冬樱花果仁中油脂的提取、优化及脂肪酸分析方法
技术领域
本发明属于油脂提取技术领域，尤其涉及一种冬樱花果仁中油脂的提取、优化及脂肪酸分析方法。
背景技术
目前，最接近的现有技术：云南冬樱花又名云南欧李，或高盆樱，俗称“野樱桃”，花期为11月至翌年1月，花先叶开放或花叶同放；果期为3至4月。云南冬樱花盛开时艳丽夺目，繁花似锦，是我国在冬季盛开的唯一一种野生樱花资源，为冬季的自然景观增添绚烂。云南冬樱花因其花色艳丽，景色宜人，受到了人们的喜爱，是一种极具应用潜力的优良园林观赏树种。
云南冬樱花作为云南的特色植物，经济价值更多的是作为观赏树和花的利用，其果实成熟后未得到充分的利用，掉落在地上造成环境污染，造成了经济的损失。云南冬樱花色素提取工艺已有人研究，发现云南冬樱花色素为醇溶色素，其成分主要为甜菜素，目前对其果实的开发尚属空白。云南冬樱花的果实与樱桃同为樱属，研究发现郑州市樱桃仁的含油率为30.7％，烟台市大樱桃仁含油率为27.8％，表明樱桃仁具有较高的含油率。目前油脂的提取技术已相对成熟，主要有索氏提取、水酶法和超临界CO2萃取等方法。超临界CO2萃取法造价高；水酶法中用到的酶制剂价格较高；索氏提取法不仅方便、快速、设备操作简单、成本低，并且重现性与准确性好。
目前研究发现多不饱和脂肪酸在樱桃油中含量较高。与饱和脂肪酸相比较而言，多不饱和脂肪酸营养价值更高，且具备一定的生理功效，它能调节心脏，降低血液中的胆固醇和改善血液微循环，具有增强人体免疫系统等作用。除此之外它还可以将多余脂肪排出，从而达到减肥的目的。不饱和脂肪酸的生理功效和营养价值受到了食品等行业的广泛关注，引起了人们对多不饱和脂肪酸高度的重视。
国内目前对云南冬樱花果实中果仁的研究开发未见报道，所以对云南冬樱花果实中果仁的研究具有一定的意义。因此对云南冬樱花果实中果仁进行油脂提取优化及脂肪酸分析，确定云南冬樱花果实中果仁油脂提取的最优条件，得到其油脂的脂肪酸组分。开发一种新型植物油，实现云南冬樱花的果实的有效利用，为云南冬樱花产业的开发提供思路。
综上所述，现有技术存在的问题是：目前对云南冬樱花果实中果仁的研究开发尚未见报道。目前油脂的提取主要有压榨法、水酶法和超临界CO2萃取等方法。但这几种方法都有一定的缺陷，压榨法出油率低，水酶法和超临界CO2萃取法成本高。
解决上述技术问题的难度：为解决上述技术问题，本发明采取索氏抽提法对冬樱花果仁中的油脂进行提取。
解决上述技术问题的意义：索氏抽提法成本低，出油率相对较高，是一种可行的油脂提取方法。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种冬樱花果仁中油脂的提取、优化及脂肪酸分析方法，旨在通过单因素实验和响应面试验，确定云南冬樱花果仁中油脂提取的最佳工艺，并进行脂肪酸分析，开发一种新的植物油。
本发明是这样实现的，一种冬樱花果仁中油脂的提取、优化及脂肪酸分析方法，所述冬樱花果仁中油脂的提取、优化及脂肪酸分析方法包括以下步骤：
步骤一，以云南冬樱花果仁为原料，通过索氏提取法提取粗脂肪。
步骤二，在单因素实验的基础上，利用响应面法确定云南冬樱花果仁中油脂提取的最佳工艺条件。
步骤三，在步骤二所述条件下提取油脂，并利用气相色谱法进行脂肪酸分析。
进一步，步骤一中，所述冬樱花果仁中油脂的提取方法为：依据国标GB5009.6-2016《食品中脂肪的测定》，采用索氏提取法提取冬樱花果仁中的油脂。具体包括：
将云南冬樱花果仁干燥后粉碎，过50目筛，准确称取1g的云南冬樱花果仁粉；用滤纸包好后放入索氏提取器中，加入一定量的石油醚，在一定温度下提取一段时间后，放入电热鼓风干燥箱，挥发石油醚，直至恒重，得到云南冬樱花果仁粗脂肪。所述脂肪得率的计算如式(1)所示：
粗脂肪得率(％)＝m1/m2×100(1)
式(1)中，m1为云南冬樱花果仁粗脂肪的质量/g；m2为云南冬樱花果仁的质量/g。
进一步，步骤二的单因素实验中，所述验证提取温度对冬樱花果仁粗脂肪得率影响的方法为：
准确称取1g的云南冬樱花果仁粉，用滤纸包好后放入索氏提取器中，加入料液比1:25(g/mL)的石油醚，分别在65、70、75、80、85℃的提取温度下，提取2h，然后放入电热鼓风干燥箱，挥发石油醚，直至恒重，得到冬樱花果仁粗脂肪。
进一步，步骤二的单因素实验中，所述验证提取时间对冬樱花果仁粗脂肪得率影响的方法为：
准确称取1g的云南冬樱花果仁粉，在索氏提取器中放入滤纸包好的冬樱花果仁粉，然后加入料液比为1:25(g/mL)的石油醚，在条件为75℃提取温度下，分别提取1、1.5、2、2.5、3h，然后放入电热鼓风干燥箱，挥发石油醚，直到接收瓶重量不再变化，得到冬樱花果仁粗脂肪。
进一步，步骤二的单因素实验中，所述验证料液比对冬樱花果仁粗脂肪得率影响的方法为：
准确称取1g的云南冬樱花果仁粉，用在索氏提取器中放入滤纸包好的冬樱花果仁粉，分别加入云南冬樱花果仁粉和石油醚的料液比为1:15、1:20、1:25、1:30、1:35(g/mL)，在条件为75℃提取温度下，提取2h，然后放入电热鼓风干燥箱，挥发石油醚，直至恒重，得到冬樱花果仁粗脂肪。
进一步，步骤二中，所述响应面试验为：
根据单因素实验结果，采用Central Composite Design方法，设计三因素五水平试验，以提取温度(X1)、提取时间(X2)和料液比(X3)为自变量，使用Design-Expert 8.0.6软件进行响应面试验设计和结果方差分析。
进一步，步骤三中，所述脂肪酸组成分析方法包括：样品制备、GC-MC条件设定以及数据分析。
进一步，脂肪酸组成分析中，所述样品的制备方法包括：
称取云南冬樱花果仁粗脂肪样品0.25g，将其放入25mL具塞试管之中，随后在其中加入5.0mL 0.5mol/L氢氧化钠-甲醇溶液，将其摇匀之后，于50℃的条件下反应30min，隔10min将样品进行摇匀，反应完后取出样品，放置在室温的条件下2h，隔30min将样品进行摇匀。然后加入5mL正己烷与样品当中，摇匀30s，放置于室温下静置，将上层清夜装入样品瓶中，用于GC-MS分析。
进一步，脂肪酸组成分析中，所述GC-MC条件设定为：
色谱柱：Agilent HP-INNOWAX石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)；进样口温度250℃，载气：氦气(纯度为99.999％，流量为1.20mL/min)。柱箱温度：初始温度为100℃，保留5min，以3℃/min的速度升至230℃，保留15min；进样量1μL，分流比为20:1。传输线温度280℃。
进一步，脂肪酸组成分析中，所述数据分析方法为：
所有样品重复3次，采用SPSS 22.0软件，通过t检验方法进行ANOVA分析。采用Design-Expert 8.0.6，进行响应面试验设计。
进一步，步骤二中，所述冬樱花果仁中油脂的提取、优化及脂肪酸分析方法的最优条件为：冬樱花果仁粉与石油醚料液比1:26(g/mL)，反应温度76℃，反应时间2.1h。
本发明的另一目的在于提供一种利用所述冬樱花果仁中油脂的提取、优化及脂肪酸分析方法获取的冬樱花果仁中油脂制品。
综上所述，本发明的优点及积极效果为：本发明提供的一种冬樱花果仁中油脂的提取、优化及脂肪酸分析方法，通过单因素实验和响应面试验，确定云南冬樱花果仁中油脂提取的最佳工艺，并进行脂肪酸分析，开发一种新的植物油。实验表明，云南冬樱花果仁中油脂提取的最佳工艺为：料液比1:26(g/mL)，反应温度76℃，反应时间2.1h，在此条件下油脂的得率40.86％。油脂中主要含有油酸(C18:1，32.08％)、9,11,13-十八碳三烯酸(C18:3，30.44％)、亚油酸(C18:2，29.3％)。亚油酸(C18:2，29.3％)。饱和脂肪酸含量为8.18％，不饱和脂肪酸含量为91.82％。云南冬樱花果仁中油脂含有丰富的多不饱和脂肪酸，具有较高的营养价值，可作为一种新型的植物油料，为云南冬樱花的开发与利用提供新思路。
附图说明
图1是本发明实施例提供的冬樱花果仁中油脂的提取、优化及脂肪酸分析方法流程图。
图2是本发明实施例提供的提取时间对云南冬樱花果仁粗脂肪得率的影响示意图。
图3是本发明实施例提供的提取温度对云南冬樱花果仁粗脂肪得率的影响示意图。
图4是本发明实施例提供的料液比对云南冬樱花果仁粗脂肪得率的影响示意图。
图5是本发明实施例提供的各因素对粗脂肪得率交互影响的响应面与等高线图；
图中：图(a)是提取时间与提取温度示意图；图(b)是提取时间与料液比示意图；图(c)是提取温度与料液比示意图。
图6是本发明实施例提供的云南冬樱花果仁油脂的甲酯气相色谱离子流图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
目前对云南冬樱花果实中果仁的研究开发尚未见报道。
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种冬樱花果仁中油脂的提取、优化及脂肪酸分析方法，下面结合附图对本发明作详细的描述。
如图1所示，本发明实施例提供的一种冬樱花果仁中油脂的提取、优化及脂肪酸分析方法包括以下步骤：
S101：以云南冬樱花果仁为原料，通过索氏提取法提取粗脂肪。
S102：在单因素实验的基础上，利用响应面法确定云南冬樱花果仁中油脂提取的最佳工艺条件。
S103：在S102所述条件下提取油脂，并利用气相色谱法进行脂肪酸分析。
本发明提供的S101中的冬樱花果仁中油脂的提取方法为：依据国标GB5009.6-2016《食品中脂肪的测定》，采用索氏提取法提取冬樱花果仁中的油脂。具体包括：
将云南冬樱花果仁干燥后粉碎，过50目筛，准确称取1g的云南冬樱花果仁粉；用滤纸包好后放入索氏提取器中，加入一定量的石油醚，在一定温度下提取一段时间后，放入电热鼓风干燥箱，挥发石油醚，直至恒重，得到云南冬樱花果仁粗脂肪。所述脂肪得率的计算如式(1)所示：
粗脂肪得率(％)＝m1/m2×100(1)
式(1)中，m1为云南冬樱花果仁粗脂肪的质量/g；m2为云南冬樱花果仁的质量/g。
本发明提供的S102的单因素实验中，所述验证提取温度对冬樱花果仁粗脂肪得率影响的方法为：准确称取1g的云南冬樱花果仁粉，用滤纸包好后放入索氏提取器中，加入料液比1:25(g/mL)的石油醚，分别在65、70、75、80、85℃的提取温度下，提取2h，然后放入电热鼓风干燥箱，挥发石油醚，直至恒重，得到冬樱花果仁粗脂肪。
本发明提供的S102的单因素实验中，所述验证提取时间对冬樱花果仁粗脂肪得率影响的方法为：准确称取1g的云南冬樱花果仁粉，在索氏提取器中放入滤纸包好的冬樱花果仁粉，然后加入料液比为1:25(g/mL)的石油醚，在条件为75℃提取温度下，分别提取1、1.5、2、2.5、3h，然后放入电热鼓风干燥箱，挥发石油醚，直到接收瓶重量不再变化，得到冬樱花果仁粗脂肪。
本发明提供的S102的单因素实验中，所述验证料液比对冬樱花果仁粗脂肪得率影响的方法为：准确称取1g的云南冬樱花果仁粉，用在索氏提取器中放入滤纸包好的冬樱花果仁粉，分别加入云南冬樱花果仁粉和石油醚的料液比为1:15、1:20、1:25、1:30、1:35(g/mL)，在条件为75℃提取温度下，提取2h，然后放入电热鼓风干燥箱，挥发石油醚，直至恒重，得到冬樱花果仁粗脂肪。
本发明提供的S102中的响应面试验为：根据单因素实验结果，采用CentralComposite Design方法，设计三因素五水平试验，以提取温度(X1)、提取时间(X2)和料液比(X3)为自变量，使用Design-Expert 8.0.6软件进行响应面试验设计和结果方差分析。
本发明提供的S103中的脂肪酸组成分析方法包括：样品制备、GC-MC条件设定以及数据分析。
本发明提供的脂肪酸组成分析中的样品的制备方法包括：称取云南冬樱花果仁粗脂肪样品0.25g，将其放入25mL具塞试管之中，随后在其中加入5.0mL0.5mol/L氢氧化钠-甲醇溶液，将其摇匀之后，于50℃的条件下反应30min，隔10min将样品进行摇匀，反应完后取出样品，放置在室温的条件下2h，隔30min将样品进行摇匀。然后加入5mL正己烷与样品当中，摇匀30s，放置于室温下静置，将上层清夜装入样品瓶中，用于GC-MS分析。
本发明提供的脂肪酸组成分析中的GC-MC条件设定为：
色谱柱：Agilent HP-INNOWAX石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)；进样口温度250℃，载气：氦气(纯度为99.999％，流量为1.20mL/min)。柱箱温度：初始温度为100℃，保留5min，以3℃/min的速度升至230℃，保留15min；进样量1μL，分流比为20:1。传输线温度280℃。
本发明提供的脂肪酸组成分析中的数据分析方法为：所有样品重复3次，采用SPSS22.0软件，通过t检验方法进行ANOVA分析。采用Design-Expert 8.0.6，进行响应面试验设计。
下面结合实施例对本发明作进一步描述。
1、材料与方法
1.1试验时间、地点
本研究于2017年9月-2019年4月在食品学院101实验室完成。
1.2试验材料
云南冬樱花果实采集自云南省昆明市盘龙区云南农业大学新校区。
1.3试验试剂
正己烷：天津市风船化学试剂科技有限公司；石油醚：天津市风船化学试剂科技有限公司；正己烷为色谱纯，其它所用试剂均为分析纯。
1.4仪器与设备
DZKW-6-4恒温水浴锅：北京市永光明医疗仪器有限公司；GZX-GF101-3-BS-II电热鼓风干燥箱：上海跃进医疗器械有限公司；TRACE GC ULTRA-DSQ气相色谱-质谱联用仪：Thermo Fisher Scientific。
1.5试验方法
1.5.1冬樱花果仁中油脂的提取
依据国标GB5009.6-2016《食品中脂肪的测定》，采用索氏提取法提取冬樱花果仁中的油脂。将云南冬樱花果仁干燥后粉碎，过50目筛，准确称取1g的云南冬樱花果仁粉，用滤纸包好后放入索氏提取器中，加入一定量的石油醚，在一定温度下提取一段时间后，放入电热鼓风干燥箱，挥发石油醚，直至恒重，得到云南冬樱花果仁粗脂肪。脂肪得率的计算如式(1)所示：
粗脂肪得率(％)＝m1/m2×100(1)
式(1)中，m1为云南冬樱花果仁粗脂肪的质量/g；m2为云南冬樱花果仁的质量/g。
1.5.2单因素实验
1.5.2.1提取温度对冬樱花果仁粗脂肪得率的影响
准确称取1g的云南冬樱花果仁粉，用滤纸包好后放入索氏提取器中，加入料液比1:25(g/mL)的石油醚，分别在65、70、75、80、85℃的提取温度下，提取2h，然后放入电热鼓风干燥箱，挥发石油醚，直至恒重，得到冬樱花果仁粗脂肪。
1.5.2.2提取时间对冬樱花果仁粗脂肪得率的影响
准确称取1g的云南冬樱花果仁粉，在索氏提取器中放入滤纸包好的冬樱花果仁粉，然后加入料液比为1:25(g/mL)的石油醚，在条件为75℃提取温度下，分别提取1、1.5、2、2.5、3h，然后放入电热鼓风干燥箱，挥发石油醚，直到接收瓶重量不再变化，得到冬樱花果仁粗脂肪。
1.5.2.3料液比对冬樱花果仁粗脂肪得率的影响
准确称取1g的云南冬樱花果仁粉，用在索氏提取器中放入滤纸包好的冬樱花果仁粉，分别加入云南冬樱花果仁粉和石油醚的料液比为1:15、1:20、1:25、1:30、1:35(g/mL)，在条件为75℃提取温度下，提取2h，然后放入电热鼓风干燥箱，挥发石油醚，直至恒重，得到冬樱花果仁粗脂肪。
1.5.3响应面试验
根据单因素实验结果，采用Central Composite Design方法，设计三因素五水平试验，以提取温度(X1)、提取时间(X2)和料液比(X3)为自变量，使用Design-Expert 8.0.6软件进行响应面试验设计和结果方差分析。
1.5.4脂肪酸组成分析
1.5.4.1样品制备
称取云南冬樱花果仁粗脂肪样品0.25g，将其放入25mL具塞试管之中，随后在其中加入5.0mL 0.5mol/L氢氧化钠-甲醇溶液，将其摇匀之后，于50℃的条件下反应30min，隔10min将样品进行摇匀，反应完后取出样品，放置在室温的条件下2h，隔30min将样品进行摇匀。然后加入5mL正己烷与样品当中，摇匀30s，放置于室温下静置，将上层清夜装入样品瓶中，用于GC-MS分析。
1.5.4.2GC-MC条件
色谱柱：Agilent HP-INNOWAX石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)；进样口温度250℃，载气：氦气(纯度为99.999％，流量为1.20mL/min)。柱箱温度：初始温度为100℃，保留5min，以3℃/min的速度升至230℃，保留15min；进样量1μL，分流比为20:1。传输线温度280℃。
1.5.5数据分析
所有样品重复3次，采用SPSS 22.0软件，通过t检验方法进行ANOVA分析。采用Design-Expert 8.0.6，进行响应面试验设计。
2、结果与分析
2.1单因素实验结果
2.1.1提取时间对云南冬樱花果仁粗脂肪得率的影响
由图2可知，随着提取时间的增加，粗脂肪得率先呈增长趋势，后趋于平缓。在1h～2h之间，云南冬樱花果仁的粗脂肪得率随着时间的增加而明显升高，在2h后云南冬樱花果仁粗脂肪得率增加不明显，变化范围趋于平缓，可能是云南冬樱花果仁粗脂肪已基本提取出来。考虑到提取时间越长，脂肪越容易氧化，故提取时间选取2h为宜。
2.1.2提取温度对云南冬樱花果仁粗脂肪得率的影响
由图3可知，云南冬樱花果仁粗脂肪得率随着随着提取温度的升高而增加，后趋于平缓。温度小于75℃时，云南冬樱花果仁粗脂肪得率升高明显，原因可能是随着温度的升高，分子的无规则运动速度加快，扩散速率提高，云南冬樱花果仁粗脂肪得率上升。当温度达到75℃时，云南冬樱花果仁粗脂肪的提取率升高不明显，可能是因为云南冬樱花果仁中的粗脂肪已基本提取出来。考虑到能耗问题，温度不宜过高。因此选择75℃为最佳的提取温度。
2.1.3提取温度对云南冬樱花果仁粗脂肪得率的影响
由图4可知，随着料液比的增加，云南冬樱花果仁的粗脂肪得率先呈增长趋势，后趋于平缓。原因是随着料液比的增加，云南冬樱花果仁粉与石油醚的接触面积增大，云南冬樱花果仁粗脂肪得率上升。料液比达到1:25(g/mL)时，云南冬樱花果仁的粗脂肪得率趋于平缓，可能是因为云南冬樱花果仁中的粗脂肪已基本提取出来。因此考虑到生产成本，料液比选取1:25(g/mL)为宜。
2.2响应面试验结果
根据单因素实验结果，设计三因素五水平试验。其中提取时间(X1)、提取温度(X2)和料液比(X3)3个因素为自变量，响应面试验设计和结果见表1和2。
表1因素水平表
表2响应面试验设计与结果
利用Design Expert软件对试验结果进行分析，得到回归模型如下：
Y＝-198.03+12.02X1+3.80X2+5.49X3-4.75X12-0.025X22-0.047X32+0.31X1X2-0.48X1X3-0.017X2X3。
由表3可知，该模型的F＝96.27，P<0.0001，说明回归模型高度显著，失拟项P＝0.1892>0.05，说明失拟项不显著，相关系数R2＝0.9886，RAdj2＝0.9783，说明实际情况与回归方程拟合良好，能够反映云南冬樱花果仁粗脂肪得率与提取时间、提取温度和料液比的关系。计算得出云南冬樱花果仁粗脂肪得率最大时的条件为料液比1:25.67(g/mL)，在75.67℃的条件下，反应2.07h，云南冬樱花果仁粗脂肪得率的最大理论值为41.08％。
表3回归模型方差分析表
注：*表示p<0.05为显著；**表示p<0.01为极显著。
2.2.1响应曲面图分析
根据回归模型做响应曲面图。由图5a所示，沿提取时间轴向等高线更为密集，说明提取时间对云南冬樱花果仁粗脂肪得率的影响更加显著，提取温度和提取时间的相互作用对云南冬樱花果仁粗脂肪得率的影响显著。由图5b可知，提取时间比料液比显著，曲面相对陡峭。沿反应温度轴向等高线更为密集，而料液比轴向等高线稀疏，表示云南冬樱花果仁粗脂肪得率对提取时间的变化敏感，提取时间和料液比的相互作用对云南冬樱花果仁粗脂肪得率的影响显著。由图5c可知，料液比对云南冬樱花果仁粗脂肪得率的影响比提取温度更加显著，曲面相对陡峭。沿料液比轴向等高线密集，而提取温度轴向等高线稀疏，说明云南冬樱花果仁粗脂肪得率对料液比的变化比对提取温度的变化更为敏感，料液比和提取温度的相互作用对云南冬樱花果仁粗脂肪得率的影响显著。
2.2.2验证实验
响应面试验结果表明最佳工艺条件为料液比1:25.67(g/mL)，在75.67℃的条件下，反应2.07h，云南冬樱花果仁粗脂肪得率的理论值为41.08％。考虑操作的实际，修正3个数据组合为料液比1:26(g/mL)，反应温度76℃，反应时间2.1h，在该条件下，进行了验证试验，得到云南冬樱花果仁粗脂肪得率的为40.86％(RSD＝0.56％)，与理论值十分接近，说明该方程与实际情况拟合很好，充分验证了所建模型的正确性，此工艺条件准确可靠。
2.3云南冬樱花果仁粗脂肪中脂肪酸成分
采用GC-MC法测定云南冬樱花果仁粗脂肪的脂肪酸成分，检测出6种脂肪酸。通过归一化法计算6种脂肪酸的相对含量，结果如表4和图6所示，云南冬樱花果仁粗脂肪的脂肪酸成分中，主要包括油酸(C18:1，32.08％)、9,11,13-十八碳三烯酸(C18:3，30.44％)、亚油酸(C18:2，29.3％)。其中，不饱和脂肪酸由多不饱和脂肪酸亚油酸、9,11,13-十八碳三烯酸和单不饱和脂肪酸油酸组成，占比91.82％。饱和脂肪酸则由棕榈酸、硬脂酸和二十烷酸组成，占比8.18％。
天然的共轭亚麻酸主要以甘油酯的形式存在某些植物种子油中，如桐油和樱桃籽油，而且研究发现它具有降血脂、减肥和抗癌等生理活性，根据谱图分析，云南冬樱花果仁粗脂肪中共轭亚麻酸为α-桐酸(9c，11t，13t-十八碳三烯酸)，其含量占总脂肪酸的30.44％。
表4云南冬樱花果仁粗脂肪的脂肪酸组成与相对含量
注：SFA(saturated fatty acid)：饱和脂肪酸；UFA(unsaturated fatty acid)：不饱和脂肪酸；MUFA(monounsaturated fatty acid)：单不饱和脂肪酸；PUFA(polyunsaturated fatty acid)：多不饱和脂肪酸。
3、讨论
石珂心等研究发现，同为樱属的樱桃，其樱桃仁油以油酸和亚油酸为主的不饱和脂肪酸含量为83.29％。王姝等研究发现，樱桃籽油中以油酸和亚油酸为主的不饱和脂肪酸含量为87.85％。此外，还含有共轭亚麻酸的异构体为α-桐酸(9c，11t，13t-十八碳三烯酸)，占总脂肪酸的9.92％。而本实验通过索氏提取法所提取的云南冬樱花果仁粗脂肪，不饱和脂肪酸为91.82％。石珂心和王姝制得的樱桃仁油的不饱和脂肪酸与本结果相差不大，但均低于本实验结果，可能是因为品种的不同，造成了实验结果的差异。且在本实验中检测出了α-桐酸这种物质，其相对含量占总脂肪酸的30.44％，远远高于王姝所制得的樱桃籽油中α-桐酸的含量。
α-桐酸为共轭十八碳三烯酸的一种异构体，具有抗癌、降血脂和减肥等有益生理功能。在本实验结果中，α-桐酸占总脂肪酸含量的30.44％。下一步的研究可对云南冬樱花果仁的油脂进行脱色、除臭和去毒等处理，然后通过气相色谱法提纯α-桐酸，进一步的研究α-桐酸的这种物质的安全性，以及其生理功能，或许能够将其运用到食品等行业，为确定α-桐酸的营养价值，促进云南冬樱花资源的开发提供基础。
亚油酸是需要从食物中获得的一种必需脂肪酸，人体自身无法自身合成，具有降低胆固醇和预防动脉粥样硬化等功能。此外，亚油酸还是一些功能性多不饱和脂肪酸的前体，在人体中有着非常重要的作用，每天摄入一定量的亚麻酸，才能维持人体的正常生理代谢。随着经济的增长，亚麻酸的应用前景更加良好。在本实验结果中，亚油酸的含量占脂肪酸总量的29.3％。因此，云南冬樱花果仁油具有较高的营养价值，可作为多不饱和脂肪酸的重要来源，为云南冬樱花的开发与利用提供新思路。
4、结果
本发明利用索氏提取法提取云南冬樱花果仁的粗脂肪，通过单因素实验和响应面实验优化得到云南冬樱花果仁的粗脂肪提取的最佳工艺为料液比1:26(g/mL)，反应温度76℃，反应时间2.1h，此条件下粗脂肪的得率为40.86％。通过GC-MC法测定云南冬樱花果仁粗脂肪的脂肪酸成分，检测出6种脂肪酸，主要包括油酸(C18:1，32.08％)、9,11,13-十八碳三烯酸(C18:3，30.44％)、亚油酸(C18:2，29.3％)。其中，不饱和脂肪酸由多不饱和脂肪酸亚油酸、9,11,13-十八碳三烯酸和单不饱和脂肪酸油酸组成，占比91.82％。饱和脂肪酸则由棕榈酸、硬脂酸和二十烷酸组成，占比8.18％。云南冬樱花果仁油具有较高的营养价值，可作为一种新型的植物油料，为云南冬樱花的开发与利用提供新思路。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
