与本发明的方法一起采用。
此外，取决于所需的治疗结果，硫酸化多糖或其药学上可接受的盐或金属络合物的施用可以持续多种持续时间。在一些示例中，当易损动脉粥样硬化病症的症状持续存在时，施用可以继续进行。在其它示例中，施用可以作为预防或干预治疗持续进行。在其它示例中，施用可以继续进行，直到动脉粥样硬化易损斑块已经稳定和/或其大小已经减小预定量。根据需要，也可以采用其它合适的施用持续时间。作为一般指导，施用持续时间可以为约2周至约24个月，并且通常为2个月至12个月。类似地，在施用持续时间内，可以实现富含脂质的坏死核的体积减小约5％至约80％，并且在一些情况下减小10％至90％。
在一些示例中，硫酸化多糖可以与第二活性剂结合施用(例如共同施用)。在一些示例中，第二活性剂可以包括抗氧化剂、硝酸盐、亚硝酸盐、镁、维生素K2或它们的组合，如本文其它地方所述。
施用硫酸化多糖或其药学上可接受的盐或金属络合物可以提供许多治疗益处。例如，在一些情况下，施用可以快速稳定和/或逆转人动脉中的动脉粥样硬化病变(例如，易损动脉粥样硬化病变)。在一些示例中，施用(例如每天施用)可以使动脉粥样硬化病变中的富含脂质的坏死核的大小快速减小。在一些示例中，施用(例如每天施用)可以使动脉粥样硬化斑块中的活跃性炎症的快速逆转和/或减少。在一些示例中，施用(例如每天施用)可以使动脉粥样硬化斑块的浅表血小板聚集快速逆转和/或减少。在一些示例中，施用(例如每天施用)可以修复和/或加强动脉粥样硬化病变上的溃烂的薄纤维帽。在一些示例中，施用(例如每天施用)可以诱导动脉粥样硬化斑块中的钙化结节快速减少。在一些示例中，施用(例如每天施用)可以治愈或改善斑块内出血。在一些示例中，施用(例如每天施用)可以诱导动脉粥样硬化斑块快速逆转和/或减少。在一些示例中，施用(例如每天施用)可以显著增加动脉内腔大小并减少动脉粥样硬化斑块的部位处的动脉狭窄。
在一些具体示例中，硫酸化多糖可以以使易损动脉粥样硬化病变中的富含脂质的坏死核的大小减小至少10体积％的量和频率施用。在其它示例中，硫酸化多糖可以以使易损动脉粥样硬化病变中的富含脂质的坏死核的大小减小至少30体积％的量和频率施用。在其它示例中，硫酸化多糖可以以使易损动脉粥样硬化病变中的富含脂质的坏死核的大小减小至少50体积％的量和频率施用。在其它示例中，硫酸化多糖可以以使易损动脉粥样硬化病变中的富含脂质的坏死核的大小减小至少60体积％的量和频率施用。值得注意的是，易损斑块中的钙化结节总数可以减少至少10％，并且在一些情况下可以减少10％至30％。类似地，在一些情况下，易损斑块中的出血总体积可以减少至少10％，并且在一些情况下可以减少10％至40％。在另一方面，易损斑块处的动脉壁厚度和动脉狭窄可以减小至少5％，而内腔大小可增加至少5％，并且在一些情况下可增加10％至40％。
还应当注意，本发明的方法可以用于治疗与动脉粥样硬化斑块(例如动脉粥样硬化易损斑块)有关的许多不良健康病症。不良健康病症的非限制性示例可以包括冠心病、心肌梗死、颈动脉疾病、中风、外周动脉疾病、动脉瘤、慢性肾脏疾病、勃起功能障碍、高血压、阿尔茨海默病、血管性痴呆、糖尿病、雷诺病、睡眠呼吸暂停等或它们的组合。
实施例1
在一项研究中，通过对颈动脉内膜中层厚度(CIMT)进行非侵入性超声成像来对人类受试者进行预筛。CIMT值异常表明存在颈动脉斑块并且心血管疾病风险增加。存在不同的CIMT指南和参考范围。例如，欧洲心脏病学会(ESC)/欧洲高血压学会(ESH)指南(2013)将0.9mm定义为无症状损害。在另一方面，美国超声心动图学会(ASE)建议将IMT≥75百分位认为是高水平，表明心血管风险增加。文献表明，CIMT的正常值范围从年轻人的0.5mm到老年人(超过80岁)的1.2mm。在我们的研究中，选择CIMT大于1.2mm的受试者进一步筛查潜在的颈动脉易损斑块。
然后通过磁共振成像(MRI)对选定受试者进行扫描，并通过MRI-PlaqueView(一种FDA清除斑块表征产品，通过VPDiagnostics(Seattle，WA)对动脉粥样硬化颈动脉进行定量分析)对颈动脉易损斑块进行识别和分析。易损斑块是易于发生血栓形成并发症和快速进展，从而引起急性血管事件或死亡的斑块。从诊断的角度来看，它们大多是易破裂斑块，通过成像技术诸如MRI将它们识别为具有特定的形态和组成特征。较大的富含脂质的坏死核和薄的纤维帽是斑块最明显的不稳定特征。图1示出了通过MRI-PlaqueView基于富含脂质的坏死核的大小进行风险分类。CAS2、CAS3和CAS4表示不同程度的易损斑块，这是由于存在体积为斑块的至少5％的独特的富含脂质的坏死核。溃烂(不完整)的纤维帽、钙化点和结节以及出血单独或以任何组合存在会增加每个CAS(颈动脉粥样硬化评分)处斑块的易损性。例如，CAS2伴随出血也被认为是高风险。
让被识别为具有易损斑块的人类受试者每天两次口服硬胶囊，持续2个月，该硬胶囊含有与200mg基于植物的富含抗氧化剂的粉末共混的150mg礁膜的提取物(大约50％硫酸鼠李聚糖)。在基线处和治疗两个月后测量他们的颈动脉中富含脂质的坏死核体积。在两个月的测试期结束时，各个斑块的富含脂质的坏死核大小平均减小了55.5％，从而稳定了斑块，使它们变得不那么易损或不那么容易破裂。内腔大小增加了23％以上，这表明除了富含脂质的坏死核减小外，斑块大小和动脉狭窄也减小。广泛接受的是，通过去除脂质和坏死物质、触发内皮修复和病变愈合，可以实现易损斑块的稳定并逆转。
这些结果显著优于目前通过干预诸如他汀类获得的结果。例如，在一项人类临床研究中，用低剂量(5mg/天)或高剂量(40/80mg/天)的罗苏伐他汀治疗33名患者，持续24个月。通过相同的MRI-PlaqueView技术进行分析，研究结束时，所有患者中富含脂质的坏死核减小了约25％(低剂量和高剂量分别减小了27％和19％)。内腔大小几乎没有变化，因此动脉狭窄也几乎没有变化。在另一项研究中报道了用阿托伐他汀(10-80mg/天)治疗33名患者3年后，出现类似结果。关于他汀类的其它已发表研究表明，颈动脉斑块中富含脂质的坏死核的减小量甚至更少。因此，动脉粥样硬化护理领域的技术人员认为我们的结果令人惊讶和出乎意料。
实施例2
用与150mg基于植物的富含抗氧化剂的粉末共混的300mg礁膜的提取物(大约50％硫酸鼠李聚糖)在硬胶囊中制备组合物。该组合物每天口服施用两次。
实施例3
用100mg从海带(Laminaria japonica)中提取的75％硫酸岩藻依聚糖和10,000mg水果和蔬菜粉末共混物(甜菜根、奇异果、西瓜、山楂果、芹菜、刺梨果、枣果、西兰花、蓝果忍冬、全葡萄、草莓、杨梅、紫甘薯、罗汉果和李子)在干饮料混合物中制备组合物，该组合物含有约500mg膳食硝酸盐。该组合物每天施用一次。
