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酶改善吸水性和/或白度的用途

2021-03-14 04:10:09

酶改善吸水性和/或白度的用途

  技术领域

  本发明涉及酶(特别是纤维素酶)用于改善表面(例如纺织品表面)的吸水性和/或改善其白度的用途,其中所述用途是在柔软剂中。

  序列表的引用

  本申请含有计算机可读形式的序列表。将所述计算机可读形式通过参考并入本文。

  背景技术

  酶在衣物洗涤剂中的用途是熟知的。此外,已知出于洗衣目的,使用能够降解纤维素材料的酶。然而,洗衣用纤维素降解酶应当仔细选择,因为洗衣纺织品用作酶的底物。

  在洗涤机中,纤维素材料的降解常常是一个挑战。在用能够降解纤维素材料的酶进行洗涤的过程中,纤维素纤维可能会被从纺织品上除去,并往往在洗涤机中堵塞过滤器、管道和排水管。因此,需要时常手动清洁排水管和过滤器。

  对织物和纺织品的穿着、洗涤和滚筒干燥使纺织品暴露于机械应力,所述机械应力通过破坏织物/纺织品中的纤维而损坏纺织品和织物,并且从而使纺织品/织物被绒毛和绒球覆盖。这给予织物或纺织品磨损的外观。

  已知在衣物洗涤剂中使用纤维素酶和其他酶。柔软剂通常用来使衣服感觉更光滑/更柔软。然而,由于柔软剂的功能是用带电的化学化合物覆盖织物表面,这可能限制例如毛巾的吸水特性。因此,需要在不损害使织物感觉光滑和柔软的柔软剂特性的情况下改善吸水性。

  发明内容

  在一个方面中,本发明涉及酶的通过将酶添加至柔软剂中来改善纺织品的吸水性的用途。

  在另一个方面中,本发明还涉及酶的通过将酶添加至柔软剂中来改善纺织品的白度的用途。

  在另一个方面中,本发明涉及用于在改善纺织品的吸水性和/或白度中使用的柔软剂组合物,其中所述柔软剂组合物包含家族GH45纤维素酶,优选与SEQ%20ID%20NO:1、2、3、4或5具有至少60%序列同一性的纤维素酶。

  定义

  抗起球:术语“抗起球”表示从纺织品表面去除绒球和/或预防在纺织品表面上形成绒球。

  纤维素分解酶或纤维素酶:术语“纤维素分解酶”或“纤维素酶”意指水解纤维素材料的一种或多种(例如,若干种)酶。此类酶包括一种或多种内切葡聚糖酶、一种或多种纤维二糖水解酶、一种或多种β-葡糖苷酶、或其组合。用于测量纤维素分解活性的两种基本方法包括:(1)测量总纤维素分解活性,和(2)测量单独的纤维素分解活性(内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶和β-葡糖苷酶),如Zhang等人,Outlook%20for%20cellulase%20improvement:Screening%20and%20selection%20strategies[纤维素酶改进的展望:筛选和选择策略],2006,Biotechnology%20Advances[生物技术进展]24:452-481中综述。通常使用不溶性底物,包括Whatman№1滤纸、微晶纤维素、细菌纤维素、藻类纤维素、棉、预处理的木质纤维素等,测量总纤维素分解活性。最常见的总纤维素分解活性测定是将Whatman№1滤纸用作底物的滤纸测定。所述测定是由国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)(Ghose,1987,Measurement%20ofcellulase%20activities[纤维素酶活性的测量],Pure%20Appl.Chem.[纯粹与应用化学]59:257-68)确立的。

  出于本发明的目的,通过测量在下述条件下由一种或多种纤维素分解酶进行的纤维素材料水解的增加来确定纤维素分解酶活性:1-50mg的纤维素分解酶蛋白/g的PCS(或其他预处理的纤维素材料)中纤维素在合适的温度(例如,50℃、55℃、或60℃)持续3-7天,与未添加纤维素分解酶蛋白的对照水解相比较。典型条件为:1ml反应,洗涤或未洗涤的PCS,5%不溶性固体,50mM乙酸钠(pH%205),1mM%20MnSO4,50℃、55℃、或60℃,72小时,通过 HPX-87H柱(伯乐实验室有限公司(Bio-Rad Laboratories,Inc.),美国加州赫拉克勒斯)进行的糖分析。

  纤维素材料:术语“纤维素材料”意指含有纤维素的任何材料。生物质的初生细胞壁中的主要多糖是纤维素,第二丰富的是半纤维素,而第三丰富的是果胶。细胞停止生长后产生的次生细胞壁也含有多糖,并且它通过与半纤维素共价交联的聚合木质素得到强化。纤维素是脱水纤维二糖的均聚物,因此是线性β-(1-4)-D-葡聚糖,而半纤维素包括多种化合物,例如具有一系列取代基以复杂支链结构的木聚糖、木葡聚糖、阿拉伯糖基木聚糖、以及甘露聚糖。尽管纤维素一般为多形态的,但发现其在植物组织中主要作为平行葡聚糖链的不溶性晶体基质存在。半纤维素通常氢键结合至纤维素以及其他半纤维素,这有助于稳定细胞壁基质。

  纤维素通常发现于例如蔬菜食物产品,如沙拉、番茄、菠菜、卷心菜、谷物等。

  洗涤剂组分:本文将术语“洗涤剂组分”定义为意指可以用于衣物的洗涤剂组合物中的化学品的类型。洗涤剂组分的实例是:表面活性剂、助洗剂、螯合剂(chelator)或螯合试剂(chelating agent)、漂白系统或漂白组分、聚合物、织物调理剂、增泡剂、抑泡剂、染料、香料、晦暗抑制剂、杀细菌剂、杀真菌剂、污垢悬浮剂、防腐蚀剂、酶抑制剂或稳定剂、酶激活剂、一种或多种转移酶、水解酶、氧化还原酶、上蓝剂和荧光染料、抗氧化剂、和增溶剂。

  洗涤剂组合物:术语“洗涤剂组合物”是指用于从有待清洁的表面(例如纺织品表面)去除不希望的化合物的组合物。所述洗涤剂组合物可以用于例如清洁纺织品,用于家用清洁和工业清洁二者。所述术语涵盖选择用于希望的具体类型的清洁组合物和产品的形式(例如,液体、凝胶、粉末、颗粒、糊状、或喷雾组合物)的任何材料/化合物,并且包括但不限于洗涤剂组合物(例如,液体和/或固体衣物洗涤剂和精细织物洗涤剂;织物清新剂;织物柔软剂;以及纺织品和衣物预去污剂/预处理)。所述洗涤剂组合物可以含有一种或多种酶,例如:半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、聚戊糖酶、马拉纳酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、DNA酶、叶绿素酶、淀粉酶、过水解酶、过氧化物酶、黄原胶酶、及其混合物。所述洗涤剂组合物可以进一步包含洗涤剂组分:例如表面活性剂、助洗剂、螯合剂或螯合试剂、漂白系统或漂白组分、聚合物、织物调理剂、增泡剂、抑泡剂、染料、香料、晦暗抑制剂、杀细菌剂、杀真菌剂、污垢悬浮剂、防腐蚀剂、酶抑制剂或稳定剂、酶激活剂、一种或多种转移酶、水解酶、氧化还原酶、上蓝剂和荧光染料、抗氧化剂、和增溶剂。

  织物柔软剂:织物柔软剂(也称为织物调理剂或仅称为柔软剂)是一种典型地在洗涤机的漂洗周期期间或在用手洗涤时施用至衣物上的组合物。织物柔软剂可以作为溶液和固体获得,也可以浸渍在干衣机中使用的烘衣纸中。

  织物柔软试剂:织物柔软试剂(或柔软试剂)是包含在织物柔软剂组合物中的成分,例如带电的化学化合物。这些化合物引起织物中的线从纺织品表面抬起,并且从而赋予所述织物纺织品的柔软感。在一个实施例中,所述织物柔软试剂是一种或多种阳离子柔软剂。阳离子柔软剂通过静电引力与纺织品表面上的带负电基团结合并中和它们的电荷,并从而赋予润滑性。

  片段:术语“片段”意指从成熟多肽主要部分的氨基和/或羧基末端缺失一个或多个(例如,若干个)氨基酸的多肽;其中所述片段具有酶活性。在一个方面中,片段含有酶的成熟多肽的至少85%,例如至少90%或至少95%的氨基酸残基。

  半纤维素分解酶或半纤维素酶:术语“半纤维素分解酶”或“半纤维素酶”意指可对半纤维素材料进行水解的一种或多种(例如,若干种)酶。参见,例如,Shallom,D.和Shoham,Y.,Microbial hemicellulases[微生物半纤维素酶],Current Opinion In Microbiology[微生物学新见],2003,6(3):219-228)。半纤维素酶是植物生物质降解中的关键组分。半纤维素酶的实例包括但不限于:乙酰甘露聚糖酯酶、乙酰木聚糖酯酶、阿拉伯聚糖酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、香豆酸酯酶、阿魏酸酯酶、半乳糖苷酶、葡糖醛酸糖苷酶、葡糖醛酸酯酶、甘露聚糖酶、甘露糖苷酶、木聚糖酶、以及木糖苷酶。这些酶的底物(半纤维素)是支链和线性多糖的异质群体,所述多糖经由氢与植物细胞壁中的纤维素微纤维键合,从而将它们交联成稳固网络。半纤维素还共价附接至木质素,从而与纤维素一起形成高度复杂的结构。半纤维素的可变结构和组织要求许多酶的协同作用以使其完全降解。半纤维素酶的催化模块是水解糖苷键的糖苷水解酶(GH),或是水解乙酸或阿魏酸侧基团的酯键的碳水化合物酯酶(CE)。这些催化模块基于其一级序列的同源性,可以分配到GH和CE家族。一些家族(具有总体上类似的折叠)可以进一步分组为宗族(clan),以字母标记(例如,GH-A)。在碳水化合物活性酶(CAZy)数据库中可得到这些以及其他碳水化合物活性酶的最翔实和最新的分类。可以根据Ghose和Bisaria,1987,Pure&AppI.Chem[纯粹与应用化学],59:1739-1752,在合适的温度(例如50℃、55℃、或60℃)和pH(例如5.0或5.5)下测量半纤维素分解酶活性。

  家族GH45纤维素酶:如本文所用,术语“家族GH45纤维素酶”是指糖基水解酶,其是催化糖基键水解的酶。存在超过100种已经被分类的糖基水解酶,参见Henrissat等人,(1991),A classification of glycosyl hydrolases based on amino-acid sequencesimilarities[基于氨基酸序列相似性的糖基水解酶分类],J.Biochem.[生物化学杂志],280:309-316和CAZY网站,www.cazy.org。迄今为止,45家族(GH45)的糖苷水解酶已被鉴定为内切葡聚糖酶(EC 3.2.1.4)。通常被称为“纤维素酶”的酶落入所述定义范围内。此类酶还包含可以被称为内切葡聚糖酶的酶。

  漂洗周期:本文将术语“漂洗周期”定义为漂洗操作,其中通过循环水并且任选地机械处理纺织品,将所述纺织品暴露于水一段时间,以便漂洗所述纺织品,并且最后去除多余的水。在相同或不同温度下,漂洗周期可以重复一次、两次、三次、四次、五次或甚至六次。

  白度:本文将术语“白度”定义为在不同领域并且针对不同顾客具有不同含义的广义术语。白度的损失可以例如归因于灰化、黄化、或光学增亮剂/调色剂的去除。灰化和黄化可归因于污垢再沉积、身体污垢、来自例如铁和铜离子或染料转印的着色。白度可包括来自以下列表的一个或若干个问题:着色剂或染料作用;不完全污渍去除(例如身体污垢、皮脂等);再沉积(去除的污垢与纺织品的其他部分(弄脏的或未弄脏的)再关联);在应用过程中纺织品的化学变化;以及颜色的澄清或淡色化。

  序列同一性:两个氨基酸序列之间或两个核苷酸序列之间的关联度通过参数“序列同一性”来描述。

  出于本发明的目的,使用如在EMBOSS软件包(EMBOSS:欧洲分子生物学开放软件包(EMBOSS:The European Molecular Biology Open Software Suite),Rice等人,2000,Trends Genet.[遗传学趋势]16:276-277)(优选5.0.0版本或更新版本)的尼德尔程序中所实施的尼德曼-翁施算法(Needleman-Wunsch algorithm)(Needleman和Wunsch,1970,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]48:443-453)来确定两个氨基酸序列之间的序列同一性。所使用的参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5、以及EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版本)取代矩阵。使用尼德尔标记的“最长同一性”的输出(使用非简化(-nobrief)选项获得)作为同一性百分比并且如下计算:

  (同一的残基x 100)/(比对长度-比对中的空位总数)

  出于本发明的目的,使用如在EMBOSS软件包(EMBOSS:欧洲分子生物学开放软件包(EMBOSS:The European Molecular Biology Open Software Suite),Rice等人,2000,同上)(优选5.0.0版本或更新版本)的尼德尔程序中所实施的尼德曼-翁施算法(Needleman和Wunsch,1970,同上)来确定两个脱氧核糖核苷酸序列之间的序列同一性。所使用的参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5、以及EDNAFULL(NCBI NUC4.4的EMBOSS版本)取代矩阵。使用尼德尔标记的“最长同一性”的输出(使用非简化(-nobrief)选项获得)作为同一性百分比并且如下计算:

  (同一的脱氧核糖核苷酸x 100)/(比对长度-比对中的空位总数)

  柔软剂:如本文所用,术语“柔软剂”是指特别是用于洗衣环境的组合物。柔软剂主要用于洗衣过程中的漂洗步骤,其中在用衣物洗涤剂洗涤后,将柔软剂添加至漂洗水中。织物柔软剂用带电的化学化合物覆盖织物表面,中和织物的电荷并导致线从表面“立起”,从而使织物感觉更柔软并使其更蓬松。

  变体:术语“变体”意指在一个或多个(例如若干个)位置包含改变,即取代、插入和/或缺失的具有酶活性的多肽。取代意指用不同的氨基酸替代占据某一位置的氨基酸;缺失意指去除占据某一位置的氨基酸;而插入意指在邻接并且紧随占据某一位置的氨基酸之后添加氨基酸。

  洗涤周期:本文将术语“洗涤周期”定义为洗涤操作,其中通过在洗涤机中循环洗涤液和纺织品,将所述纺织品暴露于洗涤液一段时间。在相同或不同温度下,洗涤周期可以重复一次、两次、三次、四次、五次或甚至六次。洗涤周期之后通常是漂洗周期,并且最后是离心周期(从纺织品中去除水)。确定衣物洗涤期间的洗涤周期对于本领域技术人员而言是已知的。

  洗涤液:术语“洗涤液”旨在意指任选地包括用于洗衣的酶的水和洗涤剂的溶液或混合物。

  具体实施方式

  本发明涉及酶的通过将所述酶添加至柔软剂中来改善纺织品的吸水性的用途。本发明还涉及用于改善纺织品的吸水性的方法,所述方法包括使表面(例如织物表面)与酶和柔软剂接触。本发明的发明人已发现,与使用不含酶的柔软剂相比,通过将酶添加至柔软剂中使吸水性提高。典型地,在洗涤机的漂洗周期期间将柔软剂施用至衣物上。典型地,织物柔软剂可以作为溶液和固体获得,也可以浸渍在干衣机中使用的烘衣纸中。

  当改善纺织品的吸水性时,它的益处在于物品(例如毛巾)在用于干燥皮肤或表面时可以吸收更多的水。

  本发明还涉及酶的通过将所述酶添加至柔软剂中来改善纺织品的白度的用途。本发明涉及用于改善纺织品的白度的方法,所述方法包括使表面(例如织物表面)与酶和柔软剂接触。白色衣服经常在使用和反复洗涤后变成淡灰色泽。本发明的发明人已发现,与使用不含酶的柔软剂相比,通过将酶添加至柔软剂中可以维持衣服的白度。

  酶用于洗涤表面的用途是通常已知的。例如,纤维素酶已长期用于衣物洗涤剂中,以去除织物表面上的绒毛和绒球。

  在特定的实施例中,用于柔软剂中的酶是家族GH45纤维素酶。

  先前未显示出在柔软剂中使用家族GH45纤维素酶可以改善织物的吸水性和/或白度。如本发明的实例中可以看出,当将纤维素酶添加至柔软剂中时,吸水性和白度均得到改善。

  在所述实例之一中,吸水性被评估为1hr后的水位(cm),其中将纺织品垂直放置在烧杯中。在另外的实施例中,所述测定包括以下步骤:在评估吸水性之前将纺织品预洗涤多次,并且任选地,在每次洗涤之间将纺织品进行滚筒干燥。

  在另一个实例中,通过在460nm处的反射定义的吸光度来测量织物的白度。在另外的实施例中,所述测定包括以下步骤:在评估白度之前将纺织品预洗涤多次,并且任选地,在每次洗涤之间将纺织品进行滚筒干燥。

  在一个实施例中,酶是与SEQ ID NO:1、2、3、4或5具有至少60%序列同一性的纤维素酶。

  纤维素酶可以是与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、或SEQID NO:5具有至少60%序列同一性的任一种纤维素酶,优选地,纤维素酶与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、或SEQ ID NO:5、或其具有纤维素酶活性的片段具有至少65%,例如70%、例如75%、例如80%、例如85%、例如90%、例如91%、例如92%、例如93%、例如94%、例如95%、例如96%、例如97%、例如98%、例如99%、或例如100%序列同一性。

  柔软剂也可以称为“织物柔软剂”或甚至“织物调理剂”,并且这种柔软剂的组分对各种织物的亲和力可以不同。一些在基于纤维素的纤维(即,棉)上效果更好,另一些对疏水性材料(像尼龙、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚丙烯腈等)具有更高的亲和力。其他基于硅酮的化合物(例如聚二甲基硅氧烷)通过润滑纤维来起作用。还可以包括具有含胺或含酰胺官能团的衍生物。这些基团改善了柔软剂与织物的结合。

  由于柔软剂通常是疏水性的,它们通常以乳液形式存在。在早期配制品中,制造商将皂用作乳化剂。乳液通常是不透明的乳状液体。然而,也存在微乳液,其中疏水相的液滴基本上可以更小。微乳液的优势是较小的颗粒渗透到纤维中的能力增强。

  柔软剂可以是阳离子和非离子表面活性剂的混合物作为乳化剂。另一种方法是聚合物网络,即乳液聚合物。

  在一个实施例中,柔软剂包含阳离子表面活性剂,例如酯季铵盐。特征性地,阳离子含有一个或两个来源于脂肪酸的长烷基链。其他阳离子化合物可以来源于咪唑鎓、经取代的胺盐或季烷氧基铵盐。

  据信,阳离子表面活性剂可对酶改善吸水性和/或白度的能力具有有益的影响。据推测,当将酶添加至柔软剂中时,柔软剂中的表面活性剂水平可能会降低。这将对环境产生有益的影响,因为表面活性剂能够对环境造成伤害。

  在一个实施例中,柔软剂的pH为至少2.0,例如至少2.4,如至少3.0。添加酶的柔软剂的pH典型地为2.0至5.0,优选地在2.4至4.5的范围内,或者甚至更优选在3.0至3.5的范围内。因此,添加至柔软剂中的酶是在此pH下稳定的酶。当添加酶的组合物(例如柔软剂)的pH处于酶的最佳pH范围内时,所述pH不会以负面方式影响酶。因此,据信柔软剂的pH和酶在其功能上彼此互补。因此,酶将提供白度和/或改善的吸水性,而pH将确保表面活性剂起作用并且为处理过的织物带来柔软性。

  在一个实施例中,当用包含酶的柔软剂漂洗具有改善的吸水性和/或白度的纺织品时,已在洗涤过程中对所述纺织品进行了预洗涤。

  通常,在洗涤纺织品(例如衣服)时,洗涤周期包括润湿步骤(即,将水倒入机器中,从而使纺织品变湿)、洗涤步骤(即,将衣物洗涤剂添加至洗涤液体中)、漂洗步骤(即,任选地将柔软剂添加至漂洗液体中)、以及最后的离心步骤(即,将纺织品离心以在干燥纺织品之前使纺织品释放尽可能多的水)。

  在一个实施例中,纺织品是棉、聚酯或其混合物。

  纺织品可以是任何纯的形式,例如100%棉、100%聚酯等,或者可以是不同类型纺织品的任何共混物,例如50%棉和50%聚酯。因此,在一个实施例中,纺织品是至少50%聚酯和至少20%棉的混合物。

  在另一个实施例中,纺织品是棉。

  洗涤过程可以在各种温度下进行,这取决于纺织品、纺织品上的污垢水平、或可能取决于温度的任何其他方面。本发明不限于任何特定温度。因此,在一个实施例中,在至少5℃,例如至少10℃、至少15℃、至少20℃、至少25℃、至少30℃、至少35℃、至少40℃、至少45℃、或至少50℃的温度下进行预洗涤。

  添加至柔软剂中的酶的浓度可以变化,但是在一个实施例中,以所述柔软剂的至少0.01%的浓度添加所述酶。

  在另一个方面中,本发明还涉及用于在改善纺织品的吸水性和/或白度中使用的柔软剂组合物,其中所述柔软剂组合物包含家族GH 45纤维素酶,优选与SEQ ID NO:1、2、3、4或5具有至少60%序列同一性的纤维素酶。

  柔软剂组合物可以进一步包含防腐剂和/或杀生物剂。防腐剂和/或杀生物剂选自甲醇异噻唑啉酮或甲基氯异噻唑啉酮、或甲醇异噻唑啉酮和甲基氯异噻唑啉酮的组合。甲醇异噻唑啉酮和甲基氯异噻唑啉酮具有防腐和杀生物效果。

  在液体柔软剂组合物的情况下,向柔软剂组合物中添加酸使得水溶性金属盐至少部分地溶解在所述组合物中。酸还有助于在漂洗周期期间至少部分地减少硬表面上的沉淀。酸还可以稳定液体柔软剂组合物以防止使用前产品中的沉淀。

  在固体柔软剂组合物的情况下,向柔软剂组合物中添加酸使得水溶性金属盐一旦释放,至少部分地快速溶解于洗衣设备的洗涤和/或漂洗液中,以阻止不溶性材料的生成和/或沉积在表面,例如在纺织品表面。

  在一个实施例中,可以将多于一种酶添加至柔软剂中,并因此,除了用于改善纺织品的吸水性和/或白度的至少一种酶之外,还可以添加其他酶。所述一种或多种酶可以选自由以下组成的组:淀粉酶、半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、聚戊糖酶、马拉纳酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、DNA酶、叶绿素酶、淀粉酶、过水解酶、过氧化物酶、蛋白酶、黄原胶酶、及其混合物。下文进一步详细描述了酶。

  可以用于本发明的漂洗助剂组合物中的合适的淀粉酶可以是α-淀粉酶或葡糖淀粉酶并且可以是细菌或真菌来源的。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。淀粉酶包括例如从芽孢杆菌属、例如地衣芽孢杆菌的特定菌株(更详细地描述于GB 1,296,839中)获得的α-淀粉酶。

  合适的淀粉酶包括具有WO 95/10603中的SEQ ID NO:2的淀粉酶或其与SEQ IDNO:3具有90%序列同一性的变体。优选的变体描述于WO94/02597、WO 94/18314、WO 97/43424中以及WO 99/019467的SEQ ID NO:4中,例如在一个或多个以下位置中具有取代的变体:15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408和444。

  不同的合适的淀粉酶包括具有WO 02/010355中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或其与SEQ ID NO:6具有90%序列同一性的变体。SEQ ID NO:6的优选的变体是在位置181和182中具有缺失并且在位置193中具有取代的那些。

  其他合适的淀粉酶是包含示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的来源于解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:4中的地衣芽孢杆菌α-淀粉酶的残基36-483的杂合α-淀粉酶或其具有90%序列同一性的变体。此杂合α-淀粉酶的优选的变体是在以下位置的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些:G48、T49、G107、H156、A181、N190、M197、I201、A209和Q264。包含示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的来源于解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和SEQ ID NO:4的残基36-483的杂合α-淀粉酶的最优选的变体是具有以下取代的那些:M197T;H156Y+A181T+N190F+A209V+Q264S;或G48A+T49I+G107A+H156Y+A181T+N190F+I201F+A209V+Q264S。

  另外的合适的淀粉酶是具有WO 99/019467中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或其与SEQID NO:6具有90%序列同一性的变体。SEQ ID NO:6的优选的变体是在以下位置的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些:R181、G182、H183、G184、N195、I206、E212、E216和K269。特别优选的淀粉酶是在位置R181和G182、或位置H183和G184中具有缺失的那些。

  可以使用的另外的淀粉酶是具有WO 96/023873的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQID NO:2或SEQ ID NO:7的那些或其与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ IDNO:7具有90%序列同一性的变体。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:7的优选的变体是在以下位置的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些:140、181、182、183、184、195、206、212、243、260、269、304和476,使用WO 96/023873的SEQ ID 2用于编号。更优选的变体是在选自181、182、183和184的两个位置(例如181和182、182和183、或位置183和184)中具有缺失的那些。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7的最优选的淀粉酶变体是在位置183和184中具有缺失并且在位置140、195、206、243、260、304和476的一个或多个中具有取代的那些。

  可以使用的其他淀粉酶是具有WO 08/153815的SEQ ID NO:2、WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的淀粉酶或其与WO 08/153815的SEQ ID NO:2具有90%序列同一性或与WO01/66712中的SEQ ID NO:10具有90%序列同一性的变体。WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的优选的变体是在以下位置的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些:176、177、178、179、190、201、207、211和264。

  其他淀粉酶是WO 2016/203064的SEQ ID NO:1的变体,其与SEQ ID NO:1具有至少75%的序列同一性。优选的变体是包含在对应于SEQ ID NO:1的位置1、54、56、72、109、113、116、134、140、159、167、169、172、173、174、181、182、183、184、189、194、195、206、255、260、262、265、284、289、304、305、347、391、395、439、469、444、473、476、或477的一个或多个位置处的修饰的变体,其中所述α-淀粉酶变体与SEQ ID NO:1具有至少75%但小于100%的序列同一性。

  另外的合适的淀粉酶是具有WO 09/061380的SEQ ID NO:2的淀粉酶或其与SEQ IDNO:2具有90%序列同一性的变体。SEQ ID NO:2的优选的变体是在以下位置的一个或多个中具有C-末端截短和/或取代、缺失或插入的那些:Q87、Q98、S125、N128、T131、T165、K178、R180、S181、T182、G183、M201、F202、N225、S243、N272、N282、Y305、R309、D319、Q320、Q359、K444和G475。SEQ ID NO:2的更优选的变体是在以下位置的一个或多个处具有取代的那些:Q87E,R、Q98R、S125A、N128C、T131I、T165I、K178L、T182G、M201L、F202Y、N225E,R、N272E,R、S243Q,A,E,D、Y305R、R309A、Q320R、Q359E、K444E以及G475K,和/或在位置R180和/或S181或T182和/或G183处具有缺失的那些。SEQ ID NO:2的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些:

  N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K;

  N128C+K178L+T182G+F202Y+Y305R+D319T+G475K;

  S125A+N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K;或

  S125A+N128C+T131I+T165I+K178L+T182G+Y305R+G475K,其中所述变体是C-末端截短的,并且任选地进一步包含在位置243处的取代和/或在位置180和/或位置181处的缺失。

  另外的合适的淀粉酶是具有WO 13184577的SEQ ID NO:1的淀粉酶或其与SEQ IDNO:1具有90%序列同一性的变体。SEQ ID NO:1的优选的变体是在以下位置的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些:K176、R178、G179、T180、G181、E187、N192、M199、I203、S241、R458、T459、D460、G476和G477。SEQ ID NO:1的更优选的变体是在以下位置的一个或多个中具有取代的那些:K176L、E187P、N192FYH、M199L、I203YF、S241QADN、R458N、T459S、D460T、G476K、以及G477K,和/或在位置R178和/或S179或T180和/或G181中具有缺失的那些。SEQ ID NO:1的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些:

  E187P+I203Y+G476K

  E187P+I203Y+R458N+T459S+D460T+G476K

  其中所述变体任选地进一步包含在位置241处的取代和/或在位置178和/或位置179处的缺失。

  另外的合适的淀粉酶是具有WO 10104675的SEQ ID NO:1的淀粉酶或其与SEQ IDNO:1具有90%序列同一性的变体。SEQ ID NO:1的优选的变体是在以下位置的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些:N21、D97、V128、K177、R179、S180、I181、G182、M200、L204、E242、G477和G478。SEQ ID NO:1的更优选的变体是在以下位置的一个或多个中具有取代的那些:N21D、D97N、V128I、K177L、M200L、L204YF、E242QA、G477K、以及G478K,和/或在位置R179和/或S180或I181和/或G182中具有缺失的那些。SEQ ID NO:1的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些:

  N21D+D97N+V128I

  其中所述变体任选地进一步包含在位置200处的取代和/或在位置180和/或位置181处的缺失。

  其他合适的淀粉酶是具有WO 01/66712中的SEQ ID NO:12的α-淀粉酶或与SEQ IDNO:12具有至少90%序列同一性的变体。优选的淀粉酶变体是在WO 01/66712中的SEQ IDNO:12的以下位置的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些:R28、R118、N174;R181、G182、D183、G184、G186、W189、N195、M202、Y298、N299、K302、S303、N306、R310、N314;R320、H324、E345、Y396、R400、W439、R444、N445、K446、Q449、R458、N471、N484。特别优选的淀粉酶包括具有D183和G184的缺失并且具有取代R118K、N195F、R320K和R458K的变体,以及另外在一个或多个选自下组的位置中具有取代的变体:M9、G149、G182、G186、M202、T257、Y295、N299、M323、E345和A339,最优选的是另外在所有这些位置中具有取代的变体。

  其他的实例是淀粉酶变体,例如在WO 2011/098531、WO 2013/001078和WO 2013/001087中描述的那些。

  可商购的淀粉酶是DuramylTM、TermamylTM、FungamylTM、StainzymeTM、StainzymePlusTM、NatalaseTM、Liquozyme X和BANTM(来自诺维信公司(Novozymes A/S))、以及RapidaseTM、PurastarTM/EffectenzTM、Powerase、Preferenz S1000、Preferenz S100和Preferenz S110(来自杰能科国际有限公司/杜邦公司(Genencor International Inc./DuPont))。

  合适的蛋白酶包括细菌、真菌、植物、病毒或动物来源的那些,例如植物或微生物来源。优选的是微生物来源。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。它可以是碱性蛋白酶,例如丝氨酸蛋白酶或金属蛋白酶。丝氨酸蛋白酶可以例如是S1家族的(例如胰蛋白酶)或S8家族的(例如枯草杆菌蛋白酶)。金属蛋白酶可以例如是来自例如M4家族的嗜热菌蛋白酶或其他金属蛋白酶,例如来自M5、M7或M8家族的那些。

  术语“枯草杆菌酶”是指根据Siezen等人,Protein Engng.[蛋白质工程]4(1991)719-737和Siezen等人,Protein Science[蛋白质科学]6(1997)501-523的丝氨酸蛋白酶亚组。丝氨酸蛋白酶是特征在于在活性位点具有与底物形成共价加合物的丝氨酸的蛋白酶的亚组。枯草杆菌酶可以被划分为6个亚类,即,枯草杆菌蛋白酶家族、嗜热蛋白酶家族、蛋白酶K家族、羊毛硫氨酸抗生素肽酶家族、Kexin家族和Pyrolysin家族。

  枯草杆菌酶的实例是来源于芽孢杆菌属的那些,例如描述于US 7262042和WO 09/021867中的迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)、嗜碱芽孢杆菌(B.alkalophilus)、枯草芽孢杆菌(B.subtilis)、解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)、短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)和吉氏芽孢杆菌(Bacillus gibsonii);以及描述于WO 89/06279中的迟缓枯草杆菌蛋白酶(subtilisin lentus)、枯草杆菌蛋白酶Novo、枯草杆菌蛋白酶Carlsberg、地衣芽孢杆菌、枯草杆菌蛋白酶BPN’、枯草杆菌蛋白酶309、枯草杆菌蛋白酶147和枯草杆菌蛋白酶168以及描述于(WO 93/18140)中的蛋白酶PD138。其他有用的蛋白酶可以是描述于WO 92/175177、WO 01/016285、WO 02/026024和WO 02/016547中的那些。胰蛋白酶样蛋白酶的实例是胰蛋白酶(例如猪或牛来源的)和镰孢属(Fusarium)蛋白酶(描述于WO 89/06270、WO 94/25583和WO 05/040372中),以及来源于纤维单胞菌(Cellumonas)的胰凝乳蛋白酶(描述于WO 05/052161和WO 05/052146中)。

  进一步优选的蛋白酶是来自迟缓芽孢杆菌DSM 5483的碱性蛋白酶(如在例如WO95/23221中所述)、及其变体(在WO 92/21760、WO 95/23221、EP 1921147以及EP 1921148中描述的)。

  金属蛋白酶的实例是如WO 07/044993(杰能科国际公司(Genencor Int.))中所述的中性金属蛋白酶,例如来源于解淀粉芽孢杆菌的那些。

  有用的蛋白酶的实例是描述于以下中的变体:WO 92/19729、WO 96/034946、WO98/20115、WO 98/20116、WO 99/011768、WO 01/44452、WO 03/006602、WO 04/03186、WO 04/041979、WO 07/006305、WO 11/036263、WO 11/036264,尤其是在以下位置中的一个或多个处具有取代的变体:3、4、9、15、24、27、42、55、59、60、66、74、85、96、97、98、99、100、101、102、104、116、118、121、126、127、128、154、156、157、158、161、164、176、179、182、185、188、189、193、198、199、200、203、206、211、212、216、218、226、229、230、239、246、255、256、268和269,其中所述位置对应于WO 2016/001449的SEQ ID NO 1中示出的迟缓芽孢杆菌蛋白酶的位置。更优选地,枯草杆菌酶变体可以包含以下突变:S3T、V4I、S9R、S9E、A15T、S24G、S24R、K27R、N42R、S55P、G59E、G59D、N60D、N60E、V66A、N74D、N85S、N85R、、G96S、G96A、S97G、S97D、S97A、S97SD、S99E、S99D、S99G、S99M、S99N、S99R、S99H、S101A、V102I、V102Y、V102N、S104A、G116V、G116R、H118D、H118N、N120S、S126L、P127Q、S128A、S154D、A156E、G157D、G157P、S158E、Y161A、R164S、Q176E、N179E、S182E、Q185N、A188P、G189E、V193M、N198D、V199I、Y203W、S206G、L211Q、L211D、N212D、N212S、M216S、A226V、K229L、Q230H、Q239R、N246K、N255W、N255D、N255E、L256E、L256D、T268A、R269H。蛋白酶变体优选地是在WO 2016/001449的SEQ ID NO 1中所示的迟缓芽孢杆菌蛋白酶的变体、或在WO 2016/001449的SEQ ID NO 2中所示的解淀粉芽孢杆菌蛋白酶(BPN’)的变体。蛋白酶变体与WO 2016/001449的SEQ ID NO 1或SEQ ID NO 2优选地具有至少80%序列同一性。

  蛋白酶变体在对应于WO 2004/067737的SEQ ID NO:1的位置171、173、175、179或180的一个或多个位置处包含取代,其中所述蛋白酶变体与WO2004/067737的SEQ ID NO:1具有至少75%但小于100%的序列同一性。

  合适的可商购蛋白酶包括以下列商品名出售的那些:DuralaseTm、DurazymTm、 Ultra、 Ultra、 Ultra、 Ultra、Blaze 100T、Blaze125T、Blaze 150T、(诺维信公司),在以下商品名下出售的那些:PurafectPurafect Excellenz P1000TM、Excellenz P1250TM、Preferenz P100TM、PurafectPreferenz P110TM、Effectenz P1000TM、Effectenz P1050TM、Purafect Effectenz P2000TM、(丹斯尼克公司(Danisco)/杜邦公司(DuPont))、AxapemTM(吉斯特布罗卡德斯公司(Gist-Brocases N.V.))、BLAP(在US5352604的图29中显示的序列)及其变体(汉高公司(Henkel AG))和来自花王株式会社(Kao)的KAP(嗜碱芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶)。

  合适的纤维素酶包括细菌来源或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。合适的纤维素酶包括来自芽孢杆菌属、假单胞菌属、腐质霉属、镰孢属、梭孢壳菌属、支顶孢属的纤维素酶,例如披露于US 4,435,307、US 5,648,263、US 5,691,178、US 5,776,757以及WO 89/09259中的由特异腐质霉、嗜热毁丝霉和尖孢镰孢产生的真菌纤维素酶。

  特别合适的纤维素酶是具有颜色护理益处的碱性或中性纤维素酶。此类纤维素酶的实例是描述于EP 0 495 257、EP 0 531 372、WO 96/11262、WO 96/29397、WO 98/08940中的纤维素酶。其他实例是例如描述于WO 94/07998、EP 0 531 315、US 5,457,046、US 5,686,593、US 5,763,254、WO 95/24471、WO 98/12307以及WO 99/001544中的那些纤维素酶变体。

  其他纤维素酶是具有以下序列的内切-β-1,4-葡聚糖酶,所述序列与WO 2002/099091的SEQ ID NO:2的位置1至位置773的氨基酸序列具有至少97%同一性,或家族44木葡聚糖酶,所述木葡聚糖酶具有以下序列,所述序列与WO 2001/062903的SEQ ID NO:2的位置40-559具有至少60%同一性。

  可商购的纤维素酶包括CelluzymeTM和CarezymeTM(诺维信公司(Novozymes A/S))、Carezyme PremiumTM(诺维信公司)、CellucleanTM(诺维信公司)、CellucleanClassicTM(诺维信公司)、CellusoftTM(诺维信公司)、WhitezymeTM(诺维信公司)、ClazinaseTM和Puradax HATM(杰能科国际有限公司(Genencor International Inc.))和KAC-500(B)TM(花王株式会社(Kao Corporation))、200(丹斯尼克公司/杜邦公司),以及2000(丹斯尼克公司/杜邦公司)。

  合适的甘露聚糖酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学或基因修饰的突变体。甘露聚糖酶可以是家族5或26的碱性甘露聚糖酶。它可以是来自芽孢杆菌属或腐质霉属的野生型,特别是粘琼脂芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌(B.halodurans)、克劳氏芽孢杆菌或特异腐质霉。合适的甘露聚糖酶描述于WO 1999/064619中。可商购的甘露聚糖酶是Mannaway(诺维信公司)。

  合适的过氧化物酶/氧化酶包括植物、细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。有用的过氧化物酶的实例包括来自鬼伞属,例如来自灰盖鬼伞的过氧化物酶,及其变体,如在WO 93/24618、WO 95/10602、以及WO 98/15257中描述的那些。可商购的过氧化酶包括GuardzymeTM(诺维信公司)。

  合适的脂肪酶和角质酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的或蛋白质工程化的突变体酶。实例包括来自嗜热真菌属的脂肪酶,例如如描述于EP258068和EP305216中的来自疏绵状嗜热丝孢菌(早先命名为疏棉状腐质霉);来自腐质霉属的角质酶,例如特异腐质霉(WO96/13580);来自假单胞菌属的菌株的脂肪酶(这些中的一些现在改名为伯克霍尔德菌属),例如产碱假单胞菌或类产碱假单胞菌(EP218272)、洋葱假单胞菌(EP331376)、假单胞菌属菌株SD705(WO95/06720和WO96/27002)、威斯康星假单胞菌(P.wisconsinensis)(WO96/12012);GDSL-型链霉菌属脂肪酶(WO10/065455);来自稻瘟病菌的角质酶(WO10/107560);来自门多萨假单胞菌的角质酶(US5,389,536);来自褐色嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)的脂肪酶(WO11/084412);嗜热脂肪土芽孢杆菌脂肪酶(WO11/084417);来自枯草芽孢杆菌的脂肪酶(WO11/084599);以及来自灰色链霉菌(WO11/150157)和始旋链霉菌(S.pristinaespiralis)的脂肪酶(WO12/137147)。

  其他实例是脂肪酶变体,例如EP 407225、WO 92/05249、WO 94/01541、WO 94/25578、WO 95/14783、WO 95/30744、WO 95/35381、WO 95/22615、WO 96/00292、WO 97/04079、WO 97/07202、WO 00/34450、WO 00/60063、WO 01/92502、WO 07/87508以及WO 09/109500中所述的那些。

  优选的商业化脂肪酶产品包括LipolaseTM、LipexTM;LipolexTM和LipocleanTM(诺维信公司),Lumafast(来自杰能科公司(Genencor))以及Lipomax(来自吉斯特布罗卡德斯公司(Gist-Brocades))。

  仍其他实例是有时称为酰基转移酶或过水解酶的脂肪酶,例如与南极假丝酵母(Candida antarctica)脂肪酶A具有同源性的酰基转移酶(WO10/111143)、来自耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)的酰基转移酶(WO05/56782)、来自CE 7家族的过水解酶(WO09/67279)以及耻垢分枝杆菌过水解酶的变体(特别是来自亨斯迈纺织品染化有限公司(Huntsman Textile Effects Pte Ltd)的商业产品Gentle Power Bleach中所用的S54V变体)(WO10/100028)。

  根据本发明的过氧化物酶是由酶分类EC 1.11.1.7囊括的由国际生物化学和分子生物学联盟命名委员会(IUBMB)规定的酶,或来源于其中的展示出过氧化物酶活性的任何片段。

  合适的过氧化物酶包括植物、细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。有用的过氧化物酶的实例包括来自拟鬼伞属,例如来自灰盖拟鬼伞(C.cinerea)的过氧化物酶(EP 179,486),及其变体,如在WO 93/24618、WO 95/10602以及WO 98/15257中所描述的那些。

  根据本发明的过氧化物酶还包括卤代过氧化物酶,例如氯过氧化物酶、溴过氧化物酶以及展示出氯过氧化物酶或溴过氧化物酶活性的化合物。根据其对卤素离子的特异性将卤代过氧化物酶进行分类。氯过氧化物酶(E.C.1.11.1.10)催化从氯离子形成次氯酸盐。

  在实施例中,本发明的卤代过氧化物酶是氯过氧化物酶。优选地,所述卤代过氧化物酶是钒卤代过氧化物酶,即含钒酸盐的卤代过氧化物酶。在本发明的优选的方法中,将含钒酸盐的卤代过氧化物酶与氯离子来源组合。

  已从许多不同真菌,特别是从暗色丝孢菌(dematiaceous hyphomycete)真菌组中分离出了卤代过氧化物酶,例如卡尔黑霉属(Caldariomyces)(例如,煤卡尔黑霉(C.fumago))、链格孢属、弯孢属(例如,疣枝弯孢(C.verruculosa)和不等弯孢(C.inaequalis))、内脐蠕孢属、细基格孢属以及葡萄孢属。

  还已从细菌,例如假单胞菌属(例如吡咯假单胞菌(P.pyrrocinia))和链霉菌属(例如,金色链霉菌(S.aureofaciens))中分离出了卤代过氧化物酶。

  在一个优选实施例中,卤代过氧化物酶可来源于弯孢属,特别是疣枝弯孢(Curvularia verruculosa)或不等弯孢,如描述于WO 95/27046中的不等弯孢CBS 102.42;或描述于WO 97/04102中的疣枝弯孢CBS 147.63或疣枝弯孢CBS 444.70;或来源于如描述于WO 01/79459中的Drechslera hartlebii、如描述于WO 01/79458中的盐沼小树状霉(Dendryphiella salina)、如描述于WO 01/79461中的Phaeotrichoconis crotalarie、或如描述于WO 01/79460中的Geniculosporium属物种。

  根据本发明的氧化酶特别包括由酶分类EC 1.10.3.2囊括的任何漆酶或来源于其中的展示出漆酶活性的片段、或展示出类似活性的化合物,例如儿茶酚氧化酶(EC1.10.3.1)、邻氨基苯酚氧化酶(EC 1.10.3.4)或胆红素氧化酶(EC 1.3.3.5)。

  优选的漆酶是微生物来源的酶。所述酶可以来源于植物、细菌或真菌(包括丝状真菌和酵母)。

  来自真菌的合适实例包括可来源于以下的菌株的漆酶:曲霉属,脉孢菌属(例如,粗糙脉孢菌),柄孢壳菌属,葡萄孢属,金钱菌属(Collybia),层孔菌属(Fomes),香菇属,侧耳属,栓菌属(例如,长绒毛栓菌和变色栓菌),丝核菌属(例如,立枯丝核菌(R.solani)),拟鬼伞属(例如,灰盖拟鬼伞、毛头拟鬼伞(C.comatus)、弗瑞氏拟鬼伞(C.friesii)及C.plicatilis),小脆柄菇属(Psathyrella)(例如,白黄小脆柄菇(P.condelleana)),斑褶菇属(例如,蝶形斑褶菇(P.papilionaceus)),毁丝霉属(例如,嗜热毁丝霉),Schytalidium(例如,S.thermophilum),多孔菌属(例如,P.pinsitus),射脉菌属(例如,射脉侧菌(P.radiata))(WO 92/01046)或革盖菌属(例如,毛革盖菌(C.hirsutus))(JP 2238885)。

  来自细菌的合适的实例包括可来源于芽孢杆菌属的菌株的漆酶。

  优选的是来源于拟鬼伞属或毁丝霉属的漆酶;特别是来源于灰盖拟鬼伞的漆酶,如披露于WO 97/08325中;或来源于嗜热毁丝霉,如披露于WO 95/33836中。

  酶的浓度

  在一个实施例中,添加至柔软剂中的酶能以对应于以下的量使用:每升洗涤液0.001-200mg的蛋白质,例如0.005-100mg的蛋白质,优选0.01-50mg的蛋白质,更优选0.05-20mg的蛋白质,甚至更优选0.1-10mg的蛋白质。

  可以使用常规稳定剂稳定本发明的柔软剂组合物的一种或多种酶,所述常规稳定剂例如是多元醇,例如丙二醇或甘油、糖或糖醇、乳酸、硼酸或硼酸衍生物,例如芳香族硼酸酯,或苯基硼酸衍生物,例如4-甲酰苯基硼酸,并且可以如在例如WO 92/19709和WO 92/19708中所述配制所述组合物。

  本发明的多肽还可以结合到WO 97/07202中所披露的洗涤剂配制品中,将其通过引用而特此并入。

  表面活性剂

  柔软剂组合物可以包含一种或多种表面活性剂,其可以是阳离子表面活性剂和/或非离子表面活性剂。

  当被包括在其中时,所述柔软剂将通常包含按重量计从约从约1%至约40%的阳离子表面活性剂,例如从约0.5%至约30%,特别是从约1%至约20%、从约3%至约10%,例如从约3%至约5%、从约8%至约12%或从约10%至约12%。阳离子表面活性剂的非限制性实例包括双(酰氧基乙基)羟乙基甲基铵甲硫酸盐、二棕榈油酰氧乙基羟乙基铵甲硫酸盐、二氢化牛脂羟乙基铵甲硫酸盐、二硬脂酰乙基羟乙基铵甲硫酸盐、二油酰乙基羟乙基铵甲硫酸盐烷基季铵化合物、烷氧基化的季铵(AQA)化合物、其他酯季铵盐及其组合。

  当被包括在其中时,所述柔软剂将通常包含按重量计从约0.1%至约10%的非离子表面活性剂,例如从约0.2%至约5%,特别是从约0.2%%至约3%,例如从约0.2%至约0.5%、从约0.5%至约1%或从约1%至约3%。非离子表面活性剂的非限制性实例包括聚山梨醇酯、聚乙二醇醚,聚氧乙烯烷基醚、醇乙氧基化物(AE或AEO)、醇丙氧基化物、丙氧基化的脂肪醇(PFA)、烷氧基化的脂肪酸烷基酯(例如乙氧基化的和/或丙氧基化的脂肪酸烷基酯)、烷基酚乙氧基化物(APE)、壬基酚乙氧基化物(NPE)、烷基多糖苷(APG)、烷氧基化胺、脂肪酸单乙醇酰胺(FAM)、脂肪酸二乙醇酰胺(FADA)、乙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(EFAM)、丙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(PFAM)、多羟基烷基脂肪酸酰胺、或葡糖胺的N-酰基N-烷基衍生物(葡糖酰胺(GA)、或脂肪酸葡糖酰胺(FAGA))、以及可以商品名SPAN和TWEEN获得的产品、及其组合。

  助洗剂和共助洗剂

  柔软剂组合物可以包含按重量计约0-10%,例如约0.1%至约5%的助洗剂或共助洗剂、或其混合物。在柔软剂中,助洗剂的水平典型地为0-1%,特别是0-0.5%。助洗剂和/或共助洗剂可以特别是与Ca和Mg形成水溶性络合物的螯合剂。可以使用本领域中已知的用于在柔软剂中使用的任何助洗剂和/或共助洗剂。助洗剂的非限制性实例包括沸石、二磷酸盐(焦磷酸盐)、三磷酸盐例如三磷酸钠(STP或STPP)、碳酸盐例如碳酸钠、可溶性硅酸盐例如偏硅酸钠、层状硅酸盐(例如,来自赫斯特公司(Hoechst)的SKS-6)、乙醇胺例如2-氨基乙-1-醇(MEA)、二乙醇胺(DEA,也称为2,2’-亚氨基二乙-1-醇)、三乙醇胺(TEA,也称为2,2’,2”-次氮基三乙-1-醇)、以及(羧甲基)菊粉(CMI)、及其组合。

  柔软剂组合物还可以包含按重量计0-5%,例如约0%至约2%的洗涤剂共助洗剂。洗涤剂组合物可以包括单独的共助洗剂、或与助洗剂例如沸石助洗剂组合的共助洗剂。共助洗剂的非限制性实例包括聚丙烯酸酯的均聚物或其共聚物,例如聚(丙烯酸)(PAA)或共聚(丙烯酸/马来酸)(PAA/PMA)。另外的非限制性实例包括柠檬酸盐、螯合剂(例如氨基羧酸盐、氨基多羧酸盐和膦酸盐)、以及烷基琥珀酸或烯基琥珀酸。另外的具体实例包括2,2’,2”-次氨基三乙酸(NTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、亚氨基二丁二酸(IDS)、乙二胺-N,N’-二丁二酸(EDDS)、甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)、谷氨酸-N,N-二乙酸(GLDA)、1-羟基乙烷-1,1-二膦酸(HEDP)、乙二胺四(亚甲基膦酸)(EDTMPA)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTMPA或DTPMPA)、N-(2-羟乙基)亚氨基二乙酸(EDG)、天冬氨酸-N-单乙酸(ASMA)、天冬氨酸-N,N-二乙酸(ASDA)、天冬氨酸-N-单丙酸(ASMP)、亚氨基二琥珀酸(iminodisuccinic acid)(IDA)、N-(2-磺甲基)-天冬氨酸(SMAS)、N-(2-磺乙基)-天冬氨酸(SEAS)、N-(2-磺甲基)-谷氨酸(SMGL)、N-(2-磺乙基)-谷氨酸(SEGL)、N-甲基亚氨基二乙酸(MIDA)、α-丙氨酸-N,N-二乙酸(α-ALDA)、丝氨酸-N,N-二乙酸(SEDA)、异丝氨酸-N,N-二乙酸(ISDA)、苯丙氨酸-N,N-二乙酸(PHDA)、邻氨基苯甲酸-N,N-二乙酸(ANDA)、磺胺酸-N,N-二乙酸(SLDA)、牛磺酸-N,N-二乙酸(TUDA)以及磺甲基-N,N-二乙酸(SMDA)、N-(2-羟乙基)-亚乙基二胺-N,N’,N”-三乙酸盐(HEDTA)、二乙醇甘氨酸(DEG)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTPMP)、氨基三(亚甲基膦酸)(ATMP)及其组合和盐。另外的示例性助洗剂和/或共助洗剂描述于例如WO 09/102854、US 5977053中。

  聚合物

  柔软剂可以包含按重量计0-10%(例如0.5%-5%、2%-5%、0.5%-2%或0.2%-1%)的聚合物。可以使用本领域中已知的用于在柔软剂中使用的任何聚合物。聚合物可以作为如上文提到的共助洗剂起作用,或可以提供抗再沉积、纤维保护、污垢释放、染料转移抑制、消泡特性、香料包封性和润滑性。一些聚合物可以具有多于一种的上文提到的特性和/或多于一种的下文提到的基序。示例性聚合物包括聚季铵盐、三聚氰胺聚合物、硅氧烷、硅酮、(羧甲基)纤维素(CMC)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚(乙烯吡咯烷酮)(PVP)、聚(乙二醇)或聚(环氧乙烷)(PEG)、乙氧基化的聚(亚乙基亚胺)、羧甲基菊粉(CMI)、和聚羧酸酯(例如PAA、PAA/PMA、聚-天冬氨酸、和甲基丙烯酸月桂酯/丙烯酸共聚物)、疏水修饰的CMC(HM-CMC)、对苯二甲酸和低聚乙二醇的共聚物、聚(对苯二甲酸乙二酯)和聚(氧乙烯对苯二甲酸酯)的共聚物(PET-POET)、PVP、聚(乙烯基咪唑)(PVI)、聚(乙烯吡啶-N-氧化物)(PVPO或PVPNO)以及聚乙烯吡咯烷酮-乙烯基咪唑(PVPVI)。另外的示例性聚合物包括磺化的聚羧酸酯、聚环氧乙烷和聚环氧丙烷(PEO-PPO)以及乙氧基硫酸二季铵盐。其他示例性聚合物披露于例如WO2006/130575中。还考虑了以上提到的聚合物的盐。

  香料

  柔软剂组合物可以包含处于游离形式的香料或包封的香料。香料组合物可以包含香料成分,例如(但不排他地)丁基苯基甲基丙醛、香叶醇、水杨酸苄酯、己基肉桂醛、戊基肉桂醛、柠檬烯、苯并异噻唑啉酮、α异甲基紫罗兰酮、芳樟醇。可以使用本领域中已知的用于在柔软剂中使用的任何芳香剂、香料或香料油。

  辅料

  还可以使用本领域中已知的用于在柔软剂中使用的任何柔软剂组分。其他任选的柔软剂组分包括溶剂(包括异丙醇、丙二醇、烷烃/环烷烃)、防缩剂、抗污垢再沉积剂、抗皱剂、杀细菌剂、防腐剂(包括苯并异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮和/或乳酸)、粘合剂、染料、酶稳定剂(包括硼酸、硼酸盐、CMC和/或多元醇,例如丙二醇)、乳液稳定剂、消泡剂(包括二甲硅油)、皮肤调理剂(包括辛酸/癸酸甘油酯、硬脂酸乙基己酯或椰油),单独或组合使用。可以使用本领域中已知的用于在柔软剂中使用的任何成分。此类成分的选择完全在技术人员的技术范围内。

  通过以下实例进一步描述本发明,所述实例不应理解为对本发明的范围进行限制。

  实例

  洗涤剂

  标准洗涤剂A的组成:

  实例1–吸水性改善评估

  用于制备纺织品的程序

  使用的酶:

  纤维素酶(SEQ ID NO:4),可获得自丹麦巴格斯瓦德的诺维信公司(Novozymes A/S,Bagsvaerd,Denmark)。

  使用的洗涤剂和柔软剂:

  洗涤剂:Neutral,丹麦(联合利华(Unilever))。水、C12-12链烷醇聚醚(Pareth)-7、月桂醇醚硫酸钠、醇、椰油酸钾、柠檬酸钾、三乙醇胺、二亚乙基三胺五亚甲基膦酸钠、甘油、PVP、丙二醇、氯化钙、氢氧化钾、蛋白酶、过程副产物(肽、盐、来自发酵的糖)、硼酸(4-甲酰基苯)、淀粉酶、氯化钠、C11-15仲链烷醇聚醚(Sec-Pareth)-12。

  柔软剂:Ideel,丹麦(阿尔迪公司(Aldi))。水、阳离子表面活性剂、异丙醇、氯化钙。

  使用的纺织品:

  W-10A(WFK标准棉,50x1 m)、W-20A(WFK聚酯/棉65/35%,50x1m)、W-30A(WFK100%聚酯,50x1 m)。

  使用的机器:Miele Softronic W3241。

  洗涤条件:洗涤温度:40℃,短程序(1h 35min);水硬度:15dH;

  水位(洗涤中):13-14L水(主洗涤);压载物:总计3kg;旋转速度:1600rpm

  滚筒干燥:使用Miele ECO TCE 630WP滚筒干燥机,其中用程序“Cotton–(棉–即穿烘干)”。

  程序:将每种材料一片添加至洗涤中,并在定义的洗涤条件下进行20个连续周期,其中在每次洗涤之间以及最后一次洗涤后进行滚筒干燥。在20个周期的洗涤和滚筒干燥之后,测量吸水性。结果可见于下表1中。

  用于评估纺织品的吸水性的程序:

  根据垂直芯吸试验评估纺织品。

  1.对于每种纺织品,剪成5条2x20cm的纺织品条带。

  2.对于每次评估,在两个8cm直径烧杯中添加20ml的含食用着色剂(20滴/100ml)的去离子水。

  3.将一条用柔软剂处理过的条带和一条用含有SEQ ID NO:4的纤维素酶的柔软剂处理过的条带垂直地各放入一个烧杯中。一端在水位以下,另一端附接至支持物上,以确保条带是绝对垂直的。

  4.1小时后测量水位高度。

  5.一式五份地(5条条带)进行评估。

  表1:结果表明,当在柔软剂中使用纤维素酶时,吸水性得到改善

  

  

  实例2–吸水性改善评估用于制备纺织品的程序

  使用的酶:

  纤维素酶A(SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:4),可获得自丹麦巴格斯瓦德的诺维信公司。

  纤维素酶B(SEQ ID NO:3),可获得自丹麦巴格斯瓦德的诺维信公司。

  纤维素酶C(SEQ ID NO:5),可获得自丹斯尼克公司/杜邦公司。

  使用的洗涤剂和柔软剂:

  洗涤剂:通过将3.33g/l的标准洗涤剂A溶解在硬度为15dH的水中来制备洗涤液(100%)。

  柔软剂:Ideel,丹麦(阿尔迪公司(Aldi))。水、阳离子表面活性剂、异丙醇、氯化钙。

  使用的纺织品:

  W-10A(WFK标准棉,50x1 m)、W-20A(WFK聚酯/棉65/35%,50x1 m)、W-30A(WFK100%聚酯,50x1 m)。

  使用的机器:Miele Softronic WT2780。

  洗涤条件:洗涤温度:40℃,短程序(1h 35min);水硬度:15dH;

  水位(洗涤中):13-14L水(主洗涤);压载物:总计3kg;旋转速度:1600rpm

  滚筒干燥:Miele Softronic WT2780。

  程序:将每种材料一片添加至洗涤中,并在定义的洗涤条件下进行20个连续周期,其中在前10个周期的每次洗涤之间进行滚筒干燥,然后在15、16和20个周期之后进行滚筒干燥。在20个周期后测量吸水性。

  结果可见于下表2中。

  用于评估纺织品的吸水性的程序:

  根据垂直芯吸试验评估纺织品。

  1.对于每种纺织品,剪成5条2x20cm的纺织品条带。

  2.对于每次评估,在两个8cm直径烧杯中添加20ml的含食用着色剂(20滴/100ml)的去离子水。

  3.将一条用柔软剂处理过的条带和一条用含有每种纤维素酶的柔软剂处理过的条带垂直地各放入一个烧杯中(每个烧杯中一条)。一端在水位以下,另一端附接至支持物上,以确保条带是绝对垂直的。

  4.1小时后测量水位高度。

  5.一式五份地(5条条带)进行评估。

  表2.结果表明,当在柔软剂中使用纤维素酶时,吸水性得到改善

  

  实例3–白度改善评估用于制备纺织品的程序

  使用的酶:SEQ ID NO:4的纤维素酶,可获得自丹麦巴格斯瓦德的诺维信公司。

  使用的洗涤剂和柔软剂:

  洗涤剂:碧浪Colour&Style粉,丹麦(宝洁公司(P&G))。

  柔软剂:Doussy Summer Sun,丹麦(Lidl公司)。水、阳离子表面活性剂、异丙醇、香精、氯化镁、戊基肉桂醛、丁基苯基甲基丙醛、着色剂、二甲硅油、苯并异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮、山梨酸、戊二醛。

  使用的纺织品:W-10A(WFK标准棉,10x10cm)、EMPA221(Swissatest公司,棉织物、印花棉布(cretonne)、经漂白、不含光学增亮剂,10x10cm)、H&M白色毛巾(100%棉)。

  添加的污垢:WFK灰化小块布样I(WFK)。

  使用的机器:Miele W5841。

  洗涤条件:洗涤温度:40℃,短程序(主洗涤50min);水硬度:15dH;水位(洗涤中):15-16L水(主洗涤);压载物:总计4kg。

  使用的滚筒干燥机:Miele PT 7501EL(内径:109cm,桶深:53cm)。

  干燥时间:30min(相当于完全干燥)。

  用于制备纺织品的程序:

  根据定义的洗涤条件,将每种纺织品中的六个物品洗涤10个周期,并在每次洗涤后根据定义的滚筒干燥条件进行滚筒干燥。然后将相同的物品在相同的洗涤条件下洗涤10个连续周期,洗涤之间不进行干燥。在每个周期中,将一个WFK灰化小块布样添加至洗涤中。在第15次洗涤和第20次洗涤之后,将每种纺织品中的三个物品从洗涤中取出。如上所述,对第15次和第20次洗涤后取出的三个物品进行滚筒干燥。一旦干燥,就对物品进行反射测量以确定物品的白度。结果可见于下表3和表4中。

  用于评估纺织品的白度的程序:

  使用标准Color Eye装置(生产商:麦克贝斯公司(Macbeth)(美国,英国,德国),供应商:拉尔哥(Largo),型号:370)一式两份地测量纺织品在460nm波长处的反射值。

  表3:当在柔软剂中使用纤维素酶时,白度改善的结果:

  

  表4:当在柔软剂中使用纤维素酶时,白度改善的结果:

  

  实例4-白度用于制备纺织品的程序

  使用的酶:SEQ ID NO:4的纤维素酶,可获得自丹麦巴格斯瓦德的诺维信公司。

  使用的洗涤剂和柔软剂:

  洗涤剂:碧浪Colour&Style液,丹麦(宝洁公司(P&G))。

  柔软剂:Ideel,丹麦(阿尔迪公司(Aldi))。水、阳离子表面活性剂、异丙醇、氯化钙。

  使用的纺织品:W-10A(WFK标准棉,10x10cm)、W-20A(聚酯/棉65/35,10x10cm)、W-80A(WFK棉针织物,10x10cm)、EMPA 210(Swissatest公司,棉织物、平纹布(plain weave)、经漂白、不含光学增亮剂,10x10cm)、EMPA211(Swissatest公司,棉织物、高级密织棉布(percale)、经漂白、不含光学增亮剂,10x10cm)、EMPA 213(Swissatest公司,聚酯/棉织物、65/35、经漂白、不含光学增亮剂,10x10xm)、EMPA221(Swissatest公司,棉织物、印花棉布、经漂白、不含光学增亮剂,10x10cm)、CFT CN-42(测试材料BV中心(Center forTestmaterials B.V.),针织棉,10x10cm)、CFT CN-11(测试材料B.V.中心,棉印花棉布、经漂白、不含光学增亮剂、机织织物,10x10cm)、CFT PCN-01(测试材料BV中心,聚酯/棉65/35%、经漂白、含有或不含光学增亮剂、机织织物)。

  添加的污垢:WFK灰化小块布样I(供应商:WFK)。

  使用的机器:Miele Softronic W3241。

  洗涤条件:洗涤温度:40℃,短程序(1h 35min);水硬度:15dH;

  水位(洗涤中):13-14L水(主洗涤);压载物:总计3kg;旋转速度:1600rpm

  滚筒干燥:使用内置的滚筒干燥机Miele Softtronic WT 2780,其中用程序(即穿烘干)。

  用于制备纺织品的程序:

  根据定义的洗涤条件,将每种纺织品中的六个物品洗涤10个周期,并在每次洗涤后根据定义的滚筒干燥条件进行滚筒干燥。然后将相同的物品在相同的洗涤条件下洗涤10个连续周期,洗涤之间不进行干燥。在每个周期中,将一个WFK灰化小块布样添加至洗涤中。在第15次洗涤和第20次洗涤之后,将每种纺织品中的三个物品从洗涤中取出。如上所述,对第15次和第20次洗涤后取出的三个物品进行滚筒干燥。一旦干燥,就对物品进行反射测量以确定物品的白度。结果可见于下表5中。

  用于评估纺织品的白度的程序:

  使用标准Color Eye装置(生产商:麦克贝斯公司(Macbeth)(美国,英国,德国),供应商:拉尔哥(Largo),型号:370)一式两份地测量纺织品在460nm波长处的反射值。

  表5:当在柔软剂中使用纤维素酶时,白度改善的结果

  

  

  实例5-白度用于制备纺织品的程序

  使用的酶:

  纤维素酶A(SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:4),可获得自丹麦巴格斯瓦德的诺维信公司。

  纤维素酶B(SEQ ID NO:3),可获得自丹麦巴格斯瓦德的诺维信公司。

  纤维素酶C(SEQ ID NO:5),可获得自丹斯尼克公司/杜邦公司。

  使用的洗涤剂和柔软剂:

  洗涤剂:通过将3.33g/l的标准洗涤剂A溶解在硬度为15dH的水中来制备洗涤液(100%)。柔软剂:Ideel,丹麦(阿尔迪公司(Aldi))。水、阳离子表面活性剂、异丙醇、钙。

  使用的纺织品:EMPA 210(Swissatest公司,棉织物、平纹布、经漂白、不含光学增亮剂,10x10cm)、EMPA 211(Swissatest公司,棉织物、高级密织棉布、经漂白、不含光学增亮剂,10x10cm)、EMPA 213(Swissatest公司,聚酯/棉织物、65/35、经漂白、不含光学增亮剂,10x10xm)、EMPA 221(Swissatest公司,棉织物、印花棉布、经漂白、不含光学增亮剂,10x10cm)、CFT CN-42(测试材料BV中心,针织棉,10x10cm)、CFT CN-11(测试材料B.V.中心,棉印花棉布、经漂白、不含光学增亮剂、机织织物,10x10cm)、CFT PCN-01(测试材料BV中心,聚酯/棉65/35%、经漂白、含有或不含光学增亮剂、机织织物)。

  添加的污垢:WFK灰化小块布样I(供应商:WFK)。

  使用的机器:Miele Softronic WT2780。

  洗涤条件:洗涤温度:40℃,短程序(1h 35min);水硬度:15dH;

  水位(洗涤中):13-14L水(主洗涤);压载物:总计3kg;旋转速度:1600rpm

  滚筒干燥:内置的滚筒干燥机Miele Softtronic WT 2780。

  用于制备纺织品的程序:

  根据定义的洗涤条件,将每种纺织品中的六个物品洗涤10个周期,并在每次洗涤后根据定义的滚筒干燥条件进行滚筒干燥。然后将相同的物品在相同的洗涤条件下洗涤10个连续周期,洗涤之间不进行干燥。在每个周期中,将一个WFK灰化小块布样添加至洗涤中。在第16次洗涤和第20次洗涤之后,将每种纺织品中的四个物品从洗涤中取出。如上所述,对第16次和第20次洗涤后取出的四个物品进行滚筒干燥。一旦干燥,就对物品进行反射测量以确定物品的白度。结果可见于下表6和表7中。

  用于评估纺织品的白度的程序:

  使用标准Color Eye装置(生产商:麦克贝斯公司(Macbeth)(美国,英国,德国),供应商:拉尔哥(Largo),型号:370)一式两份地测量纺织品在460nm波长处的反射值。

  表6:当在柔软剂中使用纤维素酶(16个周期)时,白度改善的结果

  

  

  表7:当在柔软剂中使用纤维素酶(20个周期)时,白度改善的结果

  

  序列表

  <110> 诺维信公司

  <120> 酶改善吸水性和/或白度的用途

  <130> 14536-WO-PCT

  <160> 5

  <170> PatentIn 3.5版

  <210> 1

  <211> 773

  <212> PRT

  <213> 芽孢杆菌属物种

  <400> 1

  Ala Glu Gly Asn Thr Arg Glu Asp Asn Phe Lys His Leu Leu Gly Asn

  1 5 1015

  Asp Asn Val Lys Arg Pro Ser Glu Ala Gly Ala Leu Gln Leu Gln Glu

  202530

  Val Asp Gly Gln Met Thr Leu Val Asp Gln His Gly Glu Lys Ile Gln

  354045

  Leu Arg Gly Met Ser Thr His Gly Leu Gln Trp Phe Pro Glu Ile Leu

  505560

  Asn Asp Asn Ala Tyr Lys Ala Leu Ala Asn Asp Trp Glu Ser Asn Met

  65707580

  Ile Arg Leu Ala Met Tyr Val Gly Glu Asn Gly Tyr Ala Ser Asn Pro

  859095

  Glu Leu Ile Lys Ser Arg Val Ile Lys Gly Ile Asp Leu Ala Ile Glu

  100 105 110

  Asn Asp Met Tyr Val Ile Val Asp Trp His Val His Ala Pro Gly Asp

  115 120 125

  Pro Arg Asp Pro Val Tyr Ala Gly Ala Glu Asp Phe Phe Arg Asp Ile

  130 135 140

  Ala Ala Leu Tyr Pro Asn Asn Pro His Ile Ile Tyr Glu Leu Ala Asn

  145 150 155 160

  Glu Pro Ser Ser Asn Asn Asn Gly Gly Ala Gly Ile Pro Asn Asn Glu

  165 170 175

  Glu Gly Trp Asn Ala Val Lys Glu Tyr Ala Asp Pro Ile Val Glu Met

  180 185 190

  Leu Arg Asp Ser Gly Asn Ala Asp Asp Asn Ile Ile Ile Val Gly Ser

  195 200 205

  Pro Asn Trp Ser Gln Arg Pro Asp Leu Ala Ala Asp Asn Pro Ile Asn

  210 215 220

  Asp His His Thr Met Tyr Thr Val His Phe Tyr Thr Gly Ser His Ala

  225 230 235 240

  Ala Ser Thr Glu Ser Tyr Pro Pro Glu Thr Pro Asn Ser Glu Arg Gly

  245 250 255

  Asn Val Met Ser Asn Thr Arg Tyr Ala Leu Glu Asn Gly Val Ala Val

  260 265 270

  Phe Ala Thr Glu Trp Gly Thr Ser Gln Ala Asn Gly Asp Gly Gly Pro

  275 280 285

  Tyr Phe Asp Glu Ala Asp Val Trp Ile Glu Phe Leu Asn Glu Asn Asn

  290 295 300

  Ile Ser Trp Ala Asn Trp Ser Leu Thr Asn Lys Asn Glu Val Ser Gly

  305 310 315 320

  Ala Phe Thr Pro Phe Glu Leu Gly Lys Ser Asn Ala Thr Asn Leu Asp

  325 330 335

  Pro Gly Pro Asp His Val Trp Ala Pro Glu Glu Leu Ser Leu Ser Gly

  340 345 350

  Glu Tyr Val Arg Ala Arg Ile Lys Gly Val Asn Tyr Glu Pro Ile Asp

  355 360 365

  Arg Thr Lys Tyr Thr Lys Val Leu Trp Asp Phe Asn Asp Gly Thr Lys

  370 375 380

  Gln Gly Phe Gly Val Asn Ser Asp Ser Pro Asn Lys Glu Leu Ile Ala

  385 390 395 400

  Val Asp Asn Glu Asn Asn Thr Leu Lys Val Ser Gly Leu Asp Val Ser

  405 410 415

  Asn Asp Val Ser Asp Gly Asn Phe Trp Ala Asn Ala Arg Leu Ser Ala

  420 425 430

  Asp Gly Trp Gly Lys Ser Val Asp Ile Leu Gly Ala Glu Lys Leu Thr

  435 440 445

  Met Asp Val Ile Val Asp Glu Pro Thr Thr Val Ala Ile Ala Ala Ile

  450 455 460

  Pro Gln Ser Ser Lys Ser Gly Trp Ala Asn Pro Glu Arg Ala Val Arg

  465 470 475 480

  Val Asn Ala Glu Asp Phe Val Gln Gln Thr Asp Gly Lys Tyr Lys Ala

  485 490 495

  Gly Leu Thr Ile Thr Gly Glu Asp Ala Pro Asn Leu Lys Asn Ile Ala

  500 505 510

  Phe His Glu Glu Asp Asn Asn Met Asn Asn Ile Ile Leu Phe Val Gly

  515 520 525

  Thr Asp Ala Ala Asp Val Ile Tyr Leu Asp Asn Ile Lys Val Ile Gly

  530 535 540

  Thr Glu Val Glu Ile Pro Val Val His Asp Pro Lys Gly Glu Ala Val

  545 550 555 560

  Leu Pro Ser Val Phe Glu Asp Gly Thr Arg Gln Gly Trp Asp Trp Ala

  565 570 575

  Gly Glu Ser Gly Val Lys Thr Ala Leu Thr Ile Glu Glu Ala Asn Gly

  580 585 590

  Ser Asn Ala Leu Ser Trp Glu Phe Gly Tyr Pro Glu Val Lys Pro Ser

  595 600 605

  Asp Asn Trp Ala Thr Ala Pro Arg Leu Asp Phe Trp Lys Ser Asp Leu

  610 615 620

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  <213> 粪生粪壳菌

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  <213> 特异腐质霉

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  <213> 大孢圆孢霉

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  225 230 235 240

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  245 250 255

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  Asp Trp Tyr Ser Gln Cys Leu

  290 295

《酶改善吸水性和/或白度的用途.doc》
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