一种中成药中自然铜的含量测定方法
技术领域
本发明属于中成药含量测定技术领域，具体是一种中成药中自然铜的含量测定方法。
背景技术
自然铜为硫化物类矿物黄铁矿族黄铁矿，主含二硫化铁(FeS2)，是一种常用的矿物类中药材，具有散瘀止痛，续筋接骨的作用，用于跌打损伤，筋骨折伤，瘀肿疼痛，常与其它中药材配伍，制成中成药，临床用于跌打肿痛等疾病。FeS2为共价键结合，难以溶于稀酸，中成药中自然铜的含量测定鲜有报道。胡军等发表的文章-活血止痛胶囊中自然铜全铁的含量测定研究(江西中医学院学报，2003年)，采用剧烈条件高温消解后，比色法测定中成药中自然铜含量。该方法灵敏度低、取样量大，且操作繁琐、误差较大。另一方面，由于中成药基质复杂，需要加以消解，导致前处理复杂、耗时长、污染环境。能量色散X射线荧光光谱(EDX)具有操作简便、分析速度快、多元素同时检测、可实现无损分析等优点。目前，将EDX用于中成药的分析未见报道。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种中成药中自然铜的含量测定方法，本发明采用能量色散X射线荧光法建立了中成药中自然铜的快速无损分析方法，为含自然铜的中药的质量控制提供了准确、可行的检测手段。
为达到上述目的，本发明采用了如下的技术方案：
一种中成药中自然铜的含量测定方法，所述含量测定方法包括如下步骤：
样品去除包衣/胶囊壳置于能量色散型X荧光光谱仪自动进样器内，或直接置于能量色散型X荧光光谱仪自动进样器内，测定各元素谱线强度；
Ti-U元素：准直器：10mm，氛围：真空，电压50kV，电流18uA–Auto，扫描范围4.00-35.00，扫描时间60s，死时间比例30％；
Al-Sc元素：准直器：10mm，氛围：真空，电压15kV，电流137uA–Auto，扫描范围0.00-4.40，扫描时间60s，死时间比例29％；
S-Ca元素：准直器：10mm，氛围：真空，电压15kV，电流222uA–Auto，滤光片#2，扫描范围2.10-4.10，扫描时间60s，死时间比例30％；
Cr-Fe元素：准直器：10mm，氛围：真空，电压50kV，电流34uA–Auto，滤光片#3，扫描范围5.00-7.00，扫描时间57s，死时间比例30％；
Zn-As，Pb元素：准直器：10mm，氛围：真空，电压50kV，电流352uA–Auto，滤光片#4，扫描范围8.50-14.50，扫描时间54s，死时间比例30％；
Ru-Sb元素：准直器：10mm，氛围：真空，电压50kV，电流1000uA–Auto，滤光片#1，扫描范围18.50-28.00，扫描时间60s，死时间比例9％；
根据各元素谱线强度，结合CHO平衡和FeS2分子式，计算得到样品中自然铜含量。优选地，所述中成药为散剂、丸剂、片剂或胶囊剂。散剂、丸剂直接测定，片剂不去或去除包衣进行测定，胶囊剂取内容物进行测定。
与现有技术相比，本发明的技术优点在于：
本发明能量色散X射线荧光光谱法测定中成药中自然铜，精密度高、重复性好，测定值与ICP-OES法测得的参比值接近。
本发明具有操作简便、分析速度快(1个样品6.6min)、无需前处理、可实现无损分析等优点。
本发明不需要采用溶剂进行消解，不会污染环境，有利于环境保护；本发明测试样品不需要粉碎，可直接进行含量测定，省略测试准备时间，且测量结果准确。
附图说明
图1EDX法测定舒筋定痛片中自然铜含量；
图2舒筋定痛片中自然铜EDX测定值同ICP-OES测定值的相关回归模型；
图3活血止痛散片中自然铜EDX测定值同ICP-OES测定值的相关回归模型。
具体实施方式
下面以附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
实施例一 舒筋定痛片中自然铜的含量测定
1、测定方法
取舒筋定痛片，去除或不去除包衣，如图1所示，置于自动进样器中，采用岛津EDX-7000能量色散型X荧光光谱仪全元素定量测定各元素强度，根据各元素谱线强度，结合CHO平衡和FeS2分子式，计算得到样品中自然铜含量。分析时间6.6min，仪器参数设定如下表1：
表1能量色散型X荧光测试条件
2、专属性试验
取土鳖虫、红花、骨碎补、当归、乳香、没药、大黄、硼砂，按舒筋定痛片处方比例制备缺自然铜的阴性样品，依法测定，结果未检出FeS2，说明其它药味对本品中自然铜的测定无干扰。
3、精密度试验
取一份供试品连续测定6次，测得自然铜(以FeS2计)平均含量为25.03％，RSD为1.14％。
4、重复性试验
取同一批样品，平行制备6份供试品，测得自然铜(以FeS2计)平均含量为24.95％，RSD为2.27％。
5、准确度试验
取舒筋定痛片，去除包衣，研细，精密称取0.5g，加硝酸5.0mL，微波消解，赶酸，放冷，加水定容至20.0mL，采用电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)测定参比值。仪器参数：等离子体射频功率1300W，采样深度15.0mm，等离子气流量15.0L·min-1，辅助气流量0.2L·min-1，雾化气流量0.8L·min-1，测定波长：Fe 239.5nm。EDX测定值与ICP-OES测定参比值(自然铜含量以FeS2计)的相关回归模型如图2所示(图中样品测试数据点有重合)。从图2可以看出，13批样品的EDX测定值与参比值接近，平均相对偏差为5.83％。
6、测定结果
取5个厂家的13批样品，依法测定，自然铜(以FeS2计)含量见下表2：
表2不同厂家不同批样品的测定结果
结果显示不同厂家样品含量差异明显。由于比色、滴定、ICP-OES等常规方法测定中成药中自然铜含量，存在操作复杂，耗时长等缺点，舒筋定痛片标准中并未规定处方药味自然铜的含量测定项，故推测企业对自然铜的投料控制不规范。A厂家3批样品含量远低于其它样品，推测其投料量明显不足。B、D企业，同一厂家的不同批次样品含量存在差异，说明其原料质量或投料情况差异较大。E企业样品含量远高于其它样品，推测其投料明显偏高，或除自然铜外的其它药味投料偏低。D企业3批样品含量接近，说明其原料质量稳定，生产管理规范。因此，采用本发明快速、简便、准确的技术优势有助于药品生产企业规范投料，并可为含自然铜中成药的质量监管提供有力技术支撑。
实施例二 活血止痛散中自然铜的含量测定
1、测定方法
取活血止痛散，置于自动进样器中，采用岛津EDX-7000能量色散型X荧光光谱仪全元素定量测定各元素强度，根据各元素谱线强度，结合CHO平衡和FeS2分子式，计算得到样品中自然铜含量。分析时间6.6min，仪器参数设定如下表3：
表3能量色散型X荧光测试条件
2、专属性试验
取当归、三七、乳香、冰片、土鳖虫，按活血止痛散处方比例制备缺自然铜的阴性样品，依法测定，结果未检出FeS2，说明其它药味对本品中自然铜的测定无干扰。
3、精密度试验
取一份供试品连续测定6次，测得自然铜(以FeS2计)平均含量为7.67％，RSD为1.55％。
4、重复性试验
取同一批样品，平行制备6份供试品，测得自然铜(以FeS2计)平均含量为7.73％，RSD为2.64％。
5、准确度
取活血止痛散，研细，精密称取0.5g，加硝酸5.0mL，微波消解，赶酸，放冷，加水定容至20.0mL，采用电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)测定参比值。仪器参数：等离子体射频功率1300W，采样深度15.0mm，等离子气流量15.0L·min-1，辅助气流量0.2L·min-1，雾化气流量0.8L·min-1，测定波长：Fe 239.5nm。EDX测定值与ICP-OES测定参比值(自然铜含量以FeS2计)的相关回归模型如图3所示。从图3可以看出，样品的EDX测定值与参比值接近，平均相对偏差为4.56％。
6、测定结果
取3个厂家的9批样品，依法测定，自然铜(以FeS2计)含量见下表4：
表4不同厂家不同批样品的测定结果
本发明的工艺参数(如温度、时间等)区间上下限取值以及区间值都能实现本法，在此不一一列举实施例。
本发明未详细说明的内容均可采用本领域的常规技术知识。
最后所应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制。尽管参照实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应该理解，对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，都不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
