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预防细菌的粘附

2021-02-12 21:42:07

预防细菌的粘附

　　本发明申请是基于申请日为2013年12月09日，申请号为201380063419.5(国际申请号为PCT/EP2013/075922)、名称为“预防细菌的粘附”的发明专利申请的分案申请。

　　对序列表的引用

　　本申请包含计算机可读形式的序列表。该计算机可读形式通过引用结合在此。

　　发明领域

　　本发明涉及一种包含脱氧核糖核酸酶(DNA酶)的洗涤剂组合物，一种纺织品洗涤方法，一种根据该方法洗涤的纺织品以及DNA酶用于减少来自衣物和/或纺织品的恶臭、用于抗再沉积和用于维持或改善纺织品的白度的用途。

　　背景

　　当使用衣物(像T恤或运动衣)时，它们暴露于来自使用者的身体和来自它们使用的环境的其余部分的细菌。这些细菌是难闻的气味的来源，在使用后产生难闻的气味但是即使洗涤后难闻的气味仍可存在。这种难闻的气味的原因是细菌粘附到纺织品表面。由于粘附到纺织品上，即使洗涤后细菌仍可存在，并且继续成为难闻的气味的来源。

　　国际专利申请WO%202011/098579涉及细菌脱氧核糖核酸酶化合物以及用于破坏和预防生物膜的方法。

　　本发明依赖于来自现实生活中的衣物的细菌多样性的研究(参见实例1)的数据。从衣物中分离出二十四种细菌和真菌菌落，其中的许多产生令人非常不快的气味/恶臭。

　　本发明提供了一种通过在洗涤过程中减少某些特定细菌粘附到纺织品表面而解决臭味问题的方案。所选细菌是非常难闻的气味的来源，并且分离自现实生活中的衣物。

　　概述

　　本发明提供了一种洗涤剂组合物，该洗涤剂组合物包括一种或多种阴离子表面活性剂；一种选自下组的酶，该组由以下各项组成：蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、碳水化物酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶以及氧化酶；以及一种脱氧核糖核酸酶(DNA酶)。

　　本发明进一步涉及一种纺织品洗涤方法，该方法包括：

　　a.将一种纺织品暴露于一种洗涤液，该洗涤液包括根据本发明的DNA酶或洗涤剂组合物，

　　b.完成至少一个洗涤循环；并且

　　c.任选地冲洗该纺织品。

　　本发明进一步涉及一种根据本发明方法洗涤的纺织品。

　　并且，本发明涉及脱氧核糖核酸酶(DNA酶)用于减少来自衣物和/或纺织品的恶臭、用于抗再沉积和用于维持或改善纺织品的白度的用途。

　　本发明涉及如下各项：

　　1.一种洗涤剂组合物，包括

　　a.一种或多种阴离子表面活性剂；

　　b.一种选自下组的酶，该组由以下各项组成：蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、碳水化物酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶以及氧化酶；以及

　　c.一种脱氧核糖核酸酶(DNA酶)。

　　2.根据项1所述的组合物，其中该组合物包括10-40w/w％的表面活性剂、4-50w/w％的助洗剂和0-5w/w％的聚合物以及任选地填充剂、溶剂和酶稳定剂。

　　3.根据以上项中任一项所述的组合物，其中该DNA酶可获得自芽孢杆菌属。

　　4.根据以上项中任一项所述的组合物，其中该洗涤剂组合物能够减少选自下组的细菌粘附至表面，该组由以下各项组成：不动杆菌属、气微菌属、短波单胞菌属、微杆菌属、滕黄微球菌、假单胞菌属、表皮葡萄球菌以及寡养单胞菌属，或能够使细菌从它们粘附至其上的表面释放。

　　5.根据以上项中任一项所述的组合物，其中该组合物能够减少来自湿的和/或干的衣物的恶臭。

　　6.根据以上项中任一项所述的组合物，其中该组合物能够减少来自湿的和/或干的衣物的E-2-壬烯醛。

　　7.一种纺织品洗涤方法，包括：

　　a.将一种纺织品暴露于一种洗涤液，该洗涤液包括根据项1-6中任一项所述的DNA酶或洗涤剂组合物，

　　b.完成至少一个洗涤循环；并且

　　c.任选地冲洗该纺织品。

　　8.根据项7所述的方法，其中该洗涤液的温度在5℃至95℃的范围内、或在10℃至80℃的范围内、或在10℃至70℃的范围内、或在10℃至60℃的范围内、或在10℃至50℃的范围内、或在15℃至40℃的范围内、或在20℃至30℃的范围内。

　　9.根据以上项中任一项所述的方法，其中该纺织品的白度被维持或改善。

　　10.根据以上项中任一项所述的方法，其中污垢的再沉积被减少。

　　11.根据项7-10中任一项所述的方法洗涤的纺织品。

　　12.一种脱氧核糖核酸酶(DNA酶)用于减少来自衣物和/或纺织品的恶臭的用途。

　　13.根据项12所述的用于减少纺织品上的E-2-壬烯醛的量的用途。

　　14.DNA酶用于维持或改善纺织品的白度的用途。

　　15.DNA酶用于在一个洗涤循环过程中减少污垢的再沉积的用途。

　　定义

　　酶洗涤益处：在此将术语“酶洗涤益处”定义为将一种酶添加至洗涤剂中与不具有该酶的同一洗涤剂相比的有利效果。可以由酶提供的重要的洗涤益处是在洗涤和/或清洁之后没有或有非常少的可见污垢的污物去除，预防或减少在洗涤过程中释放的污垢的再沉积(一种也被称作抗再沉积的效果)，完全或部分恢复纺织品的白度(一种也被称作增白的效果)，这些纺织品初始是白色的但是在重复使用和洗涤后获得浅灰色或浅黄色的外观。不直接与污垢的催化去污或其再沉积的预防相关的纺织品护理益处对于酶洗涤益处而言也是重要的。此类纺织品护理益处的实例是预防或减少染料从一织物转移至另一织物或同一织物的另一部分(一种也被称作染料转移抑制或抗返染的效果)，从织物表面去除突出或断裂的纤维以减少起球倾向或去除已经存在的绒球或绒毛(一种也被称作抗起球的效果)，改善织物柔软性，织物的颜色澄清以及去除陷在织物或服装的纤维中的微粒状污垢。酶漂白是一种另外的酶洗涤益处，其中通常将催化活性用于催化漂白组分(例如过氧化氢或其他过氧化物)的形成。

　　纺织品：术语“纺织品”意指包括纱线、纱线中间体、纤维、非机织物材料、天然材料、合成材料、以及任何其他纺织品材料的任何纺织品材料，这些材料制造的织物和由这些织物制成的产品(例如服装和其他物品)。该纺织品或织物可以处于针织品、机织物、牛仔布、非机织物、毡、纱线、以及毛巾布的形式。这些纺织品可以是纤维素基的，如天然纤维素，包括棉布、亚麻/亚麻布、黄麻、苎麻、剑麻或椰壳纤维或者人造纤维素(例如，来源于木浆)，包括纤维胶/人造丝、醋酸纤维素纤维(三胞)、莱赛尔纤维(lyocell)或其共混物。纺织品或织物也可以不基于纤维素，如天然聚酰胺，包括羊毛、驼毛、羊绒、马海毛、兔毛和蚕丝或合成聚合物如尼龙、芳族聚酰胺、聚酯、丙烯酸、聚丙烯和氨纶/弹性纤维(spandex/elastane)、或其共混物其以及基于纤维素和不基于纤维素的纤维的共混物。共混物的实例是棉和/或人造丝/纤维胶与一种或几种伴随材料的共混物，该伴随材料例如是羊毛、合成纤维(例如聚酰胺纤维、丙烯酸纤维、聚酯纤维、聚氯乙烯纤维、聚氨酯纤维、聚脲纤维、芳族聚酰胺纤维)和/或含纤维素的纤维(例如人造丝/纤维胶、苎麻、亚麻/亚麻布、黄麻、醋酸纤维素纤维、莱赛尔纤维)。织物可以是常规的可洗涤衣物，例如玷污的家居衣物。当使用术语织物或衣服时，旨在也包括广义术语纺织品。

　　改进的洗涤性能：在此将术语“改进的洗涤性能”定义为相对于没有DNA酶的参比洗涤剂组合物的洗涤性能，包含DNA酶的洗涤剂组合物例如通过增加的恶臭去除或污物去除而展示出增加的洗涤性能。

　　白度：在此将术语“白度”定义为在不同领域并且针对不同顾客具有不同含义的广义术语。白度的损失可以例如归因于灰化、黄化、或光增亮剂/调色剂的去除。灰化和黄化可归因于污垢再沉积、身体污垢、来自例如铁和铜离子或染料转移的着色。白度可以包括来自以下列表的一个或若干问题：着色剂或染料作用；不完全污物去除(例如身体污垢、皮脂等)；再沉积(物体的灰化、黄化或其他变色)(去除的污垢与纺织品的其他部分(弄脏的或未弄脏的)再关联)；在应用过程中纺织品的化学变化；以及颜色的澄清或淡色化。

　　详细说明

　　可以将该洗涤剂组合物用于一种纺织品洗涤方法中，该方法包括：

　　a.将一种纺织品暴露于一种洗涤液，该洗涤液包括根据本发明的DNA酶或洗涤剂组合物，

　　b.完成至少一个洗涤循环；并且

　　c.任选地冲洗该纺织品。

　　本发明进一步涉及脱氧核糖核酸酶(DNA酶)用于减少来自衣物和/或纺织品的恶臭的用途。

　　如上所述，当使用衣物(像T恤或运动衣)时，它们暴露于来自使用者的身体和来自它们使用的环境的其余部分的细菌。这些细菌是难闻的气味的来源，在使用后产生难闻的气味但是即使洗涤后难闻的气味仍可存在。

　　当洗涤此类纺织品时，当打开洗衣机并且拿出湿的衣物时，可以出现使人不快的气味。这种气味或恶臭给出纺织品不干净并且需要再次洗涤的印象。即使在手洗衣物方法中，也可能从湿的衣物中感觉到恶臭。

　　本发明的一个优势在于这种恶臭不会从湿的衣物出现，即当打开洗衣机时。这使得洗涤过程在家庭和工业应用中都变成一项更具吸引力的任务。

　　本发明的另一个优势在于，当从洗衣机或洗涤液中直接取出湿的衣物时，衣物没有恶臭并且感觉到是干净的。因而，节省了用于第二次或甚至第三次洗涤的时间、金钱和能量。这对于环境而言具有巨大优势。

　　在常规的洗衣方法中，恶臭甚至可以在洗衣过程和干燥过程中幸存。这具有以下效果：当使用纺织品时，可以感受到恶臭。这对于纺织品的使用者而言是令人非常不快的，即当穿着甚至在开始体育活动之前便闻到气味的运动衣时。这对于纺织品的使用者而言可能是令人尴尬的并且甚至可以导致在纺织品被穿破之前便被丢弃并且由新的运动服代替。通过使用本发明这被避免并且因而由于使用有限的资料(如用于新的纺织品的原料)、水、能量以及环境污染而节约环境。

　　在本发明的一个实施例中，该洗涤剂组合物的阴离子表面活性剂选自下组，该组由以下各项组成：直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)(如十二烷基硫酸钠(SDS))、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES)、仲链烷磺酸盐(SAS)、石蜡烃磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)、甲酯磺酸盐(MES)、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸或皂的二酯和单酯。

　　在一个实施例中，阴离子表面活性剂的量在1％至40％的范围内、在5％至30％的范围内、在5％至15％的范围内或在20％至25％的范围内。

　　在一个实施例中，洗涤剂助洗剂或共助洗剂的量在0％至65％的范围内、在40％-65％的范围内或在40％至65％的范围内。

　　在本发明的一个实施例中，该组合物包括10-40w/w％的表面活性剂、4-50w/w％的助洗剂和0-5w/w％的聚合物，以及任选地填充剂、溶剂和酶稳定剂。

　　在本发明的一个实施例中，该洗涤剂组合物包括

　　a.一种或多种阴离子表面活性剂；

　　c.一种脱氧核糖核酸酶(DNA酶)，其中该DNA酶可获得自一种细菌。

　　在一个实施例中，该DNA酶可获得自芽孢杆菌属。

　　在本发明的一个实施例中，该洗涤剂组合物包括

　　a.一种或多种阴离子表面活性剂；

　　c.一种脱氧核糖核酸酶(DNA酶)，其中该DNA酶与如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110或SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少80％一致性。

　　在本发明的一个实施例中，该DNA酶与如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110或SEQ%20IDNO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少85％一致性。

　　在一个实施例中，该DNA酶与如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110或SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少90％一致性。

　　在一个实施例中，该DNA酶与如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110或SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少95％一致性。

　　在一个实施例中，该DNA酶与如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110或SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少97％一致性。

　　在一个实施例中，该DNA酶与如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110或SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少98％一致性。

　　在一个实施例中，该DNA酶与如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110或SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少99％一致性。

　　在一个实施例中，该DNA酶与如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110或SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有100％一致性。

　　在一个实施例中，本发明的洗涤剂组合物能够减少选自下组的细菌粘附至表面，该组由以下各项组成：不动杆菌属、气微菌属(Aeromicrobium%20sp.)、短波单胞菌属(Brevundimonas%20sp.)、微杆菌属、滕黄微球菌、假单胞菌属、表皮葡萄球菌以及寡养单胞菌属，或能够使细菌从它们粘附至其上的表面释放。在一个实施例中，该表面是纺织品表面。

　　在一个实施例中，该组合物能够减少来自湿的衣物的恶臭。

　　在一个实施例中，该组合物能够减少来自干的衣物的恶臭。

　　在本发明的一个实施例中，该洗涤剂组合物包括

　　a.一种或多种阴离子表面活性剂；

　　c.一种脱氧核糖核酸酶(DNA酶)，其中该DNA酶可获得自一种细菌，并且该组合物能够减少来自湿的和/或干的衣物的恶臭。

　　在一个实施例中，该DNA酶可获得自芽孢杆菌属。

　　在本发明的一个实施例中，该洗涤剂组合物包括

　　a.一种或多种阴离子表面活性剂；

　　c.一种脱氧核糖核酸酶(DNA酶)，其中该DNA酶与如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110或SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少80％一致性，并且该组合物能够减少来自湿的和/或干的衣物的恶臭。

　　在本发明的一个实施例中，该洗涤剂组合物包括

　　a.一种或多种阴离子表面活性剂；

　　c.一种脱氧核糖核酸酶(DNA酶)，其中该DNA酶可获得自一种细菌，并且该组合物能够减少来自湿的和/或干的衣物的E-2-壬烯醛的量。

　　在一个实施例中，该洗涤剂组合物能够将存在于纺织品上的E-2-壬烯醛的量减少至洗涤之前存在于该纺织品上的E-2-壬烯醛的量的低于80％。

　　在一个实施例中，该洗涤剂组合物能够将存在于纺织品上的E-2-壬烯醛的量减少至洗涤之前存在于该纺织品上的E-2-壬烯醛的量的低于70％、低于60％、低于50％、低于40％、低于30％、低于20％、低于10％或低于5％，或被减少。

　　在本发明的一个实施例中，该组合物是棒、均匀的片剂、具有两个或更多个层的片剂、具有一个或多个室的袋、规则的或压缩的粉末、颗粒、膏、凝胶、或规则的、压缩的或浓缩的液体。

　　在一个实施例中，该组合物是一种液体洗涤剂。在一个实施例中，该组合物是一种粉末或颗粒洗涤剂。

　　本发明进一步涉及一种纺织品洗涤方法，该方法包括：

　　a.将一种纺织品暴露于一种洗涤液，该洗涤液包括根据权利要求1-14中任一项所述的DNA酶或洗涤剂组合物，

　　b.完成至少一个洗涤循环；并且

　　c.任选地冲洗该纺织品。

　　在一个实施例中，该洗涤液的pH在7至10的范围内，优选7至9，例如7.5。

　　在本发明的一个实施例中，该洗涤液的温度在5℃至95℃的范围内、或在10℃至80℃的范围内、或在10℃至70℃的范围内、或在10℃至60℃的范围内、或在10℃至50℃的范围内、或在15℃至40℃的范围内、或在20℃至30℃的范围内。

　　在本发明的一个优选实施例中，该洗涤液的温度在20℃至30℃的范围内，例如30℃。

　　低温下的洗涤给出以下优势：能量消耗被减少。减少能量消耗具有环境优势。

　　在本发明的一个实施例中，在第一个并且任选地第二个和第三个洗涤循环过程中，将该纺织品暴露于洗涤液。

　　在一个实施例中，在暴露于洗涤液后，冲洗该纺织品。在一个实施例中，当冲洗该纺织品时，使用调节剂。

　　在本发明的一个实施例中，提供了一种纺织品洗涤方法，该方法包括：

　　a.将一种纺织品暴露于一种洗涤液，该洗涤液包括根据权利要求1-14中任一项所述的DNA酶或洗涤剂组合物，

　　b.完成至少一个洗涤循环；并且

　　c.任选地冲洗该纺织品，

　　其中完成该方法的步骤a-c后，纺织品的恶臭被减少。

　　在一个实施例中，湿的纺织品的恶臭被减少。在一个实施例中，干的纺织品的恶臭被减少。

　　在一个实施例中，本发明涉及洗涤的纺织品。

　　本发明进一步涉及脱氧核糖核酸酶(DNA酶)用于减少来自衣物和/或纺织品的恶臭的用途。

　　在一个实施例中，该恶臭包括E-2-壬烯醛。在一个实施例中，本发明涉及DNA酶用于减少纺织品上的E-2-壬烯醛的量的用途。

　　在本发明的一个实施例中，存在于纺织品上的E-2-壬烯醛的量被减少至洗涤之前存在于该纺织品上的E-2-壬烯醛的量的低于80％。

　　在一个实施例中，存在于纺织品上的E-2-壬烯醛的量被减少至洗涤之前存在于该纺织品上的E-2-壬烯醛的量的低于70％、低于60％、低于50％、低于40％、低于30％、低于20％、低于10％或低于5％，或被减少。

　　在本发明的一个实施例中，该DNA酶可获得自一种细菌。

　　在一个实施例中，该DNA酶可获得自芽孢杆菌属。

　　下文将进一步描述DNA酶。

　　在本发明的一个实施例中，纺织品的白度被维持或甚至被改善。在一个实施例中，洗涤循环过程中的污垢的再沉积被减少。

　　在一个实施例中，本发明涉及脱氧核糖核酸酶(DNA酶)用于减少来自衣物和/或纺织品的恶臭的用途。

　　该DNA酶可以用于减少来自以下衣服的恶臭，这些衣服在正常使用过程中已经暴露于直接身体接触，在10℃-40℃下洗涤，并且随后在正常使用过程中再次暴露于直接身体接触。

　　在本发明的一个实施例中，该DNA酶被用于减少纺织品上的E-2-壬烯醛的量。存在于纺织品上的E-2-壬烯醛的量被减少至洗涤之前存在于该纺织品上的E-2-壬烯醛的量的低于80％。在一个实施例中，存在于纺织品上的E-2-壬烯醛的量被减少至洗涤之前存在于该纺织品上的E-2-壬烯醛的量的低于70％、低于60％、低于50％、低于40％、低于30％、低于20％、低于10％或低于5％，或被减少。

　　在一个实施例中，该DNA酶被用于维持或改善纺织品的白度。

　　在一个实施例中，该DNA酶被用于减少洗涤循环过程中的污垢的再沉积。

　　该DNA酶可获得自一种细菌，例如可获得自芽孢杆菌属。

　　在本发明的一个实施例中，该DNA酶与如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110或SEQ%20IDNO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少85％一致性。

　　在一个实施例中，该DNA酶与如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110或SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少90％一致性。

　　在一个实施例中，该DNA酶与如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110或SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少95％一致性。

　　在一个实施例中，该DNA酶与如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110或SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少97％一致性。

　　在一个实施例中，该DNA酶与如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110或SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少98％一致性。

　　在一个实施例中，该DNA酶与如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110或SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少99％一致性。

　　在一个实施例中，该DNA酶与如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110或SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有100％一致性。

　　脱氧核糖核酸酶(DNA酶)

　　脱氧核糖核酸酶(DNA酶)是催化DNA骨架中的磷酸二酯键的水解切割从而降解DNA的任何酶。

　　根据本发明，可获得自细菌的DNA酶是优选的；特别地，可获得自芽孢杆菌属的DNA酶是优选的；特别地，可获得自枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌的DNA酶是优选的。

　　在本发明中使用的DNA酶包括SEQ%20ID%20NO:1的成熟多肽，该成熟多肽如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110(27至136)所示，其来源于枯草芽孢杆菌；或SEQ%20ID%20NO:2的成熟多肽，该成熟多肽如SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至109所示，其来源于地衣芽孢杆菌。

　　该DNA酶可包括如SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸-26至110(SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至136)或SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸-33至109(SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至142)所示的氨基酸序列或其具有DNA酶活性的片段(例如成熟多肽)或由其组成。SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸-26至110(SEQID%20NO:1的氨基酸1至136)或SEQ%20ID%20NO:1的氨基酸1至110(SEQ%20ID%20NO:1的27至136)的片段是一种多肽，该多肽具有一个或多个从SEQ%20ID%20NO:1的氨基和/或羧基末端缺失的氨基酸。SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸-33至109(SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸1至142)或SEQ%20ID%20NO:2的1至109(SEQ%20ID%20NO:1的34至142)的片段是一种多肽，该多肽具有一个或多个从SEQ%20ID%20NO:2的氨基和/或羧基末端缺失的氨基酸。

　　本发明还提供了基本上与以上多肽同源的DNA酶多肽及其种类同系物(旁系同源物或直系同源物)。在此使用术语“基本上同源”表示与SEQ%20ID%20NO:1或SEQ%20ID%20NO:2的氨基酸序列至少80％、优选至少85％、更优选至少90％、更优选至少95％、甚至更优选至少97％相同，并且最优选至少99％或更多相同的多肽、或其具有DNA酶活性的片段、或其直系同源物或旁系同源物。

　　出于本发明的目的，使用如在EMBOSS包(EMBOSS：欧洲分子生物学开放软件套件(The%20European%20Molecular%20Biology%20Open%20Software%20Suite)，赖斯(Rice)等，2000，遗传学趋势(Trends%20Genet.)16:276-277)(优选5.0.0版或更新版本)的尼德尔(Needle)程序中所实施的尼德尔曼-翁施(Needleman-Wunsch)算法(尼德尔曼(Needleman)和翁施(Wunsch)，1970，分子生物学杂志(J.Mol.Biol.)48:443-453)来确定两个氨基酸序列之间的序列一致性。使用的这些参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5，以及EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版本)取代矩阵。尼德尔标注的“最长的一致性”的输出(使用-非简化选项获得)被用作百分比一致性，并且如下计算：

　　(一致的残基X%20100)/(比对长度-比对中的空位总数)

　　在另一个实施例中，SEQ%20ID%20NO:1或SEQ%20ID%20NO:2的DNA酶在一个或多个(例如，若干个)位置处包括取代、缺失和/或插入。在一个实施例中，引入SEQ%20ID%20NO:1或SEQ%20ID%20NO:2的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10个，例如1、2、3、4、5、6、7、8或9个。这些氨基酸变化可以具有微小性质，即，不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入；典型地1-30个氨基酸的小缺失；小的氨基-或羧基-末端延伸，如氨基末端的甲硫氨酸残基；多达20-25个残基的小接头肽；或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的小延伸，如聚组氨酸段(tract)、抗原表位或结合结构域。

　　保守取代的实例是在下组的范围内：碱性氨基酸(精氨酸、赖氨酸及组氨酸)、酸性氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸)、极性氨基酸(谷氨酰胺和天冬酰胺)、疏水性氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸及缬氨酸)、芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸及酪氨酸)及小氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸及甲硫氨酸)。一般不会改变比活性的氨基酸取代是本领域已知的并且例如由H.诺伊拉特(Neurath)和R.L.希尔(Hill)，1979，在蛋白质(The%20Proteins)，学术出版社(Academic%20Press)，纽约中描述。常见取代是Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Tyr/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu、和Asp/Gly。

　　可替代地，氨基酸改变具有这样一种性质：改变多肽的物理化学特性。例如，氨基酸改变可以提高多肽的热稳定性、改变底物特异性、改变最适pH，等等。

　　可以根据本领域中已知的程序，如定点诱变或丙氨酸扫描诱变(坎宁汉(Cunningham)和威尔斯(Wells)，1989，科学(Science)244:1081-1085)来鉴定多肽中的必需氨基酸。在后一项技术中，在该分子中的每个残基处引入单个丙氨酸突变，并且对所得突变体分子的DNA酶活性进行测试以鉴定对于该分子的活性至关重要的氨基酸残基。还参见，希尔顿(Hilton)等，1996，生物化学杂志(J.Biol.Chem.)271:4699-4708。也可结合假定接触位点氨基酸的突变，如通过以下技术例如核磁共振、结晶学、电子衍射、或光亲和标记进行确定的对结构进行物理学分析，从而确定酶的活性位点或其他生物学相互作用。参见例如，德沃斯(de%20Vos)等，1992，科学(Science)255:306-312；史密斯(Smith)等，1992，分子生物学杂志(J.Mol.Biol.)224:899-904；乌拉达维(Wlodaver)等，1992，欧洲生化学会联合会快报(FEBS%20Lett.)309:59-64。还可以从与相关多肽的比对来推断鉴定必需氨基酸。

　　可以做出单个或多个氨基酸取代、缺失和/或插入并且使用诱变、重组和/或改组的已知方法进行测试，随后进行相关筛选程序，如由里德哈尔-奥尔森(Reidhaar-Olson)和萨奥尔(Sauer)，1988，科学(Science)241:53-57；博维(Bowie)和萨奥尔，1989，美国国家科学院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)86:2152-2156；WO%2095/17413；或WO%2095/22625所披露的那些。可以使用的其他方法包括易错PCR、噬菌体展示(例如洛曼(Lowman)等，1991，生物化学(Biochemistry)30:10832-10837；美国专利号5,223,409；WO%2092/06204)以及区域定向诱变(德比什尔(Derbyshire)等，1986，基因(Gene)46:145；内尔(Ner)等，1988，DNA%207:127)。

　　可以结合诱变/改组方法与高通量自动化筛选方法来检测由宿主细胞表达的克隆的、诱变的多肽的活性(内斯(Ness)等，1999，自然生物技术(Nature%20Biotechnology)17:893-896)。编码活性多肽的诱变的DNA分子可以回收自宿主细胞，并且使用本领域的标准方法对其进行迅速测序。这些方法允许迅速确定多肽中单个氨基酸残基的重要性。

　　该多肽可以是一种杂交多肽，其中一个多肽的一个区域融合在另一个多肽的一个区域的N-末端或C-末端。

　　该多肽可以是一种融合多肽或可裂解的融合多肽，其中另一个多肽是在本发明多肽的N-末端或C-末端处融合。通过将编码另一多肽的多核苷酸融合到本发明的多核苷酸而产生融合多肽。用于产生融合多肽的技术在本领域是已知的，并包括连接编码多肽的编码序列，这样使得它们在框内并且使得融合多肽的表达处于相同的一个或多个启动子和终止子的控制下。融合多肽还可以使用内含肽技术来构建，其中融合多肽在翻译后产生(库珀(Cooper)等，1993，欧洲分子生物学学会杂志(EMBO%20J.)12:2575-2583；道森(Dawson)等，1994，科学(Science)266:776-779)。

　　融合多肽可在两个多肽之间进一步包括一个切割位点。在融合蛋白分泌之时，该位点被切割，从而释放出这两个多肽。切割位点的实例包括但不限于在以下文献中披露的位点：马丁(Martin)等，2003，工业微生物与生物技术杂志(J.Ind.Microbiol.Biotechnol.)3:568-576；斯维特娜(Svetina)等，2000，生物技术杂志(J.Biotechnol.)76:245-251；拉斯穆森-威尔逊(Rasmussen-Wilson)等，1997，应用与环境微生物学(Appl.Environ.Microbiol.)63:3488-3493；沃德(Ward)等，1995，生物技术(Biotechnology)13:498-503；以及孔特雷拉斯(Contreras)等，1991，生物技术9:378-381；伊顿(Eaton)等，1986，生物化学(Biochemistry)25:505-512；柯林斯-拉西(Collins-Racie)等，1995，生物技术13:982-987；卡特(Carter)等，1989，蛋白质：结构、功能以及遗传学(Proteins:Structure，Function，and%20Genetics)6:240-248；以及史蒂文斯(Stevens)，2003，药物发现世界(Drug%20Discovery%20World)4:35-48。

　　DNA酶的浓度典型地在以下范围内：0.0004-100ppm酶蛋白，0.001-100ppm酶蛋白，0.01-100ppm酶蛋白，优选0.05-50ppm酶蛋白，更优选0.1-50ppm酶蛋白，更优选0.1-30ppm酶蛋白，更优选0.5-20ppm酶蛋白，并且最优选0.5-10ppm酶蛋白。

　　在一个实施例中，DNA酶的浓度典型地在以下范围内：1-40ppm酶蛋白，优选1-20ppm酶蛋白，更优选1-10ppm酶蛋白。

　　洗涤剂组合物

　　在本发明的一个方面中，将该DNA酶添加至洗涤剂组合物中并且因此成为洗涤剂组合物的组分。

　　本发明的洗涤剂组合物可以配制为(例如)手洗或机洗洗衣洗涤剂组合物，包括适用于预处理有污迹的织物的洗衣添加剂组合物，和漂洗添加的织物软化剂组合物，或配制为用于一般家用硬表面清洁操作的洗涤剂组合物，或配制用于手洗或机洗餐具洗涤操作。

　　表面活性剂

　　洗涤剂组合物可以包括一种或多种表面活性剂，它们可以是阴离子的和/或阳离子的和/或非离子的和/或半极性的和/或兼性离子的，或其混合物。在一个具体实施例中，洗涤剂组合物包括一种或多种非离子型表面活性剂和一种或多种阴离子表面活性剂的混合物。这种或这些表面活性剂典型地以按重量计从约0.1％至60％的水平存在，例如约1％至约40％、或约3％至约20％、或约3％至约10％。基于所希望的清洁应用来选择这种或这些表面活性剂，并且这种或这些表面活性剂包括本领域中已知的任何一种或多种常规表面活性剂。

　　当被包括在其中时，该洗涤剂将通常包括按重量计从约1％至约40％，例如从约5％至约30％(包括从约5％至约15％)、或从约20％至约25％的阴离子表面活性剂。阴离子表面活性剂的非限制性实例包括硫酸盐和磺酸盐，具体地说是直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)(如十二烷基硫酸钠(SDS))、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES，也被称为醇乙氧基硫酸盐或脂肪醇醚硫酸盐)、仲链烷磺酸盐(SAS)、石蜡烃磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)(包括甲酯磺酸盐(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸或皂的二酯和单酯、及其组合。

　　当被包括在其中时，该洗涤剂将通常包含按重量计从约0.2％至约40％的非离子表面活性剂，例如从约0.5％至约30％，特别是从约1％至约20％、从约3％至约10％，例如从约3％至约5％或从约8％至约12％。非离子表面活性剂的非限制性实例包括醇乙氧基化物(AE或AEO)、醇丙氧基化物、丙氧基化脂肪醇(PFA)、烷氧基化脂肪酸烷基酯，如乙氧基化和/或丙氧基化脂肪酸烷基酯、烷基酚乙氧基化物(APE)、壬苯酚乙氧基化物(NPE)、烷基多糖苷(APG)、烷氧基化胺、脂肪酸单乙醇酰胺(FAM)、脂肪酸二乙醇酰胺(FADA)、乙氧基化脂肪酸单乙醇酰胺(EFAM)、丙氧基化脂肪酸单乙醇酰胺(PFAM)、多羟基烷基脂肪酸酰胺或葡糖胺的N-酰基N-烷基衍生物(葡糖酰胺GA，或脂肪酸葡糖酰胺FAGA)，以及在商标名SPAN和TWEEN下可获得的产品，及其组合。

　　当被包括在其中时，该洗涤剂将通常包含按重量计从约1％至约40％的阳离子表面活性剂，例如从约0.5％至约30％，特别是从约1％至约20％、从约3％至约10％，如从约3％至约5％、从约8％至约12％或从约10％至约12％。阳离子表面活性剂的非限制性实例包括烷基二甲基乙醇季胺(ADMEAQ)、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、二甲基二硬脂酰氯化铵(DSDMAC)、以及烷基苄基二甲基铵、烷基季铵化合物、烷氧基化季铵(AQA)化合物、酯季铵及其组合。

　　助洗剂和共助洗剂

　　该洗涤剂组合物可包含按重量计约0-65％，例如约5％至约50％的洗涤剂助洗剂或共助洗剂、或其混合物。在洗涤餐具洗涤剂中，助洗剂的水平典型地是40％-65％，特别是50％-65％。助洗剂和/或共助洗剂可以具体是形成具有Ca和Mg的水溶性复合物的螫合剂。可利用本领域中已知的用于在衣物洗涤剂中使用的任何助洗剂和/或共助洗剂。助洗剂的非限制性实例包括沸石、二磷酸盐(焦磷酸盐)、三磷酸盐例如三磷酸钠(STP或STPP)、碳酸盐例如碳酸钠、可溶性硅酸盐例如硅酸钠、层状硅酸盐(例如来自赫斯特公司(Hoechst)的SKS-6)、乙醇胺例如2-氨基乙-1-醇(MEA)、二乙醇胺(DEA，也称为2,2’-亚氨基二乙-1-醇)、三乙醇胺(TEA，也称为2,2’,2”-次氮基三乙-1-醇)、以及羧甲基菊粉(CMI)、及其组合。

　　该洗涤剂组合物可包括按重量计0-65％的洗涤剂助洗剂或共助洗剂、或其混合物。在洗涤餐具洗涤剂中，助洗剂的水平典型地是40％-65％，特别是50％-65％。助洗剂和/或共助洗剂可以具体是形成具有Ca和Mg的水溶性复合物的螫合剂。可以利用本领域中已知的用于在衣物洗涤剂中使用的任何助洗剂和/或共助洗剂。助洗剂的非限制性实例包括沸石、二磷酸盐(焦磷酸盐)、三磷酸盐例如三磷酸钠(STP或STPP)、碳酸盐例如碳酸钠、可溶性硅酸盐例如偏硅酸钠、层状硅酸盐(例如来自赫斯特公司的SKS-6)、乙醇胺例如2-氨基乙-1-醇(MEA)、亚氨基二乙醇(DEA)和2,2',2”-次氮基三乙醇(TEA)、以及羧甲基菊粉(CMI)、及其组合。

　　该洗涤剂组合物还可包含按重量计0-50％，例如约5％至约30％的洗涤剂共助洗剂。该洗涤剂组合物可以单独地包括一种共助洗剂，或与一种助洗剂，例如沸石助洗剂组合。共助洗剂的非限制性实例包括聚丙烯酸酯的均聚物或其共聚物，例如聚(丙烯酸)(PAA)或共聚(丙烯酸/马来酸)(PAA/PMA)。另外的非限制性实例包括柠檬酸盐，螯合剂，例如氨基羧酸盐、氨基多羧酸盐和膦酸盐，以及烷基-或烯基琥珀酸。另外的具体实例包括2,2’,2”-次氨基三乙酸(NTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、亚氨基二丁二酸(IDS)、乙二胺-N,N’-二丁二酸(EDDS)、甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)、谷氨酸-N,N-二乙酸(GLDA)、1-羟基乙烷-1,1-二膦酸(HEDP)、乙二胺四(亚甲基膦酸)(EDTMPA)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTMPA或DTPMPA)、N-(2-羟乙基)亚氨基二乙酸(EDG)、天冬氨酸-N-单乙酸(ASMA)、天冬氨酸-N,N-二乙酸(ASDA)、天冬氨酸-N-单丙酸(ASMP)、亚氨基二丁二酸(iminodisuccinic%20acid)(IDA)、N-(2-磺甲基)-天冬氨酸(SMAS)、N-(2-磺乙基)-天冬氨酸(SEAS)、N-(2-磺甲基)-谷氨酸(SMGL)、N-(2-磺乙基)-谷氨酸(SEGL)、N-甲基亚氨基二乙酸(MIDA)、α-丙氨酸-N,N-二乙酸(α-ALDA)、丝氨酸-N,N-二乙酸(SEDA)、异丝氨酸-N,N-二乙酸(ISDA)、苯丙氨酸-N,N-二乙酸(PHDA)、邻氨基苯甲酸-N,N-二乙酸(ANDA)、磺胺酸-N,N-二乙酸(SLDA)、牛磺酸-N,N-二乙酸(TUDA)以及磺甲基-N,N-二乙酸(SMDA)、N-(2-羟乙基)-亚乙基二胺-N,N’,N’-三乙酸盐(HEDTA)、二乙醇甘氨酸(DEG)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTPMP)、氨基三(亚甲基膦酸)(ATMP)及其组合和盐。其他示例性助洗剂和/或共助洗剂描述于例如WO%2009/102854、US%205977053中

　　漂白系统

　　该洗涤剂组合物可包含按重量计0-50％的漂白系统。可以利用本领域中已知的用于在衣物洗涤剂中使用的任何漂白系统。适合的漂白系统组分包括漂白催化剂、光漂白剂、漂白活化剂、过氧化氢源如过碳酸钠和过硼酸钠、预制的过酸和其混合物。适合的预成型过酸包括，但不限于：过氧羧酸及盐，过碳酸及盐，过白啶酸(perimidic%20acid)及盐，过氧单硫酸及盐(例如过硫酸氢钾(Oxone(R))，及其混合物。漂白系统的非限制性实例包括基于过氧化物的漂白系统，该系统可以包括例如一种与过酸形成漂白活化剂组合的无机盐，包括碱金属盐，例如过硼酸盐(通常是单水合物或四水合物)、过碳酸盐、过硫酸盐、过磷酸盐、过硅酸盐的钠盐。漂白活化剂在此意指一种与过氧化物漂白剂(像过氧化氢)反应以形成过酸的化合物。以此方式形成的过酸构成活化的漂白剂。有待于在此使用的适合的漂白活化剂包括属于酯酰胺类、酰亚胺类或酐类的那些，适合的实例是四乙酰乙二胺(TAED)、3,5,5-三甲基己酰氧基苯磺酸钠、二过氧十二烷酸、4-(十二烷酰氧基)苯磺酸盐(LOBS)、4-(癸酰氧基)苯磺酸盐、4-(癸酰氧基)苯甲酸盐(DOBS)、4-(3,5,5-三甲基己酰氧基)苯磺酸盐(ISONOBS)、四乙酰乙二胺(TAED)和4-(壬酰氧基)苯磺酸盐(NOBS)和/或WO%2098/17767中披露的那些。感兴趣的漂白活化剂的具体家族披露于EP%20624154中并且在那个家族中特别优选的是乙酰柠檬酸三乙酯(ATC)。ATC或短链甘油三酸酯(像特雷森(Triacin))具有以下优点，它是环境友好的，因为它最终降解为柠檬酸和醇。此外，乙酰柠檬酸三乙酯和三乙酸甘油酯在存储时在产品中具有良好的水解稳定性，并且它是一种有效的漂白活化剂。最后，ATC为洗衣添加剂提供一种良好的助洗能力。可替代地，漂白系统可以包括例如酰胺、酰亚胺、或砜型的过氧酸。漂白系统还可以包括过酸，如6-(邻苯二甲酰基氨基)过己酸(PAP)。漂白系统还可以包括一种漂白催化剂。

　　聚合物

　　该洗涤剂可包括按重量计0-10％，例如0.5％-5％、2％-5％、0.5％-2％或0.2％-1％的一种聚合物。可以利用本领域中已知的用于在洗涤剂中使用的任何聚合物。聚合物可以作为如以上提到的共助洗剂起作用，或可以提供抗再沉积、纤维保护、污物释放、染料转移抑制、油污清洁和/或防沫特性。一些聚合物可以具有多于一种的以上提到的特性和/或多于一种的以下提到的基序(motif)。示例性聚合物包括(羧甲基)纤维素(CMC)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚(乙烯吡咯烷酮)(PVP)、聚(乙二醇)或聚(环氧乙烷)(PEG)、乙氧基化的聚(亚乙基亚胺)、羧甲基菊粉(CMI)、和聚羧化物，例如PAA、PAA/PMA、聚-天冬氨酸、和甲基丙烯酸月桂酯/丙烯酸共聚物、疏水改性CMC(HM-CMC)和硅酮、对苯二甲酸和低聚乙二醇的共聚物、聚(对苯二甲酸乙二酯)和聚(氧乙烯对苯二甲酸乙二酯)的共聚物(PET-POET)、PVP、聚(乙烯基咪唑)(PVI)、聚(乙烯吡啶-N-氧化物)(PVPO或PVPNO)以及聚乙烯吡咯烷酮-乙烯基咪唑(PVPVI)。另外的示例性聚合物包括磺化的聚羧酸酯、聚环氧乙烷和聚环氧丙烷(PEO-PPO)以及乙氧基磺酸二季铵盐。其他示例性聚合物披露于例如WO2006/130575中。也考虑了以上提到的聚合物的盐。

　　织物调色剂

　　本发明的洗涤剂组合物还可包括织物调色剂，例如染料或色素，当配制在洗涤剂组合物中时，当所述织物与一种洗液接触时织物调色剂可以沉积在织物上，该洗液包括所述洗涤剂组合物，并且因此通过可见光的吸收/反射改变所述织物的色彩。荧光增白剂发射至少一些可见光。相比之下，因为它们吸收至少一部分可见光光谱，所以织物调色剂改变表面的色彩。适合的织物调色剂包括染料和染料-黏土轭合物，并且还可以包括颜料。适合的染料包括小分子染料和聚合物染料。适合的小分子染料包括选自下组的小分子染料，该组由落入颜色索引(Colour%20Index)(C.I.)分类的以下染料组成：直接蓝、直接红、直接紫、酸性蓝、酸性红、酸性紫、碱性蓝、碱性紫和碱性红、或其混合物，例如描述于WO%202005/03274、WO2005/03275、WO%202005/03276和EP%201876226中(将其通过引用结合在此)。洗涤剂组合物优选包括从约0.00003wt％至约0.2wt％、从约0.00008wt％至约0.05wt％、或甚至从约0.0001wt％至约0.04wt％的织物调色剂。该组合物可以包括从0.0001wt％至0.2wt％的织物调色剂，当该组合物处于单位剂量袋的形式时，这可以是尤其优选的。适合的调色剂还披露于例如WO2007/087257和WO%202007/087243中。

　　洗涤剂组合物的其他本领域中所有熟知的成分包括助水溶物，织物调色剂，消泡剂，去污聚合物，抗再沉积剂，等。

　　洗涤剂添加剂连同洗涤剂组合物可包括一种或多种另外的酶，如蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、碳水化物酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶、氧化酶(例如，漆酶)和/或过氧化物酶。

　　可将本发明的多肽以对应于以下各项的量添加至洗涤剂组合物中：每升洗涤液至少1mg的DNA酶蛋白，例如至少5mg的蛋白、优选至少10mg的蛋白、更优选至少15mg的蛋白、甚至更优选至少20mg的蛋白、最优选至少30mg的蛋白,并且甚至最优选至少40mg的蛋白。因此，该洗涤剂组合物可以包括至少0.1％DNA酶蛋白，优选至少0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.8％、1.0％、1.2％、1.5％或2.0％的DNA酶蛋白。

　　可将包括DNA酶的用于在本发明的方法中使用的组合物配制为液体(例如水性)、固体、凝胶、膏或干产品配制品。干产品配制品随后可以被重新水化，以形成在本发明的方法中可用的活性液体或半液体配制品。

　　本发明的组合物可进一步包括助剂，例如润湿剂、增稠剂、用于pH控制的一种或多种缓冲液、稳定剂、香料、着色剂、填充物等。

　　有用的润湿剂是表面活性剂，即非离子、阴离子、两性或兼性离子表面活性剂。上文进一步描述了表面活性剂。

　　酶

　　洗涤剂添加剂连同洗涤剂组合物可包括一种或多种另外的酶，例如蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、碳水化物分解酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶、氧化酶，例如漆酶、和/或过氧化物酶。

　　一般而言，一种或多种所选酶的性质应与选定的洗涤剂相容(即，最优pH，与其他酶和非酶成分的相容性，等等)，并且该一种或多种酶应以有效量存在。

　　纤维素酶

　　适合的纤维素酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的或蛋白质工程化的突变体。适合的纤维素酶包括来自芽孢杆菌属、假单胞菌属、腐质霉属、镰刀菌属、梭孢壳属、枝顶孢霉属的纤维素酶，例如，从在US4,435,307、US%205,648,263、US%205,691,178、US%205,776,757以及WO%2089/09259中披露的特异腐质霉、嗜热毁丝霉和尖镰孢产生的真菌纤维素酶。

　　特别适合的纤维素酶是具有颜色护理益处的碱性或中性纤维素酶。此类纤维素酶的实例是描述于EP%200%20495%20257、EP%200%20531%20372、WO%2096/11262、WO%2096/29397、WO%2098/08940中的纤维素酶。其他实例是例如描述于WO94/07998、EP%200%20531%20315、US%205,457,046、US%205,686,593、US%205,763,254、WO95/24471、WO%2098/12307以及WO%2099/001544中的那些纤维素酶变体。

　　其他纤维素酶是具有与WO%202002/099091的SEQ%20ID%20NO:2的位置1至位置773的氨基酸序列具有至少97％一致性的序列的内切-β-1,4-葡聚糖酶或一种家族44木葡聚糖酶，该木葡聚糖酶是一种具有与WO%202001/062903的SEQ%20ID%20NO:2的位置40-559具有至少60％一致性的序列的木葡聚糖酶。

　　可商购的纤维素酶包括CelluzymeTM和CarezymeTM(诺维信公司(Novozymes%20A/S))、Carezyme%20PremiumTM(诺维信公司)、CellucleanTM(诺维信公司)、CellucleanClassicTM(诺维信公司)、CellusoftTM(诺维信公司)、WhitezymeTM(诺维信公司)、ClazinaseTM和Puradax%20HATM(杰能科国际公司(Genencor%20International%20Inc.))以及KAC-500(B)TM(花王株式会社(Kao%20Corporation))。

　　蛋白酶

　　适合的蛋白酶包括细菌、真菌、植物、病毒或动物来源的那些，例如植物或微生物来源。优选微生物来源。包括化学修饰的或蛋白质工程化的突变体。它可以是一种碱性蛋白酶，例如丝氨酸蛋白酶或金属蛋白酶。丝氨酸蛋白酶可以例如是S1家族(如胰蛋白酶)或S8家族(如枯草杆菌蛋白酶)。金属蛋白酶可以例如是来自例如家族M4的嗜热菌蛋白酶或其他金属蛋白酶，例如来自M5、M7或M8家族的那些。

　　术语“枯草杆菌酶”是指根据斯艾森(Siezen)等，蛋白质工程学(Protein%20Engng.)4(1991)719-737和斯艾森等，蛋白质科学(Protein%20Science)6(1997)501-523的丝氨酸蛋白酶亚组。丝氨酸蛋白酶是特征为在活性位点具有与底物形成共价加合物的丝氨酸的蛋白酶的一个亚类。枯草杆菌酶可以划分为6个亚部，即，枯草杆菌蛋白酶家族、嗜热蛋白酶(Thermitase)家族、蛋白酶K家族、羊毛硫抗生素肽酶家族、Kexin家族和Pyrolysin家族。

　　枯草杆菌酶的实例是来源于芽孢杆菌属的那些，例如描述于US%207262042和WO%2009/021867中的迟缓芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和吉氏芽孢杆菌；和描述于WO%2089/06279中的枯草杆菌蛋白酶lentus、枯草杆菌蛋白酶Novo、枯草杆菌蛋白酶Carlsberg、地衣芽孢杆菌、枯草杆菌蛋白酶BPN’、枯草杆菌蛋白酶309、枯草杆菌蛋白酶147和枯草杆菌蛋白酶168以及描述于(WO%2093/18140)中的蛋白酶PD138。其他有用的蛋白酶可以是描述于WO%2092/175177、WO%2001/016285、WO02/026024以及WO02/016547中的那些。胰蛋白酶样蛋白酶的实例是胰蛋白酶(例如猪或牛来源的)和镰刀菌蛋白酶(描述于WO%2089/06270、WO94/25583和WO%2005/040372中)，以及衍生自纤维单胞菌(Cellumonas)的胰凝乳蛋白酶(描述于WO%2005/052161和WO%2005/052146中)。

　　进一步优选的蛋白酶是来自迟缓芽孢杆菌DSM%205483的碱性蛋白酶(如在例如WO95/23221中所述)、及其变体(在WO%2092/21760、WO95/23221、EP%201921147以及EP%201921148中描述的)。

　　金属蛋白酶的实例是如描述于WO%2007/044993(杰能科国际公司(Genencor%20Int.))中的中性金属蛋白酶，例如衍生自解淀粉芽孢杆菌的那些。

　　有用的蛋白酶的实例是于以下各项中的变体：WO%2092/19729、WO96/034946、WO%2098/20115、WO%2098/20116、WO%2099/011768、WO%2001/44452、WO%2003/006602、WO%2004/03186、WO%2004/041979、WO%2007/006305、WO11/036263、WO%2011/036264，尤其是在以下位置的一个或多个中具有取代的变体：3、4、9、15、27、36、57、68、76、87、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、106、118、120、123、128、129、130、160、167、170、194、195、199、205、206、217、218、222、224、232、235、236、245、248、252以及274，使用BPN’编号。更优选地，这些枯草杆菌酶变体可以包含以下突变：S3T、V4I、S9R、A15T、K27R、*36D、V68A、N76D、N87S,R、*97E、A98S、S99G,D,A、S99AD、S101G,M,R%20S103A、V104I,Y,N、S106A、G118V,R、H120D,N、N123S、S128L、P129Q、S130A、G160D、Y167A、R170S、A194P、G195E、V199M、V205I、L217D、N218D、M222S、A232V、K235L、Q236H、Q245R、N252K、T274A(使用BPN’编号)。

　　适合的可商购蛋白酶包括以下列商品名出售的那些：DuralaseTm、DurazymTm、Ultra、Ultra、Ultra、Ultra、以及(诺维信公司)，以下列商品名出售的那些：PurafectPreferenzTm、PurafectPurafectPurafectEffectenzTm、以及(丹尼斯克/杜邦公司(Danisco/DuPont))、AxapemTM(吉斯特布罗卡德斯公司(Gist-BrocasesN.V.))、BLAP(序列示于US 5352604的图29中)及其变体(汉高股份(Henkel AG))以及来自花王株式会社(Kao)的KAP(嗜碱芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶)。

　　脂肪酶和角质酶：

　　适合的脂肪酶和角质酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的或蛋白工程化的突变体酶。实例包括来自嗜热真菌属的脂肪酶，例如如描述于EP 258068和EP 305216中的来自疏绵状嗜热丝孢菌(早先命名为疏棉状腐质霉)；来自腐质霉属的角质酶，例如特异腐质霉(WO 96/13580)；来自假单胞菌属的菌株的脂肪酶(这些中的一些现在改名为伯克霍尔氏菌属)，例如产碱假单胞菌或类产碱假单胞菌(EP 218272)、洋葱假单胞菌(EP331376)、假单胞菌属菌株SD705(WO 95/06720&WO96/27002)、P.wisconsinensis(WO 96/12012)；GDSL-型链霉菌属脂肪酶(WO 10/065455)；来自稻瘟病菌的角质酶(WO 10/107560)；来自门多萨假单胞菌的角质酶(US 5,389,536)；来自褐色嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)的脂肪酶(WO 11/084412)；嗜热脂肪土芽孢杆菌脂肪酶(WO 11/084417)；来自枯草芽孢杆菌的脂肪酶(WO11/084599)；以及来自灰色链霉菌(WO 11/150157)和始旋链霉菌(S.pristinaespiralis)的脂肪酶(WO 12/137147)。

　　其他实例是脂肪酶变体，例如描述于EP 407225、WO 92/05249、WO94/01541、WO94/25578、WO 95/14783、WO 95/30744、WO 95/35381、WO 95/22615、WO 96/00292、WO 97/04079、WO 97/07202、WO00/34450、WO 00/60063、WO 01/92502、WO 07/87508以及WO 09/109500中的那些。

　　优选的商业化脂肪酶产品包括LipolaseTM、LipexTM；LipolexTM和LipocleanTM(诺维信公司)，Lumafast(来自杰能科公司(Genencor))以及Lipomax(来自吉斯特布罗卡德斯公司(Gist-Brocades))。

　　再其他实例是有时称为酰基转移酶或过水解酶的脂肪酶，例如与南极假丝酵母(Candida antarctica)脂肪酶A具有同源性的酰基转移酶(WO 10/111143)、来自耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)的酰基转移酶(WO 05/56782)、来自CE 7家族的过水解酶(WO 09/67279)以及耻垢分枝杆菌过水解酶的变体(特别是来自亨斯迈纺织品染化有限公司(Huntsman Textile Effects Pte Ltd)的商业产品Gentle Power Bleach中所用的S54V变体)(WO 10/100028)。

　　淀粉酶：

　　可以与DNA酶一起使用的适合的淀粉酶可以是α-淀粉酶或葡糖淀粉酶并且可以是细菌或真菌来源的。包括化学修饰的或蛋白质工程化的突变体。淀粉酶包括例如获得自芽孢杆菌属的α-淀粉酶，例如GB 1,296,839中更详细描述的地衣芽孢杆菌具体株系的α-淀粉酶。

　　适合的淀粉酶包括具有WO 95/10603中的SEQ ID NO:2的淀粉酶或其与SEQ IDNO:3具有90％序列一致性的变体。优选的变体描述于WO94/02597、WO 94/18314、WO 97/43424以及WO 99/019467的SEQ ID NO:4中，例如在一个或多个以下位置中具有取代的变体：15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408以及444。

　　不同的适合的淀粉酶包括具有WO 02/010355中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或其与SEQ ID NO:6具有90％序列一致性的变体。SEQ ID NO:6的优选变体是在位置181和182中具有一个缺失并且在位置193中具有一个取代的那些。

　　其他适合的淀粉酶是包括示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的来源于解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:4中的地衣芽孢杆菌α-淀粉酶的残基36-483的杂合α-淀粉酶或其具有90％序列一致性的变体。这一杂合α-淀粉酶的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：G48、T49、G107、H156、A181、N190、M197、I201、A209以及Q264。包括示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的来源于解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和SEQ ID NO:4的残基36-483的杂合α-淀粉酶的最优选变体是具有以下取代的那些：

　　M197T；

　　H156Y+A181T+N190F+A209V+Q264S；或

　　G48A+T49I+G107A+H156Y+A181T+N190F+I201F+A209V+Q264S。

　　适合的另外的淀粉酶是具有WO 99/019467中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或其与SEQID NO:6具有90％序列一致性的变体。SEQ ID NO:6的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：R181、G182、H183、G184、N195、I206、E212、E216以及K269。特别优选的淀粉酶是在位置R181和G182或位置H183和G184中具有缺失的那些。

　　可使用的另外的淀粉酶是具有WO 96/023873的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQID NO:2或SEQ ID NO:7的那些或其与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ IDNO:7具有90％序列一致性的变体。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:7的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：140、181、182、183、184、195、206、212、243、260、269、304以及476，使用WO96/023873的SEQ ID 2编号。更优选的变体是在选自181、182、183以及184的两个位置中具有缺失的那些，例如181和182、182和183或位置183和184。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7的最优选的淀粉酶变体是在位置183和184中具有缺失并且在位置140、195、206、243、260、304以及476的一个或多个中具有取代的那些。

　　可使用的其他淀粉酶是具有WO 08/153815中的SEQ ID NO:2、WO01/66712中的SEQID NO:10的淀粉酶或其与WO 08/153815的SEQ ID NO:2具有90％序列一致性或与WO 01/66712中的SEQ ID NO:10具有90％序列一致性的变体。WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：176、177、178、179、190、201、207、211以及264。

　　另外的适合的淀粉酶是具有WO 09/061380中的SEQ ID NO:2的淀粉酶或其与SEQID NO:2具有90％序列一致性的变体。SEQ ID NO:2的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有C-末端的截短和/或取代、缺失或插入的那些：Q87、Q98、S125、N128、T131、T165、K178、R180、S181、T182、G183、M201、F202、N225、S243、N272、N282、Y305、R309、D319、Q320、Q359、K444以及G475。SEQ ID NO:2的更优选变体是在以下位置的一个或多个中具有取代的那些：Q87E,R、Q98R、S125A、N128C、T131I、T165I、K178L、T182G、M201L、F202Y、N225E,R、N272E,R、S243Q,A,E,D、Y305R、R309A、Q320R、Q359E、K444E以及G475K和/或位置R180和/或S181或T182和/或G183的缺失。SEQ ID NO:2的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些：

　　N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K；

　　N128C+K178L+T182G+F202Y+Y305R+D319T+G475K；

　　S125A+N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K；或

　　S125A+N128C+T131I+T165I+K178L+T182G+Y305R+G475K，其中这些变体是C-末端截短的并且任选地进一步在位置243处包括取代和/或在位置180和/或位置181处包括缺失。

　　其他适合的淀粉酶是具有WO 01/66712中的SEQ ID NO:12的α-淀粉酶或与SEQ IDNO:12具有至少90％序列一致性的变体。优选的淀粉酶变体是在WO 01/66712中的SEQ IDNO:12的以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：R28，R118，N174；R181，G182，D183，G184，G186，W189，N195，M202，Y298，N299，K302，S303，N306，R310，N314；R320，H324，E345，Y396，R400，W439，R444，N445，K446，Q449，R458，N471，N484。特别优选的淀粉酶包括具有D183和G184的缺失并且具有R118K、N195F、R320K及R458K的取代的变体，以及另外在选自下组的一个或多个位置中具有取代的变体：M9、G149、G182、G186、M202、T257、Y295、N299、M323、E345以及A339，最优选的是另外在所有这些位置中具有取代的变体。

　　其他实例是例如描述于WO 2011/098531、WO 2013/001078及WO2013/001087中的那些淀粉酶变体。

　　可商购的淀粉酶是DuramylTM、TermamylTM、FungamylTM、Stainzyme TM、StainzymePlusTM、NatalaseTM、Liquozyme X及BANTM(来自诺维信公司)，以及RapidaseTM、PurastarTM/EffectenzTM、Powerase及Preferenz S100(来自来自杰能科国际公司/杜邦(GenencorInternational Inc./DuPont))。

　　过氧化物酶/氧化酶

　　适合的过氧化物酶/氧化酶包括植物、细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的或蛋白质工程化的突变体。有用的过氧化物酶的实例包括来自鬼伞属，例如来自灰盖鬼伞的过氧化物酶，以及其变体，如在WO 93/24618、WO 95/10602、以及WO 98/15257中描述的那些。

　　可商购获得的过氧化物酶包括GuardzymeTM(诺维信公司)。

　　该一种或多种洗涤剂酶可以通过添加包括一种或多种酶的独立添加剂，或通过添加包括所有这些酶的组合添加剂而被包括于洗涤剂组合物中。本发明的洗涤剂添加剂，即独立添加剂或组合添加剂，可以被配制为，例如颗粒、液体、浆料等。优选的洗涤剂添加剂配制品是颗粒，特别是无尘颗粒；液体，特别是稳定化的液体；或浆料。

　　无尘颗粒可以例如如在US 4,106,991和4,661,452中所披露而产生，并且可以任选地通过本领域已知的方法进行包衣。蜡状包衣材料的实例为具有1000至20000的平均摩尔量的聚(环氧乙烷)产品(聚乙二醇，PEG)；具有从16至50个环氧乙烷单位的乙氧化壬基苯酚；乙氧化脂肪醇，其中该醇含有12至20个碳原子，并且其中具有15至80个环氧乙烷单位；脂肪醇；脂肪酸；以及脂肪酸的甘油单酯、和甘油二酯、以及甘油三酯。适用于通过流化床技术应用的成膜包衣材料的实例在GB 1483591中给出。液体酶制剂可以例如通过根据已确立的方法添加多元醇(如丙二醇)、糖或糖醇、乳酸或硼酸而稳定化。受保护的酶可根据EP238,216中披露的方法制备。

　　洗涤剂产品的配制品

　　本发明的洗涤剂组合物可处于任何常规形式，例如棒、均匀的片剂、具有两个或更多个层的片剂、具有一个或多个室的袋、规则的或压缩的粉、颗粒、膏、凝胶、或规则压缩的或浓缩的液体。

　　袋可以被配置为单个或多个的室。它可具有适合容持该组合物的任何形式、形状和材料，例如在与水接触之前，不允许该组合物从袋中释放出来。袋由封装内体积的水溶性膜制成。可以将所述内体积分为袋的隔室。优选的膜是形成膜或片的聚合材料，优选是聚合物。优选的聚合物、共聚物或其衍生物选自聚丙烯酸酯、和水溶性丙烯酸酯共聚物、甲基纤维素、羧甲基纤维素、糊精钠、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、麦芽糊精、聚甲基丙烯酸酯，最优选地是聚乙烯醇共聚物以及羟丙基甲基纤维素(HPMC)。优选地，在膜中的聚合物(例如PVA)的水平是至少约60％。优选的平均分子量将典型地是约20,000至约150,000。膜还可以是共混组合物，该共混组合物包括可水解降解并且水可溶的聚合物共混物，例如聚乳酸和聚乙烯醇(已知在贸易参考M8630下，如由美国印第安纳州的MonoSol有限责任公司销售)加增塑剂，像甘油、乙二醇、丙二醇、山梨醇及其混合物。这些袋可以包括固体衣物清洁组合物或部分组分和/或液体清洁组合物或由水溶性膜分开的部分组分。用于液体组分的室在组成上可与包括固体的室不同：US 2009/0011970 A1。

　　可由水可溶的袋中或片剂的不同层中的室来将洗涤剂成分物理地彼此分开。由此可以避免组分之间的负面的存储相互作用。在洗涤溶液中，每个室的不同溶解曲线还可引起选择的组分的延迟溶解。

　　不按单位配量的液体或凝胶洗涤剂可以是水性的，典型地含有按重量计至少20％和高达95％的水，如高达大约70％的水，高达大约65％的水，高达大约55％的水，高达大约45％的水，高达大约35％的水。包括但不限于链烷醇、胺、二醇、醚以及多元醇的其他类型的液体可以被包括在水性液体或凝胶中。水性液体或凝胶洗涤剂可以包括从0％-30％的有机溶剂。

　　液体或凝胶洗涤剂可以是非水性的。

　　方法和用途

　　在第一方面中，本发明提供了一种洗涤剂组合物，该洗涤剂组合物包括一种表面活性剂、一种洗涤剂助洗剂和一种DNA酶，该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸1至110或SEQID NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少80％一致性，优选至少90％一致性，更优选至少95％一致性，并且最优选100％一致性；其中该洗涤剂组合物能够减少选自下组的细菌粘附至表面，该组由以下各项组成：不动杆菌属、气微菌属、短波单胞菌属、微杆菌属、滕黄微球菌、假单胞菌属、表皮葡萄球菌以及寡养单胞菌属，或能够使细菌从它们粘附至其上的表面释放。

　　在一个实施例中，该洗涤剂组合物还包括一种表面活性剂；并且任选地还包括一种洗涤剂助洗剂或共助洗剂。优选地，该表面是纺织品表面并且该水性组合物是一种衣物洗涤剂组合物。该纺织品表面可以是任何纺织品的表面，如由棉或合成材料制成的物品，例如一件运动服、一个T恤或当使用时暴露于汗液的另一件衣服。该纺织品表面还可以是被褥、床单或毛巾的表面。

　　在一个实施例中，该洗涤剂组合物不包含有效量的漂白系统。

　　在一个实施例中，该洗涤剂组合物能够减少来自湿的衣物的恶臭，该衣物已经在10℃-40℃(优选10℃-35℃或10℃-30℃)下洗涤。

　　在一个实施例中，该洗涤剂组合物能够减少来自湿的衣物的恶臭，该衣物已经在10℃-40℃(优选10℃-35℃或10℃-30℃)下洗涤并在20℃下孵育12小时。

　　在另一个方面中，本发明提供了一种用于减少选自下组的细菌粘附至表面或使细菌从它们粘附至其上的表面释放的方法，该组由以下各项组成：不动杆菌属、气微菌属、短波单胞菌属、微杆菌属、滕黄微球菌、假单胞菌属、表皮葡萄球菌、寡养单胞菌属，该方法包括使该细菌与一种水性组合物接触，该水性组合物包括一种DNA酶，该DNA酶与如SEQ IDNO:1的氨基酸27至136或SEQ ID NO:2的氨基酸34至142所示的氨基酸序列具有至少80％一致性，优选至少90％一致性，更优选至少95％一致性，并且最优选100％一致性。

　　优选地，该水性组合物包括至少1mg/l的DNA酶。

　　在一个实施例中，该水性组合物还包括一种表面活性剂；并且任选地还包括一种洗涤剂助洗剂或共助洗剂。优选地，该表面是纺织品表面并且该水性组合物是一种衣物洗涤剂组合物。该纺织品表面可以是任何纺织品的表面，如由棉或合成材料制成的物品，例如一件运动服、一个T恤或当使用时暴露于汗液的另一件衣服。该纺织品表面还可以是被褥、床单或毛巾的表面。

　　在一个实施例中，细菌粘附被减少至少50％，或至少50％的细菌被从该表面释放。

　　在一个实施例中，该方法能够减少来自湿的衣物的恶臭，该衣物已经在10℃-40℃(优选10℃-35℃或10℃-30℃)下洗涤并在20℃孵育12小时。

　　在另一个方面中，本发明提供了一种(衣物)组合物，该组合物包括水；纺织品；选自下组的细菌，该组由以下各项组成：不动杆菌属、气微菌属、短波单胞菌属、微杆菌属、滕黄微球菌、假单胞菌属、表皮葡萄球菌、寡养单胞菌属；以及一种DNA酶。优选地，该组合物包括至少1mg/l的DNA酶，如上所述。该纺织品可以是由棉或合成材料制成的物品，例如一件运动服、一个T恤或当使用时暴露于汗液的另一件衣服。该纺织品还可以是被褥、床单或毛巾。

　　本发明还提供了以上方法和组合物用于减少选自下组的细菌粘附至表面或使细菌从它们粘附至其上的表面释放的用途，该组由以下各项组成：不动杆菌属、气微菌属、短波单胞菌属、微杆菌属、滕黄微球菌、假单胞菌属、表皮葡萄球菌、寡养单胞菌属。

　　本发明还提供了以上方法和组合物用于减少来自以下衣物的恶臭或用于减少来自以下衣服的恶臭的用途，该衣物已经在10℃-40℃(优选10℃-35℃或10℃-30℃)下洗涤并且随后在20℃下孵育12小时；这些衣服在正常使用过程中已经暴露于直接身体接触，在10℃-40℃(优选10℃-35℃或10℃-30℃)下洗涤并且随后在正常使用过程中再次暴露于直接身体接触(优选持续至少10小时)。

　　根据本发明的方法可以在以下温度下进行：5与70摄氏度之间，优选10与60摄氏度之间，更优选10与50摄氏度之间，甚至更优选10与40摄氏度之间，甚至更优选10与35摄氏度之间，最优选10与30摄氏度之间，并且特别是15与30摄氏度之间。

　　本发明的方法可以采用以下处理时间：从10分钟至120分钟，优选从10分钟至90分钟，更优选从10分钟至60分钟，更优选从15分钟至45分钟，并且最优选从15分钟至30分钟。

　　本发明的方法可以在pH 3至pH 11下，优选在pH 5至pH 10下，更优选在pH 7至pH9下进行。最优选地，本发明的方法在DNA酶+/-一个pH单位的最适pH或温度下进行。

　　在以下各段中概述本发明：

　　1.一种洗涤剂组合物，包括

　　a.一种或多种阴离子表面活性剂；

　　c.一种脱氧核糖核酸酶(DNA酶)。

　　2.根据段落1所述的组合物，其中该阴离子表面活性剂选自下组，该组由以下各项组成：直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)(如十二烷基硫酸钠(SDS))、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES)、仲链烷磺酸盐(SAS)、石蜡烃磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)、甲酯磺酸盐(MES)、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸或皂的二酯和单酯。

　　3.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中阴离子表面活性剂的量在1％至40％的范围内、在5％至30％的范围内或在10％至20％的范围内。

　　4.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中洗涤剂助洗剂或共助洗剂的量在0％至65％的范围内、在40％-65％的范围内或在40％至65％的范围内。

　　5.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中该组合物包括10-40w/w％的表面活性剂、4-50w/w％的助洗剂和0-5w/w％的聚合物，以及任选地填充剂、溶剂和酶稳定剂。

　　6.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中该DNA酶可获得自一种细菌。

　　7.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中该DNA酶可获得自芽孢杆菌属。

　　8.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸1至110或SEQ ID NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少80％一致性。

　　9.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸1至110或SEQ ID NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少85％一致性。

　　10.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸1至110或SEQ ID NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少90％一致性。

　　11.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸1至110或SEQ ID NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少95％一致性。

　　12.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸1至110或SEQ ID NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少97％一致性。

　　13.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸1至110或SEQ ID NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少98％一致性。

　　14.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸1至110或SEQ ID NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少99％一致性。

　　15.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中该洗涤剂组合物能够减少选自下组的细菌粘附至表面，该组由以下各项组成：不动杆菌属、气微菌属、短波单胞菌属、微杆菌属、滕黄微球菌、假单胞菌属、表皮葡萄球菌以及寡养单胞菌属，或能够使细菌从它们粘附至其上的表面释放。

　　16.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中该表面是纺织品表面。

　　17.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中该组合物能够减少来自湿的和/或干的衣物的恶臭。

　　18.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中该组合物能够减少来自湿的和/或干的衣物的E-2-壬烯醛。

　　19.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中该组合物是棒、均匀的片剂、具有两个或更多个层的片剂、具有一个或多个室的袋、规则的或压缩的粉末、颗粒、膏、凝胶、或规则的、压缩的或浓缩的液体。

　　20.根据以上段落中任一项所述的组合物，其中该组合物是一种液体洗涤剂、一种粉末洗涤剂或颗粒洗涤剂。

　　21.一种纺织品洗涤方法，包括：

　　a.将一种纺织品暴露于一种洗涤液，该洗涤液包括根据段落1-20中任一项所述的DNA酶或洗涤剂组合物，

　　b.完成至少一个洗涤循环；并且

　　c.任选地冲洗该纺织品。

　　22.根据段落21所述的方法，其中该洗涤液的pH在7至10的范围内，优选7至9，例如7.5。

　　23.根据以上方法段落中任一项所述的方法，其中该洗涤液的温度在5℃至95℃的范围内、或在10℃至80℃的范围内、或在10℃至70℃的范围内、或在10℃至60℃的范围内、或在10℃至50℃的范围内、或在15℃至40℃的范围内、或在20℃至30℃的范围内。

　　24.根据以上方法段落中任一项所述的方法，其中该洗涤液的温度是30℃。

　　25.根据以上方法段落中任一项所述的方法，其中在第一个并且任选地第二个和第三个洗涤循环过程中，将该纺织品暴露于洗涤液。

　　26.根据以上方法段落中任一项所述的方法，其中在暴露于该洗涤液后，冲洗该纺织品。

　　27.根据以上方法段落中任一项所述的方法，其中使用调节剂冲洗该纺织品。

　　28.根据以上方法段落中任一项所述的方法，其中该湿的和/或干的衣物纺织品的恶臭被减少。

　　29.根据以上方法段落中任一项所述的方法，其中湿的和/或干的衣物纺织品上的E-2-壬烯醛的量被减少。

　　30.根据以上方法段落中任一项所述的方法，其中该纺织品的白度被维持或改善。

　　31.根据以上方法段落中任一项所述的方法，其中污垢的再沉积被减少。

　　32.根据段落21-31中任一项所述的方法洗涤的纺织品。

　　33.一种脱氧核糖核酸酶(DNA酶)用于减少来自衣物和/或纺织品的恶臭的用途。

　　34.根据以上段落中任一项所述的DNA酶用于减少来自以下衣服的恶臭的用途，这些衣服在正常使用过程中已经暴露于直接身体接触，在10℃-40℃下洗涤，并且随后在正常使用过程中再次暴露于直接身体接触。

　　35.根据段落31所述的用于减少纺织品上的E-2-壬烯醛的量的用途。

　　36.根据以上用途段落中任一项所述的用途，其中存在于纺织品上的E-2-壬烯醛的量被减少至洗涤之前存在于该纺织品上的E-2-壬烯醛的量的低于80％。

　　37.根据以上用途段落中任一项所述的用途，其中存在于纺织品上的E-2-壬烯醛的量被减少至洗涤之前存在于该纺织品上的E-2-壬烯醛的量的低于70％、低于60％、低于50％、低于40％、低于30％、低于20％、低于10％或低于5％，或被减少。

　　38.DNA酶用于维持或改善纺织品的白度的用途。

　　39.DNA酶用于在一个洗涤循环过程中减少污垢的再沉积的用途。

　　40.根据以上用途段落中任一项所述的用途，其中该DNA酶可获得自一种细菌。

　　41.根据以上用途段落中任一项所述的用途，其中该DNA酶可获得自芽孢杆菌属。

　　42.根据以上用途段落中任一项所述的用途，其中该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸1至110或SEQ ID NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少80％一致性。

　　43.根据以上用途段落中任一项所述的用途，其中该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸1至110或SEQ ID NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少85％一致性。

　　44.根据以上用途段落中任一项所述的用途，其中该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸1至110或SEQ ID NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少90％一致性。

　　45.根据以上用途段落中任一项所述的用途，其中该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸1至110或SEQ ID NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少95％一致性。

　　46.根据以上用途段落中任一项所述的用途，其中该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸1至110或SEQ ID NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少97％一致性。

　　47.根据以上用途段落中任一项所述的用途，其中该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸1至110或SEQ ID NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少98％一致性。

　　48.根据以上用途段落中任一项所述的用途，其中该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸1至110或SEQ ID NO:2的氨基酸1至109所示的氨基酸序列具有至少99％一致性。

　　并且，还在以下段落中概述本发明：

　　1a.一种洗涤剂组合物，该洗涤剂组合物包括一种表面活性剂、一种洗涤剂助洗剂和一种DNA酶，该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸27至136或SEQ ID NO:2的氨基酸34至142所示的氨基酸序列具有至少80％一致性，优选至少90％一致性，更优选至少95％一致性，并且最优选100％一致性；其中该洗涤剂组合物能够减少选自下组的细菌粘附至表面，该组由以下各项组成：不动杆菌属、气微菌属、短波单胞菌属、微杆菌属、滕黄微球菌、假单胞菌属、表皮葡萄球菌以及寡养单胞菌属，或能够使细菌从它们粘附至其上的表面释放。

　　2a.如段落1a所述的组合物，该组合物是一种衣物洗涤剂组合物，并且其中该表面是纺织品表面。

　　3a.如段落1a或2a所述的组合物，该组合物能够减少来自湿的衣物的恶臭，该衣物已经在10℃-40℃下洗涤并且随后在20℃下孵育12小时。

　　4a.一种用于减少选自下组的细菌粘附至表面或使细菌从它们粘附至其上的表面释放的方法，该组由以下各项组成：不动杆菌属、气微菌属、短波单胞菌属、微杆菌属、滕黄微球菌、假单胞菌属、表皮葡萄球菌、寡养单胞菌属，该方法包括使该细菌与一种水性组合物接触，该水性组合物包括一种DNA酶，该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸27至136或SEQID NO:2的氨基酸34至142所示的氨基酸序列具有至少80％一致性，优选至少90％一致性，更优选至少95％一致性，并且最优选100％一致性。

　　5a.如段落4a所述的方法，其中该水性组合物还包括一种表面活性剂。

　　6a.如段落4a或5a所述的方法，其中该表面是纺织品表面并且该水性组合物是一种衣物洗涤剂组合物。

　　7a.如段落4a-6a中任一项所述的方法，其中该水性组合物的温度是10℃-40℃。

　　8a.如段落4a-7a中任一项所述的方法，该方法减少来自湿的衣物的恶臭，该衣物已经在10℃-40℃下洗涤并且随后在20℃下孵育12小时。

　　9a.如段落4a-8a中任一项所述的方法，其中粘附被减少至少50％，或至少50％的细菌被从该表面释放。

　　10a.一种水性组合物，包括水；表面活性剂；纺织品或餐具；选自下组的细菌，该组由以下各项组成：不动杆菌属、气微菌属、短波单胞菌属、微杆菌属、滕黄微球菌、假单胞菌属、表皮葡萄球菌以及寡养单胞菌属；以及一种DNA酶，该DNA酶与如SEQ ID NO:1的氨基酸27至136或SEQ ID NO:2的氨基酸34至142所示的氨基酸序列具有至少80％一致性，优选至少90％一致性，更优选至少95％一致性，并且最优选100％一致性。

　　11a.一种DNA酶用于减少选自下组的细菌粘附至表面或使细菌从它们粘附至其上的表面释放的用途，该组由以下各项组成：不动杆菌属、气微菌属、短波单胞菌属、微杆菌属、滕黄微球菌、假单胞菌属、表皮葡萄球菌以及寡养单胞菌属。

　　12a.一种DNA酶用于减少来自衣物的恶臭的用途，该衣物已经在10℃-40℃下洗涤并且随后在20℃下孵育12小时。

　　13a.一种DNA酶用于减少来自以下衣服的恶臭的用途，这些衣服在正常使用过程中已经暴露于直接身体接触，在10℃-40℃下洗涤，并且随后在正常使用过程中再次暴露于直接身体接触。

　　以下实例进一步描述本发明，这些实例不应当解释为限制本发明的范围。

　　实例

　　用作缓冲液和底物的化学品至少是试剂等级的商品。

　　在以下实例中使用的枯草芽孢杆菌DNA酶具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，并且地衣芽孢杆菌DNA酶具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。

　　测定I

　　DNA酶活性的确定-

　　基于国际生物化学与分子生物学联合会命名委员会(IUBMB)的建议，如在本发明中所定义的，DNA酶活性是脱氧核糖核酸酶能够降解脱氧核糖核酸(DNA)的活性，例如描述于EC 3.1.21.-或EC 3.1.22.-，优选EC3.1.21.-，并且最优选EC 3.1.21.1中的酶活性。

　　用于确定DNA酶活性的若干测定是可商购的，或已经描述于文献中，例如多伦(Tolun)和迈尔斯(Myers)“基于PicoGreen荧光的实时DNA酶测定(ReDA)(A real-timeDNase assay(ReDA)based on PicoGreen fluorescence)”，核酸研究(Nucleic AcidsResearch)(2003)，第31卷，第18期，e111；或西尼科罗派(Sinicropi)等“用DNA-甲基绿色底物比色确定DNA酶I活性(Colorimetric determination of DNA酶I activity with aDNA-methyl green substrate)”，分析生物化学(Analytical Biochemistry)(1994)，222(2)，第351-8页。

　　测定II

　　使用电子鼻分析纺织品上的E-2-壬烯醛

　　一种测试纺织品上的恶臭的存在的方式是通过使用作为恶臭的标志物的E-2-壬烯醛，因为此化合物引起衣物上的恶臭。

　　将E-2-壬烯醛的溶液添加至5cm x 5cm纺织品小块布样上并且将该小块布样放入20mL玻璃小瓶中用于GC分析并且盖住该小瓶。在40℃下孵育20分钟后，在来自法国阿尔法M.O.S.(Alpha M.O.S.)的Heracles II电子鼻中分析来自加帽小瓶的5mL顶部空间(具有2个FID的双柱气相层析仪，柱1：MXT5并且柱2：MXT1701)。

　　实例1

　　使用DNA酶减少衣物特定细菌的粘附

　　分离衣物特定细菌菌株

　　本研究的目的之一是研究分别在15℃、40℃和60℃下洗涤后衣物中的细菌多样性。

　　在从丹麦家庭收集的衣物上进行该研究。对于每种洗涤，使用范围为4:3:2:2:1:1:1的20g的衣物(茶巾、毛巾、洗碗布、背带裤、打底T恤、T恤领、袜子)。在15℃、40℃和60℃下于Laundr-O-Meter(LOM)中进行洗涤。对于15℃和40℃下的洗涤，使用碧浪灵敏性白色与彩色衣物洗涤剂(Ariel Sensitive White&Color)，而对于60℃下的洗涤，使用WFK IEC-A*标准洗涤剂。通过称出5.1g并添加自来水直到1000ml，随后搅拌5分钟来制备碧浪灵敏性白色与彩色衣物洗涤剂。通过称出5g并添加自来水直到1300ml，随后搅拌15min来制备WFKIEC-A*标准洗涤剂(可获得自WFK Testgewebe有限公司)。分别在15℃、40℃和60℃下进行1小时洗涤，随后在15℃下冲洗2次，持续20min。

　　分别在15℃、40℃和60℃下洗涤后立即对衣物进行取样。向二十克的衣物中添加0.9％(w/v)NaCl(1.06404；默克公司(Merck)，达姆施塔特，德国)与0.5％(w/w)tween 80，以在匀质器(stomacher)袋中产生1:10稀释液。使用匀质器在中速下将混合物均质化2分钟。均质化后，在0.9％(w/v)NaCl中制备十倍稀释液。将细菌在30℃下于胰胨大豆琼脂(Tryptone Soya Agar)(CM0129，Oxoid公司，贝辛斯托克，汉普郡，英国)上需氧地孵育5-7天并对其计数。为了抑制酵母和霉菌的生长T，添加0.2％山梨酸(359769，西格玛公司(Sigma))和0.1％放线酮(18079；西格玛公司)。从可计数的板中选择二十四个细菌和真菌菌落并且通过在TSA上再划线两次进行纯化。对于长期存储，将纯化的分离株于-80℃下存储在包含20％(w/v)甘油(49779；西格玛公司)的TSB中。

　　使衣物特定细菌与DNA酶接触以减少粘附

　　在本研究中使用了八种衣物相关的细菌菌株(不动杆菌属、气微菌属、短波单胞菌属、微杆菌属、滕黄微球菌、假单胞菌属、表皮葡萄球菌以及寡养单胞菌属)。所选菌株产生令人非常不快的恶臭。

　　对于长期存储，将细菌菌株于-80℃下维持在胰胨大豆肉汤(Tryptone SoyaBroth)(TSB)(pH 7.3)(CM0129，Oxoid有限责任公司，贝辛斯托克，英国)中，向该肉汤中添加20％(v/v)甘油(默克公司，达姆施塔特，德国)。使细菌培养物在30℃下于胰胨大豆琼脂(TSA)(pH 7.3)上预生长3-5天。将来自一个单菌落的满环物(loop-full)转移至包含10mlTSB的试管中并且伴随振荡(240rpm)于30℃下孵育1天。繁殖后，使用细菌细胞研究枯草芽孢杆菌DNA酶(SEQ ID NO:1)和地衣芽孢杆菌DNA酶(SEQ ID NO:2)的生物膜预防和去除特性。

　　为了研究生物膜预防，将细菌细胞在添加0、0.5、1、2、4、8、16、32、64、128以及256ppm DNA酶的TSB中稀释1000倍。将一百μl接种进96孔聚苯乙烯板(平底)(161093；Nunc，罗斯基勒，丹麦)中并在30℃下孵育3天。孵育后，通过使用Spectramax Plus 384读取器(分子设备公司(Molecular Devices)，森尼韦尔，加利福尼亚州，美国)测量600nm处的光密度而确定生长。通过用0.9％(w/v)NaCl(默克公司)洗涤两次除去非粘附细胞而测量粘附/生物膜预防。为了测量粘附，添加200μl的0.1％(w/v)结晶紫(C0775；西格玛-奥德里奇公司(Sigma-Aldrich)，圣路易斯，密苏里州，美国)并且在室温下保留15min。将这些孔用0.9％(w/v)NaCl洗涤两次，并且通过添加200μl 96％(w/v)乙醇(201145；Kemetyl公司，克厄丹麦)而洗脱结合的结晶紫并且通过在595nm下进行测量加以确定。

　　为了研究生物膜除去，将细菌细胞在TSB中稀释100倍并且将100μl添加至微量滴定板中。将细菌细胞在30℃下孵育3天，以粘附至表面并产生均匀的生物膜。将未粘附至微量滴定板的表面的细胞轻轻洗掉，并且将剩余的产生生物膜的细胞在水性洗涤剂溶液中于30℃用DNA酶(分别为30和100ppm)处理1小时，该水性洗涤剂溶液是通过将3.33g/l的标准洗涤剂A添加进水中而制备的，该标准洗涤剂A包含12％LAS、11％AEO Biosoft N25-7(NI)、7％AEOS(SLES)、6％MPG、3％乙醇、3％TEA(三乙醇胺)、2.75％可可皂、2.75％大豆皂、2％甘油、2％氢氧化钠、2％柠檬酸钠、1％甲酸钠、0.2％DTMPA、0.2％PCA以及40.63％离子交换水(所有百分比均为w/w)。

　　表1.

　　表1示出了观察到细菌附着的预防的最低浓度。

　　表2.

　　通过枯草芽孢杆菌DNA酶和地衣芽孢杆菌DNA酶除去生物膜。

　　表2中的+/-：生物膜去除/无生物膜去除

　　本研究显示，枯草芽孢杆菌DNA酶和地衣芽孢杆菌DNA酶降低发现于洗涤的衣物中的不动杆菌属、气微菌属、短波单胞菌属、微杆菌属、滕黄微球菌、假单胞菌属、表皮葡萄球菌、寡养单胞菌属的粘附特性，当在洗涤之后再次使用纺织品时，它们在洗涤的衣物中产生恶臭。

　　最重要的是，抑制粘附特性将防止在洗涤过程中这些细菌在不同纺织品之间转移并且因此限制这些细菌的出现。此外，抑制粘附特性将使这些细菌在洗衣机内生长的风险最小化。细菌在洗衣机内生长可以引起来自洗衣机的恶臭。此外，脱离的细菌在洗涤过程中可以转移至纺织品上并且以后当在洗涤过程之后使用它们时引起来自纺织品的恶臭。

　　实例2

　　地衣芽孢杆菌DNA酶(SEQ ID NO:2)在标准洗涤剂和商业洗涤剂中的性能

　　在本实例中使用一种分离自衣物的短波单胞菌属的菌株(参见实例1)。

　　对于长期存储，将短波单胞菌属于-80℃下维持在胰胨大豆肉汤(TSB)(pH 7.3)(CM0129；Oxoid有限责任公司，贝辛斯托克，英国)中，向该肉汤中添加20％(v/v)甘油(默克公司，达姆施塔特，德国)。使短波单胞菌属在30℃下于胰胨大豆琼脂(TSA)(pH 7.3)(CM0131；Oxoid有限责任公司，贝辛斯托克，英国)上预生长2-5天。将来自一个单菌落的满环物转移至10mL的TSB中并且伴随振荡(240rpm)于30℃下孵育1天。繁殖后，通过离心(西格玛实验室离心机(Sigma Laboratory Centrifuge)6K15)(3000g，在21℃下，7min)沉淀短波单胞菌属并且将其重悬于10mL用水稀释两次的TSB中。使用分光计(POLARstar Omega(BMG莱伯泰科(BMG Labtech)，奥滕贝格(Ortenberg)，德国))测量600nm处的光密度(OD)。将用水稀释两次的新鲜TSB接种至0.03的OD600nm，并且将1.6mL添加至12孔聚苯乙烯平底微板(3512；康宁公司(Corning Incorporated)，康宁，纽约，美国)的每个孔中，向该微板中放入无菌聚酯WFK30A的圆的小块布样(直径2cm)。伴随振荡(100rpm)在15℃孵育24h后，将小块布样用0.9％(w/v)NaCl洗涤两次。将具有短波单胞菌属的五个洗涤的小块布样与五个无菌的聚酯WFK30A小块布样在50mL试管中混合并添加10mL的洗涤剂洗涤溶液，该洗涤溶液包含0.7g/L污垢(Pigmentschmutz，09V，wfk，克雷费尔德(Krefeld)，德国)和地衣芽孢杆菌DNA酶(5ppm)。在30℃，将试管放入斯图尔特(Stuart)旋转器中，持续1小时。将小块布样用自来水冲洗两次并且在滤纸上干燥过夜。作为对照，平行地进行未添加地衣芽孢杆菌DNA酶的洗涤。使用Color Eye(Macbeth Color Eye 7000反射分光光度计)测量缓解(L值)。在入射光中没有UV的情况下进行测量并且从CIE Lab色空间中提取L值。

　　为了研究DNA酶在不同洗涤剂中的深层清洁效果，选择来自不同地区的标准和商业洗涤剂(液体和粉末)。

　　关于液体，使用以下洗涤剂：包含12％LAS、11％AEO Biosoft N25-7(NI)、7％AEOS(SLES)、6％MPG(单丙二醇)、3％乙醇、3％TEA、2.75％可可皂、2.75％大豆皂、2％甘油、2％氢氧化钠、2％柠檬酸钠、1％甲酸钠、0.2％DTMPA 0.2％PCA以及40.63％离子交换水(所有百分比均为w/w)(欧洲，3.3g/L)的标准洗涤剂A，汰渍原味洗涤剂(TIDE Original)(美国，3.2g/L)，碧浪Actilift洗涤剂(欧洲，6.9g/L)，奥妙小而强大洗涤剂(OMO Small andMighty)(欧洲，4g/L)，宝莹胶敏性洗涤剂(Persil Gel Sensitive)(欧洲，7.2g/L)以及蓝月亮洗涤剂(Blue Moon)(亚洲，1.6g/L)。

　　关于粉末，使用以下洗涤剂：包含11％LAS、2％AS/AEOS、2％皂、3％AEO，15.15％碳酸钠、3％硅酸钠、18.75％沸石、0.15％螯合剂、2％柠檬酸钠、1.65％AA/MA共聚物、2.5％CMC 0.5％SRP，36.％硫酸钠以及2％控泡剂的标准洗涤剂T(所有百分比均为w/w)(欧洲，5.3g/L)，包含16.5％LAS、15％沸石、12％二硅酸钠、20％碳酸钠、1％sokalan、35.5％硫酸钠的标准洗涤剂X(所有百分比均为w/w)(亚洲，1.8g/L)，碧浪洗涤剂(Ariel)(欧洲，5.3g/L)以及宝莹(Persil)Megaperls洗涤剂(欧洲，4.0g/L)。

　　对于欧洲洗涤剂，使用硬度为15°dH(Ca:Mg:NaHCO3 4:1:1.5)的水。对于美国洗涤剂，使用硬度为6°dH(Ca:Mg:NaHCO3 2:1:1.5)的水。对于亚洲洗涤剂，使用硬度为14°dH(Ca:Mg:NaHCO3 2:1:1.5)的水。

　　表3.

　　地衣芽孢杆菌DNA酶的深层清洁效果。

　　本实例显示，地衣芽孢杆菌DNA酶预防污垢沉积(抗再沉积)至预生长有细菌的聚酯小块布样上。不仅在pH 8.0的液体洗涤剂中，还在pH 10的粉末洗涤剂中观察到污垢沉积的预防。观察到的效果归因于地衣芽孢杆菌DNA酶的深层清洁效果。最重要的是，本实例显示，地衣芽孢杆菌DNA酶将预防污垢在洗涤过程中在不同纺织品之间转移并且因此所得脏衣物能够与不太脏衣物一起洗涤。

　　实例3

　　DNA/DNA酶/恶臭。

　　此实例显示，纺织品上存在DNA使得化合物(像发现于衣物中的恶臭化合物E-2-壬烯醛)即使在洗涤剂洗涤之后仍更好地粘在纺织品上。

　　在洗涤中使用DNA酶减少纺织品上的DNA的存在，并且因而还减少E-2-壬烯醛的存在，并且因而降低衣物中的恶臭。

　　将十二个5cm x 5cm聚酯纺织品(wfk30A)小块布样放入单独的皮氏培养皿中，并且将500μL的MilliQ水施加至这些小块布样中的4个中，同时将500μL溶解于MilliQ水中的来自鲑鱼睾丸的DNA的0.05mg/mL溶液施加至剩余的8个小块布样。

　　将这12个小块布样在室温下干燥过夜。将450μL溶解于水中的10mM E-2-壬烯醛施加至所有的干小块布样，并且将它们在LAF工作台中在最大流速下干燥1小时。然后，将干的小块布样与各自20mL的浓度为3.33g/L的制自MilliQ水的洗涤液和液体洗涤剂(来自实例1的标准洗涤剂A)一起放入三个50mL Falcon管中，并且向三号管中添加30ppm的DNA酶(来自枯草芽孢杆菌的NucB)，全部如表4中所描述。

　　在1号管中放入四个具有E-2-壬烯醛并且没有DNA的小块布样，并且在2号和3号管的每个管中放入四个具有E-2-壬烯醛和DNA两者的小块布样。将这些管用盖子封闭并安装在Mini-Laundr-O-Meter(一种斯图尔特管旋转器(Stuart Tube Rotator)SB3)中；然后，将这些小块布样在30℃下于20rpm下洗涤60分钟。

　　洗涤后，将洗涤液丢弃并且将这些小块布样用15mL MilliQ水冲洗2次。将每个小块布样都放入一个20mL玻璃小瓶中用于GC分析并将小瓶加帽。在40℃下孵育20分钟后，在来自法国阿尔法M.O.S.的Heracles II电子鼻中分析加帽小瓶(具有2个FID的双柱气相层析仪，柱1：MXT5并且柱2：MXT1701)，在该电子鼻中分析来自每个小瓶的5mL的顶部空间。单独地针对柱1和2，所得层析谱中的E-2-壬烯醛峰的面积是对来自三个管的小块布样取平均值并且可以见于表4中。

　　表4：

　　表4中的结果显示，在纺织品小块布样上存在DNA使得E-2-壬烯醛更好地粘在纺织品上，所有洗涤后更多的E-2-壬烯醛存在于纺织品上。

　　在管2中，存在于具有DNA的小块布样上的E-2-壬烯醛的平均峰面积比存在于没有DNA的小块布样(管1)上的E-2-壬烯醛的平均峰面积高多达59倍，从而显示纺织品上存在DNA增加恶臭。

　　结果还显示，向洗涤中添加DNA酶可以降低洗涤后粘在纺织品上的E-2-壬烯醛的量，因而降低洗涤后的恶臭。

　　与管2中的存在于具有DNA的小块布样上的E-2-壬烯醛的平均峰面积相比，在管3中，存在于具有DNA的小块布样上的E-2-壬烯醛的平均峰面积降低超过9倍，这归因于在洗涤中添加DNA酶，从而显示洗涤中存在DNA酶降低纺织品上的恶臭。

　　实例4

　　实例4a：

　　DNA玷污的纺织品的制备

　　为了制备DNA玷污的纺织品小块布样(称作“DNA小块布样”)，将5.0mg/mL DNA溶解于无菌MilliQ水中并于5℃下放入冰箱中过夜，以使DNA溶解。在无菌MilliQ水中将DNA溶液稀释至例如0.25、0.5或1.0mg/mL。在无菌皮氏培养皿中放入多达6个直径为2cm的圆的纺织品小块布样并且向每个纺织品小块布样上施加选定浓度的100μL DNA溶液并且将它们在不加盖的情况下留在皮氏培养皿中过夜或直到干燥。为了向洗涤的DNA小块布样上再施加DNA，直到等到洗涤的DNA小块布样干燥并且向每个纺织品小块布样上施加选定浓度的100μL DNA溶液并且将它们在不加盖的情况下留在皮氏培养皿中过夜或直到干燥。

　　实例4b：

　　测定III：多循环洗涤DNA/污物。

　　一种在洗涤中测试DNA在纺织品上的积累和DNA在纺织品上的再沉积效果的方式是在多个连续洗涤中用洗涤剂和污垢洗涤DNA小块布样连同干净的纺织品小块布样(称作“示踪小块布样”)，其中在每个洗涤之间将DNA再施加至DNA小块布样上，以模拟洗涤之间的穿着。

　　通过将3.00mL的0.713mol/L CaCl2、1.50mL的0.357mol/L和0.3371g的NaHCO3吸移进1L量筒中，用MilliQ水填满至1L并搅拌以溶解来制备1L15°dH水。称取3.33g的标准洗涤剂A并溶解于水中。称取0.70g来自德国wfk Testgewebe有限公司的颜料污垢(PigmentSoil)acc.to ILG 09V，并且与洗涤剂一起溶解于水中，称作脏的洗涤剂溶液。在每个50mL塑料烧杯(Falcon或NUNC离心管)中放入5个DNA小块布样和5个示踪小块布样。向每个烧杯中添加10mL的脏的洗涤剂溶液。在所有烧杯上都加上盖子，很好地振荡它们，以保证小块布样良好分布。将烧杯装在Mini-Laundr-O-Meter(一种斯图尔特管旋转器SB3)中并且在30℃下于20rpm下洗涤60分钟。洗涤后，将旋转器放在室温下，同时将来自一个烧杯的小块布样每次用15°dH水冲洗并放回旋转器中。在20mL 15°dH水中将每个烧杯冲洗2次。最后一次冲洗后，将小块布样在滤纸上干燥过夜或直到干燥。当干燥时，如上所述，向DNA小块布样上再施加DNA。重复洗涤和再施加DNA，直到已经将小块布样总共洗涤5次或直到洗涤后可看出充足的差异。在整个实验中使用同一示踪小块布样，以示出转移的DNA在洗涤中的积累。从一个纺织品小块布样上洗掉的DNA可以粘在干净的纺织品上并且纺织品存在DNA使得即使在洗涤剂洗涤后污物仍更好地粘在该纺织品上。最后一次洗涤后，在ColorEye或DigiEye中测量所有纺织品小块布样的反射率，纺织品小块布样上的DNA越多，沉积的污垢越多。

　　实例4c

　　多循环洗涤DNA/DNA酶/污物。

　　此实例显示，从一个纺织品小块布样上洗掉的DNA可以粘在洗涤过程中存在的干净的纺织品上并且纺织品存在DNA使得即使在洗涤剂洗涤后污物(颜料污垢)仍更好地粘在该纺织品上。该实例还显示，用包含DNA酶的洗涤剂进行洗涤显著降低存在于DNA小块布样上的DNA的量并且因此降低粘在DNA小块布样上的污物的量。该实验还显示，用包含DNA酶的洗涤剂进行洗涤显著降低从DNA小块布样转移至示踪小块布样上的DNA的量，从而降低粘在示踪小块布样上的污物的量(抗再沉积)。

　　如上所述地进行DNA小块布样的制备和多循环洗涤DNA/污物测定。将来自西格玛奥德里奇公司(Sigma Aldrich)的鲑鱼睾丸D1626的脱氧核糖核酸钠用作DNA来源。将来自德国wfk Testgewebe有限公司的预洗涤的聚酯WFK 30A用作纺织品。在脏的洗涤剂溶液中用0.5ppm的DNA酶(来自地衣芽孢杆菌的NucB DNA酶)进行DNA酶洗涤。始终戴着手套或使用镊子处理所有小块布样。如下表5所述地设置实验：

　　在将所有小块布样在DigiEye(DigiEye成像系统(DigiEye Imaging System)，光源D65，漫射照明)中进行测量之前，针对6个烧杯，总共进行4次洗涤，在该DigiEye中记录三色Y值(称为Y值)。在下表中，记下了这些小块布样的Y值的平均值。该值越高，小块布样越白，如在下表6中所见：

　　(*)除了第一个洗涤循环之外，在第一个洗涤循环中，烧杯1和2的DNA小块布样的DNA浓度为1.0mg/mL，并且烧杯3和4为0.5。

　　(**)将δY-值计算为“平均值具有DNA酶-平均值没有DNA酶”，δY值越高，洗涤过程中DNA酶的洁白效果越好

　　(***)T检验值<0.05表明这两个值至少在5％显著性水平上彼此统计学上显著不同

　　在用脏的洗涤剂进行4个洗涤循环后，观察到以下结果。对于在洗涤中具有0.5ppmDNA酶的DNA小块布样而言，观察到统计学上显著的洁白效果。向洗涤剂溶液中添加DNA酶降低小块布样上的DNA的量并且在洗涤过程中降低附着至DNA小块布样上的污物的量并且因此与没有DNA酶的洗涤相比，增加洗涤后DNA小块布样的白度。对于所有示踪小块布样而言，在所有烧杯中，用0.5ppm DNA酶进行的洗涤都存在统计学上显著的抗再沉积效果。向洗涤剂溶液中添加DNA酶使得洗涤过程中DNA从DNA小块布样转移至示踪小块布样降低，降低洗涤过程中附着至示踪小块布样上的污物的量并且因此与没有DNA酶的洗涤相比，增加洗涤后示踪物的白度。

　　实例5

　　实例5a：测定

　　纺织品上的E-2-壬烯醛的感官分析

　　一种测试纺织品上的恶臭的存在的方式是通过使用作为恶臭的标志物的E-2-壬烯醛，因为此化合物引起衣物上的恶臭。

　　将E-2-壬烯醛的溶液添加至5cm x 5cm纺织品小块布样上并且将这些小块布样放入具有螺帽的50mL Falcon管中。使用一个或多个具有正常感官并且对不同浓度的E-2-壬烯醛的气味敏感的个体通过在管之间以避免鼻腔疲劳的合理的时间闻这些管来评估每个管的气味强度。针对每个个体，使用新的管组，评估气味强度。可以按1至8的标准为气味强度打分，其中1为没有气味并且8是具有非常强烈的气味。

　　实例5b

　　使用和不使用DNA酶洗涤的DNA小块布样上的E-2-壬烯醛的感官分析

　　此实例显示，向洗涤中添加DNA酶可以通过减少有气味化合物(像E-2-壬烯醛)的气味强度而减少衣物中的恶臭。

　　将5cm x 5cm高压釜处理的棉纺织品(wfk10A)小块布样放入单独的皮氏培养皿中，并且将500μL的MilliQ水施加至2个小块布样上，将500μL溶解于MilliQ水中的来自鲑鱼睾丸的DNA的0.1mg/mL溶液施加至2个小块布样上并且将500μL溶解于MilliQ水中的来自鲑鱼睾丸的DNA的1.0mg/mL溶液施加至2个小块布样上。将这6个小块布样在室温下干燥过夜。

　　将400μL溶解于MilliQ水中的10mM E-2-壬烯醛施加至所有的6个干小块布样中，并且将它们在LAF工作台中在最大流速下干燥1小时。然后，将干的小块布样与各自20mL的浓度为3.33g/L的制自MilliQ水的洗涤液和液体洗涤剂(来自实例1的标准洗涤剂A)一起放入六个50mL Falcon管中的每个中，并且向2、4和6号烧杯(管)中添加30ppm的DNA酶(来自枯草芽孢杆菌的NucB)并且充分混合，全部如表？中所描述。

　　将这些烧杯用盖子封闭并安装在Mini-Laundr-O-Meter(一种斯图尔特管旋转器SB3)中；然后，将这些小块布样在30℃下于40rpm下洗涤60分钟。

　　洗涤后，将洗涤液丢弃并且将这些小块布样用15mL MilliQ水冲洗2次并且留在被盖子封闭的烧杯中。然后，由具有正常味觉并且对E-2-壬烯醛敏感的蒙住双眼的个体以随机顺序评估包含湿的纺织品的烧杯的气味强度。结果如下表7所示：