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一种单人份文库构建试剂盒

2021-02-09 23:35:04

一种单人份文库构建试剂盒

  技术领域

  本实用新型属于基因文库构建技术领域,具体涉及一种单人份文库构建试剂盒。

  背景技术

  无论是哪一种基因检测技术,都需要用到DNA样本制备,测序还需要用到文库制备。高品质的测序文库制备是一体化测序流程中的一个关键因素,文库质量决定了测序质量。据预测,随着测序市场的发展,文库制备将占据分子诊断市场中的15%,到2025 年市场规模将达40亿元。

  基因文库包括基因组文库和部分基因文库。将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。

  现有的文库构建试剂盒一般是用试剂瓶存放,能够用于多个样品的文库构建,在使用时,由于不同的人操作,可能带来误差较大,使用的工具酶反复冻融,酶的活性下降,影响实验效果,最终使获得的基因文库差异比较大。另外液体试剂在存储运输过程中贴壁而导致的实际用量和理论用量不一致,因此在生产时就必须多加液体试剂,以确保试剂的实际用量顾客使,这就无形中增加了企业的生产成本。

  因此急需一种能够解决现有问题的的单人份文库构建试剂盒。

  实用新型内容

  本实用新型的目的是提供一种单人份文库构建试剂盒,一个试剂条处理一个样品,减少因反复冻融而导致的工具酶的酶活性损失;减少人员操作造成的基因文库的获得时造成的差异。

  本实用新型提供了如下的技术方案:

  一种单人份文库构建试剂盒,包括一个试剂条和文库构建所需试剂,所述试剂条设有多个存储孔,所述存储孔依次包括底部、下部和上部,所述底部封闭,多个所述存储孔的所述下部相互独立,相邻的所述存储孔的所述上部相互连接,所述文库构建所需试剂放置在所述存储孔内。单人份文库构建试剂盒也就是说一个试剂条处理一个样品,减少因反复冻融而导致的工具酶的酶活性损失;消除液体试剂在存储运输过程中贴壁而导致的实际用量和理论用量不一致的风险;预分装试剂条最大程度下减少了操作人员的手工操作步骤,降低误操作发生概率,降低操作人员培训需求,保证样本制备质量和可靠性。单人份文库构建试剂盒最好与机器配合使用,当然也可以手工操作。

  优选的,所述存储孔包括用于放置文库构建所需试剂的试剂孔、用于存放废弃液体的废液孔、用于存放纯化后的DNA样品的样品孔和用于放置构建的文库终产物的终产物孔,所述存储孔的大小根据储存液体的量制定,也就是说相应的存放大体积的液体的所述存储孔的宽度或高度较大,以保证其能够存放下液体,同时节约耗材,在所有的存储孔中所述废液孔的体积最大。当单人份文库构建试剂盒与机器配合使用的时候,产生的废液可以直接转移到所述废液孔中,避免废液从枪头中散落污染其他试剂或者所述存储孔中。DNA样品放置在所述样品孔中,方便机器操作使用。

  优选的,所述文库构建所需试剂包括洗脱液、磁珠、wash buffer液、Endrepairing 试剂、A-tailing试剂和Ligation试剂。可以用于Illumina测序仪的测序使用,如果用于Ion Torrent的测序仪的测序的,则不使用A-tailing试剂。

  优选的,所述End repairing试剂、所述A-tailing试剂和所述Ligation试剂均以冻干粉形式存在。

  优选的,所述End repairing试剂、所述A-tailing试剂和所述Ligation试剂中的酶均进行了纳米胶囊包裹处理,所述文库构建所需试剂还包括使所述纳米胶囊降解的化学试剂,它既可以单独包装也可以直接放置在该试剂条中。采用纳米胶囊包裹处理可以常温保存。使得原先需要在-20℃存储运输的试剂可在常温下存储运输,降低物流仓储需求;免去因存储温度和使用温度不一致而导致的平衡时间,真正实现及时检测。

  优选的,用于存放所述End repairing试剂的所述试剂孔、用于存放所述A-tailing 试剂的所述试剂孔和用于存放所述Ligation试剂的所述试剂孔均设有防止酶粉末散落的结构。避免酶撒落造成酶的实际用量的减少。

  优选的,所述试剂条的所述存储孔的位置排列依次为用于存放所述Ligation试剂的所述试剂孔、用于存放所述A-tailing试剂的所述试剂孔、用于存放所述End repairing试剂的所述试剂孔、所述样品孔、所述废液孔、用于存放所述wash buffer 液的所述试剂孔、用于存放所述磁珠的所述试剂孔、用于存放所述洗脱液的所述试剂孔以及所述终产物孔。方便机器操作。

  优选的,用于存放所述Ligation试剂的所述试剂孔、用于存放所述A-tailing试剂的所述试剂孔、用于存放所述End repairing试剂的所述试剂孔、用于存放所述washbuffer液的所述试剂孔和用于存放所述磁珠的所述试剂孔均为大小相同的圆柱形且所述底部低于所述样品孔和所述终产物孔,所述样品孔和所述终产物孔的形状均为圆锥体型,用于存放所述wash buffer液的所述试剂孔和所述废液孔均为长方体形且底部与用于存放所述磁珠的所述试剂孔的底部高度相同。减少试剂条耗材的使用,因为所述wash buffer液和废液比较多,所以用于存放它们的所述存储孔比较大,相对而言DNA纯化试剂盒纯化的DNA样品和构建的文库终产物的量比较少,所以用于存放它们的所述存储孔比较小。

  优选的,所述试剂条的两端分别设有把手和条形码。所述把手方便拿取试剂条,所述把手表面设有若干条防滑棱,避免打滑。单人份文库构建试剂盒,通过所述条形码被扫描可以被工作站直接读取。

  优选的,所述条形码设置在远离所述终产物孔的一端,便于操作。

  本实用新型的有益效果是:一个试剂条处理一个样品,减少因反复冻融而导致的工具酶的酶活性损失;消除液体试剂在存储运输过程中贴壁而导致的实际用量和理论用量不一致的风险;最大程度下减少了操作人员的手工操作步骤,降低误操作发生概率,降低操作人员培训需求,保证样本制备质量和可靠性。

  附图说明

  附图用来提供对本实用新型的进一步理解,并且构成说明书的一部分,与本实用新型的实施例一起用于解释本实用新型,并不构成对本实用新型的限制。在附图中:

  图1是本实用新型主视图;

  图2是本实用新型俯视图。

  其中图中标记为:1、试剂条;2、试剂孔;3、废液孔;4、样品孔;5、终产物孔;6、把手;61、防滑棱;7、条形码;8、洗脱液;9、磁珠;10、wash buffer液;11、 End repairing试剂;12、A-tailing试剂;13、Ligation试剂。

  具体实施方式

  如图1-2所示,一种单人份文库构建试剂盒,包括一个试剂条1和文库构建所需试剂,试剂条1设有多个存储孔,存储孔依次包括底部、下部和上部,底部封闭,多个存储孔的下部相互独立,相邻的存储孔的上部相互连接,文库构建所需试剂放置在存储孔内。单人份文库构建试剂盒也就是说一个试剂条1处理一个样品,减少因反复冻融而导致的工具酶的酶活性损失;消除液体试剂在存储运输过程中贴壁而导致的实际用量和理论用量不一致的风险;预分装试剂条1最大程度下减少了操作人员的手工操作步骤,降低误操作发生概率,降低操作人员培训需求,保证样本制备质量和可靠性。单人份文库构建试剂盒与机器配合使用。

  具体的,存储孔包括用于放置文库构建所需试剂的试剂孔2、用于存放废弃液体的废液孔3、用于存放纯化后的DNA样品的样品孔4和用于放置构建的文库终产物的终产物孔5,在所有的存储孔中废液孔3的体积最大。当单人份文库构建试剂盒与机器配合使用的时候,产生的废液可以直接转移到废液孔3中,避免废液从枪头中散落污染其他试剂或者存储孔中。DNA样品放置在样品孔4中,方便机器操作使用。

  具体的,文库构建所需试剂包括洗脱液8、磁珠9、wash buffer液10、Endrepairing 试剂11、A-tailing试剂12和Ligation试剂13。wash buffer液10一般为80%乙醇, End repairing试剂11、A-tailing试剂12和Ligation试剂13为冻干粉且这三种中的酶均进行了纳米胶囊包裹处理,文库构建所需试剂还包括使纳米胶囊降解的化学试剂,它既可以单独包装也可以直接放置在该试剂条1中,本实施例中是单独包装。相应的试剂条1的存储孔的位置排列依次为用于存放Ligation试剂13的试剂孔2、用于存放 A-tailing试剂12的试剂孔2、用于存放End repairing试剂11的试剂孔2、样品孔4、废液孔3、用于存放washbuffer液10的试剂孔2、用于存放磁珠9的试剂孔2、用于存放洗脱液8的试剂孔2以及终产物孔5。用于存放End repairing试剂11的试剂孔2、用于存放A-tailing试剂12的试剂孔2、用于存放Ligation试剂13的试剂孔2、用于存放wash buffer液10的试剂孔2和用于存放磁珠9的试剂孔2均为大小相同的圆柱形且底部低于样品孔4和终产物孔5,样品孔4和终产物孔5的形状均为圆锥体型,用于存放wash buffer液10的试剂孔2和废液孔3均为长方体形且底部与用于存放磁珠9 的试剂孔2的底部高度相同。减少试剂条1耗材的使用,因为washbuffer液10和废液比较多,所以用于存放它们的存储孔比较大,相对而言DNA纯化试剂盒纯化的DNA样品和构建的文库终产物的量比较少,所以用于存放它们的存储孔比较小。

  具体的,试剂条1的两端分别设有把手6和条形码7。把手6方便拿取试剂条1,把手6表面设有若干条防滑棱61,避免打滑。条形码7设置在远离终产物孔5的一端,便于操作。单人份文库构建试剂盒,通过条形码7被扫描可以被工作站直接读取。

  本实施例的优点如下:

  1、减少因反复冻融而导致的酶活性损失;

  2、消除液体试剂在存储运输过程中贴壁而导致的实际用量和理论用量不一致的风险;

  3、预分装试剂条1最大程度下减少了操作人员的手工操作步骤,降低误操作发生概率,降低操作人员培训需求,保证样本制备质量和可靠性;

  4、使得原先需要在-20℃存储运输的试剂可在常温下存储运输,降低物流仓储需求;

  5、免去因存储温度和使用温度不一致而导致的平衡时间,真正实现及时检测。

  以上所述仅为本实用新型的优选实施例而已,并不用于限制本实用新型,尽管参照前述实施例对本实用新型进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本实用新型的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本实用新型的保护范围之内。

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