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一种用于保湿及抗老化的蔬莓果发酵物嫘萦纤维面膜

2021-03-13 16:09:57

一种用于保湿及抗老化的蔬莓果发酵物嫘萦纤维面膜

  技术领域

  本发明是有关于一种面膜,特别是关于一种用于保湿及抗老化的蔬果(或可称蔬莓果)发酵物嫘萦纤维面膜。

  背景技术

  目前人造合成纤维所制成的不织布,其生产中所使用的最大量原料,依序为聚丙烯(PP)、聚酯(PET)、聚乙烯(PE)与尼龙(Nylon),共计占总使用量的96%,当这些大量人造合成纤维不织布经使用后成为废弃物时,因无法被自然环境分解,而对环境形成巨大的危害,因此,以木浆(pulp)为原料,并使用溶剂法来生产制造天然纤维素不织布已渐成主流,其产品废弃物因可自然降解,而被称为绿色环保纤维。

  嫘萦(Rayon)又称为人造丝,由天然的植物纤维素加工制造而成,所以属于再生纤维。嫘萦具有易染色、洗涤及耐酸碱的性质,常被用于服装、室内装饰(例如床罩及毯子),工业上也常用嫘萦来制造手术器械、无纺产品、女性卫生用品、轮胎帘布等。

  然而,一般嫘萦布会因膨润而疏松,且吸水力、拉伸强度及机械强度仍有待加强。为了解决上述问题,本领域的技术人员亟需研发出新颖的嫘萦布制备方法,且由此所制得的布料、布膜或面膜的拉伸强度、机械强度、致密度及吸水力皆需提升,以造福有此需求的广大族群。

  发明内容

  有鉴于现有技术所面临的问题,本发明的一目的在于提供一种嫘萦纤维丝,其包含多个支撑纤维,所述多个支撑纤维通过对纤维原料进行碱化处理而得,纤维原料为植物纤维素所制成的再生纤维;及纳米填充纤维,嵌合于多个支撑纤维之间。

  在本发明的一实施例中,植物纤维素是来自于木浆、木屑或棉屑等纤维素原料所制成的再生纤维,又称嫘萦。

  在本发明的一实施例中,碱化处理是以氢氧化钠进行。

  在本发明的一实施例中,纳米填充纤维为细菌纤维素经研磨所制成的细长的纤维结构,其平均直径小于50纳米。较佳地,细菌纤维素会经研磨而制备成直径1-30纳米、长度约为1-20微米(较佳的长度为2微米以下)的纳米填充纤维。

  在本发明的一实施例中,纳米填充纤维的直径为1-4纳米。

  在本发明的一实施例中,纳米填充纤维为新兴工业材料,主要应用于面膜材料、高强度材料(汽车零件、家电产品外壳)、高功能材料(住宅建材、内装材料)、增黏剂(食品、医药用品)、以及特殊材料(特殊纸、过滤材料)中。

  本发明的另一目的在提供一种纳米嫘萦纤维布,包含:多个前述的嫘萦纤维丝,彼此交错成一片棉网。

  本发明的又一目的在提供一种用于保湿及抗老化的面膜,包含:前述的纳米嫘萦纤维布;及吸附于纳米嫘萦纤维布中的发酵物。

  在本发明的一实施例中,发酵物是由蔬莓果汁进行发酵反应而得,而蔬莓果汁是选自于由蓝莓汁、蔓越莓汁、白萝卜汁、红萝卜汁、杨梅汁、桑葚汁、葡萄汁、苹果汁、甘蔗汁、百香果汁、菠萝汁、柠檬汁、绿花椰菜汁、芹菜汁及芦笋汁所组成的群组的至少其中之一。

  在本发明的一实施例中,发酵反应包含:将蔬果汁与水以1:1-5的重量比例混合,于50-100℃灭菌0.5-1.5小时;再将其冷却至室温;之后依序植入酵母菌(Saccharomycescerevisiae BCRC20271)于冷却后的蔬果汁,此时酵母菌占蔬果汁整体的0.01-0.5wt%,而后发酵1-3天;植入乳酸菌(Streptococcus thermophilus TCI633)于前一步骤所得到的蔬果汁,此时乳酸菌占蔬果汁整体的0.01-0.25wt%,而后发酵1-5天;再于45-70℃下减压浓缩;最后,以200-400目(mesh)网筛过滤,即可得到发酵物。

  本发明的再一目的为提供一种用于制备纳米嫘萦纤维布的方法,包含以下步骤:(a)对纤维原料进行碱化处理,得到多个支撑纤维;(b)将纳米填充纤维与多个支撑纤维充分混合,得到纤维浆料混合物,其中纳米填充纤维包含细菌纤维素,且纳米填充纤维直径为1-30纳米;(c)通过成型步骤使纤维浆料混合物形成多个嫘萦纤维丝,其中纳米填充纤维嵌合于支撑纤维之间;以及(d)经纺织步骤,使多个嫘萦纤维丝形成纳米嫘萦纤维布,以增加液体乘载性及提升布体结构的稳定性。

  在本发明的一实施例中,在步骤(b)中,纳米填充纤维的重量与所述支撑纤维的重量的比例为1:10至1:20。

  在本发明的一实施例中,在步骤(a)中,纤维原料包含木浆、木屑、或棉屑的其中之一者或其组合。

  在本发明的一实施例中,在步骤(a)中,碱化处理是以氢氧化钠进行。

  在本发明的一实施例中,纳米填充纤维的直径为1-4纳米。

  本发明的另一目的为提供一种纳米嫘萦纤维布,是通过如前所述的方法而制得。

  在本发明的一实施例中,纳米嫘萦纤维布的布体结构的稳定性为抗拉强度(tensile strength)大于20N。

  在本发明的一实施例中,纳米嫘萦纤维布的布体结构的稳定性为拉伸率大于120%。

  本发明的另一目的为提供一种使用如前所述的纳米嫘萦纤维布所制成的面膜,其液体乘载性为含水量大于10克。

  综上所述,本发明纳米嫘萦纤维布的功效在于:肤感比人造纤维好很多,适合开发改良的面膜材质,在液态时也更容易能让纳米填充纤维均匀分布,且可提升原缧萦布的拉伸强度、延展能力、机械强度、致密度及吸水力,为一种改良的布膜材质。因此利用所述纳米嫘萦纤维布所制成的面膜能吸收更多含有蔬莓果发酵物的精华液,使面膜敷于肌肤上时能更加服贴,并具有更佳的导入性,进而使蔬莓果发酵物本身的抗氧化、美肌功能,更有效的导入肌肤,产生加乘的功效。

  以下将进一步说明本发明的实施方式,下述所列举的实施例是用以阐明本发明,并非用以限定本发明的范围,任何熟习此技艺者,在不脱离本发明的精神和范围内,当可做些许更动与润饰,因此本发明的保护范围当视所附的权利要求书所界定的范围为准。

  附图说明

  图1是本发明一实施例中纳米嫘萦纤维布的结构示意图;

  图2是本发明一实施例中纳米嫘萦纤维布的致密度比较图;

  图3是本发明一实施例中纳米嫘萦纤维布的电子显微镜结构观察图;

  图4是本发明一实施例中纳米嫘萦纤维布在提升嫘萦布的机械强度的功效数据图;

  图5是本发明一实施例中纳米嫘萦纤维布在提升嫘萦布的拉伸率的功效数据图;

  图6是本发明一实施例中纳米嫘萦纤维布在提升嫘萦布的吸水力的功效数据图;

  图7是本发明一实施例中蔬莓果发酵物与蔬莓果汁氧化自由基吸收能力(oxygenradical absorption capacity,ORAC)的比较图;

  图8是本发明一实施例中蔬莓果发酵物与蔬莓果汁超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)的活性比较图;

  图9是本发明一实施例中蔬莓果发酵物对于皮肤纤维母细胞胶原蛋白生合成基因的比较图;

  图10是本发明一实施例中蔬莓果发酵物对于皮肤纤维母细胞弹性蛋白生合成基因的比较图;

  图11是本发明一实施例中使用蔬莓果发酵物15分钟后,皮肤含水量结果图;

  图12是本发明一实施例中使用蔬莓果发酵物15分钟后,肌肤弹性测试结果图;

  图13是本发明一实施例中使用蔬莓果发酵物15分钟后,肌肤纹理测试结果图。

  图14是本发明一实施例中使用蔬莓果发酵物15分钟后,肌肤皱纹测试结果图。

  其中,附图标记:

  支撑纤维 11

  纳米填充纤维 12

  嫘萦纤维丝 13

  纳米嫘萦纤维布 14

  具体实施方式

  以下将以图式揭露本发明的多个实施例,为明确说明起见,许多实务上的细节将在以下叙述中一并说明。然而,这些实务上的细节不应用以限制本发明。也就是说,在本发明部分实施方式中,这些实务上的细节是非必要的。本文中所使用数值为近似值,所有实验数据皆表示在20%的范围内,较佳为在10%的范围内,最佳为在5%的范围内。

  于本文中,除非内文中对于冠词有所特别限定,否则『一』与『该』可泛指单一个或多个。可进一步理解的是,本文中所使用的『包含』、『包括』、『具有』及相似词汇,指明其所记载的特征、区域、整数、步骤、操作、组件与/或组件,但不排除其所述或额外的一个或多个其它特征、区域、整数、步骤、操作、组件、组件,与/或其中的群组。

  经由前述内容,可得知一般嫘萦布会因膨润而疏松,且吸水力、拉伸强度及机械强度仍有待加强。有鉴于此,本发明提供一种纳米嫘萦纤维布,具有良好的拉伸强度、机械强度、致密度及吸水力。其更可进一步结合本发明所提供具有良好保湿及抗老化功能的「含有蔬莓果发酵物的精华液(以下简称”蔬莓果发酵物精华液”)」,进而成为含有蔬莓果发酵物精华液的纳米嫘萦纤维面膜。此面膜除了可以吸附更多具有保湿抗老化功能的蔬莓果发酵物精华液,亦可利用面膜良好的拉伸强度、机械强度及致密度,将蔬莓果发酵物精华液更好的导入肌肤,使肌肤具有更好的保湿及抗老化能力。

  以下将详细说明本发明所提供的纳米嫘萦纤维布以及蔬莓果发酵物精华液纳米嫘萦纤维面膜的制备方法与功效测试,以证实所述面膜确具有良好的吸收力、拉伸强度、机械强度及致密度,进而使细胞能更容易的吸收精华液;并进一步证实,本发明所提供的蔬莓果发酵物精华液具有保湿及抗老化的功能。

  实施例1.支撑纤维的制备、纳米填充纤维的制备及布体结构稳定性测试

  请参照图1,其为纳米嫘萦纤维布14的结构示意图。首先,先制备支撑纤维11,其中支撑纤维11的纤维原料是包含来自于木浆、木屑、或棉屑等纤维素原料所制成的再生纤维,又称嫘萦。以氢氧化钠对纤维原料进行碱化处理,得到经碱化处理并均质的支撑纤维11,于本发明中又可称为支撑嫘萦纤维。接着,制备纳米填充纤维12,其中纳米填充纤维12是选自细菌纤维素,经过研磨制备成直径约1-30纳米且长度约为1-20微米的纳米填充纤维12,较佳的长度为2微米以下。

  将纳米填充纤维12加入经碱化处理的支撑纤维11并充分混合,得到一种纤维浆料混合物,其中纳米填充纤维12与支撑纤维11的重量比为1:10至1:20。之后,对液态状的纤维浆料混合物进行成型步骤:通过喷丝头将纤维浆料混合物喷出,并于硫酸水溶液中凝结成丝,制成嫘萦纤维丝13。

  请参考图1,支撑纤维11未经过研磨,属于较长的纤维,因此经喷丝头喷出后,多个长条支撑纤维11形成单一嫘萦纤维丝,其中长条支撑纤维11间具有空隙,而纳米填充纤维12会嵌合在多条长条支撑纤维11之间的空隙,即至少部分纳米填充纤维12位于单一嫘萦纤维丝中,使其形成更致密的嫘萦纤维丝。接着,经纺织步骤,嫘萦纤维丝13可进一步经例如开棉机松解为较小的棉束及棉块,然后均匀放入如梳棉机中制成棉网。之后,将棉网堆叠至所需厚度约0.01-0.5公分,然后放入如针扎机中针扎定形成布,以形成纳米嫘萦纤维布14。

  以上纳米嫘萦纤维布14的制程,可委托中国台湾化学纤维股份有限公司(FORMOSACHEMICALS&FIBRE CORPORATION)制造。

  在本发明另一实施例中,纳米填充纤维具有一范围落在1-30纳米内的直径,长度约为1-20微米,较佳的长度为2微米以下。

  在本发明另一实施例中,纳米填充纤维具有一范围落在1-4纳米内的直径。

  于本发明实施例中,填充纤维优先选择由细菌纤维素所制成,细菌纤维素(bacterial cellulose)又称生物纤维。

  接着,对纳米嫘萦纤维布14进行布体结构稳定性(致密度)测试,并与一般嫘萦布膜(无填充纤维)比较。本发明所述的“一般嫘萦布膜”(或“一般嫘萦布”)的制造方式与纳米嫘萦纤维布14大致相同,差异仅在于未加入纳米填充纤维12。其比较结果显示于图2。图2是纳米嫘萦纤维布的致密度比较图。由图2可见,与一般嫘萦布膜比较,纳米嫘萦纤维布可在水中维持原本结构,一般嫘萦布膜则会因膨润而疏松。本实施例的结果显示,纳米嫘萦纤维布在外观较一般嫘萦布膜致密,置于液体中也能维持稳定且紧密的缧萦纤维丝结构,因此本发明的纳米嫘萦纤维布可有效提升嫘萦布的致密度。

  本发明一实施例中,当增加纳米填充纤维相对于支撑纤维的比例时,也会增加布体整体平滑的触感。如当布体中或形成布体前的浆料中的纳米填充纤维:支撑纤维的重量比例由1:20调整至1:10时,可发现当纳米填充纤维:支撑纤维的重量比例为1:10时,相较于1:20者,具有较佳的触感。

  实施例2.纳米嫘萦纤维布的电子显微镜结构观察

  本发明的一实施例将一般嫘萦布膜与实施例1中的纳米嫘萦纤维布分别裁切为长1公分,宽1公分的试验薄片,并使用碳胶(购自TED PELLA,Conductive SilverPaint,30g#16062)粘贴于金属载台。接着,将载台放入Hitachi Tabletop Microscope TM-1000桌上型电子显微镜内部,于真空环境下观测不同倍率下纤维的外观型态。图3是纳米嫘萦纤维布的电子显微镜结构观察图。由图3可见,以6000倍电子显微镜观察纳米嫘萦纤维布膜的结构型态,可发现纳米填充纤维嵌于嫘萦的纤维束中(如箭头所示),一般嫘萦布膜则无。

  实施例3.纳米嫘萦纤维布的机械强度及材料延展性试验

  在本实施例中,测试实施例1中的纳米嫘萦纤维布及一般嫘萦布的机械性质的布体结构稳定性,包括机械强度(即抗拉强度(tensile strength))及拉伸率(elongation)。首先,取成膜的纳米嫘萦纤维布及一般嫘萦布三层堆叠,并分别裁切成长5公分,宽1公分的拉伸试验片,测量各拉伸试验片厚度。接着,以Shimadzu EZ Tester 500N强度试验机进行薄膜拉伸强度测试,试验时上下铗头间距1.5公分,并以10mm/min拉伸速率进行试验,两侧夹紧于夹具上。之后,记录拉伸过程的应力-应变曲线及最大载重值,并比较纳米嫘萦纤维布与一般嫘萦布在相同基重条件下的最大应力。纤维拉伸至完全断裂时,记录其最大可延展长度,并可通过应力-应变图得到抗拉强度及拉伸率,以比较各材料的物性强度。本实施例的结果显示于图4及图5。

  图4是纳米嫘萦纤维布在提升嫘萦布的机械强度上的功效的数据图。由图4可见,相较于一般嫘萦布,纳米嫘萦纤维布的最大应力提升90%,证实纳米嫘萦纤维布具有更高的机械强度。图5是纳米嫘萦纤维布在提升嫘萦布的拉伸率上的功效的数据图。由图5可见,与一般嫘萦布相较之下,纳米嫘萦纤维布的拉伸率提升20%,证实纳米嫘萦纤维布具有优良延展性。

  实施例4.纳米嫘萦纤维布的材料液体乘载量试验

  首先,将一般嫘萦布膜与实施例1中的纳米嫘萦纤维布分别裁切为长10公分,宽10公分的试验薄片,并记录重量,接着将两试验薄片浸入50毫升的纯水30分钟。本实施例的结果显示于图6。图6是纳米嫘萦纤维布在提升嫘萦布吸水力的功效数据图。由图6可见,由于嵌入有纳米填充纤维的缧萦纤维丝,其空隙可被纳米填充纤维填补,故以嵌入有纳米填充纤维的缧萦纤维丝所形成的纳米嫘萦纤维布的吸水量为一般嫘萦布的1.9倍。本实施例的结果显示,纳米嫘萦纤维布可有效提升嫘萦布的吸水力。

  在本发明一实施例中,当增加纳米填充纤维相对于支撑纤维的比例时,也会增加吸湿力。如当布体中或形成布体前的浆料中的纳米填充纤维:支撑纤维的重量比例由1:20调整至1:10时,其吸湿力也会增加。这是因为纳米嫘萦纤维布嵌入了纳米填充纤维,因此整体表面积增加,故较一般的嫘萦布具有较佳吸湿力。

  综上所述,本发明的纳米嫘萦纤维布肤感比一般嫘萦布及其他人造纤维好很多,适合开发改良的面膜材质,也更容易能在液态时让纳米填充纤维均匀分布,且可有效提升原缧萦布的拉伸强度、延展能力、机械强度、致密度及吸水力,为一种改良的布膜材质。

  实施例5.蔬莓果发酵物嫘萦纤维面膜中的蔬莓果发酵物制备流程

  根据本发明的一实施例,其中的蔬莓果发酵物制备流程步骤:

  1.将综合莓果汁(MX-AC130-FC,购自杨雅营销有限公司)及综合蔬莓果汁(MX-AC134-FL,购自杨雅营销有限公司),以1:1的重量比混和后得到一种蔬莓果汁(或可称蔬果汁),再将此蔬莓果汁与水以1:1-5的重量比例混合,于50-100℃灭菌0.5-1.5小时;

  2.将步骤1得到的蔬莓果汁冷却至室温(25±5℃)供后续发酵使用;

  3.于步骤2所得到的蔬莓果汁中植入酵母菌(Saccharomyces cerevisiaeBCRC20271)(植入后,酵母菌占蔬莓果汁整体的0.01-0.5wt%),发酵1-3天;

  4.于步骤3所得到的蔬莓果汁中植入乳酸菌(Streptococcus thermophilusTCI633)(植入后,乳酸菌占蔬莓果汁整体的0.01-0.25wt%),发酵1-5天;

  5.于45-70℃下减压浓缩;

  6.以200-400目(mesh)网筛过滤,即得蔬莓果发酵物,所述蔬莓果发酵物的总多酚含量为40微克/毫升(μg/mL)以上,且其SOD为700U/mL以上。

  在一些实施例中,前述步骤1中所使用的蔬莓果汁(或可称蔬果汁)可选自于由蓝莓汁、蔓越莓汁、白萝卜汁、红萝卜汁、杨梅汁、桑葚汁、葡萄汁、苹果汁、甘蔗汁、百香果汁、凤梨汁、柠檬汁、绿花椰菜汁、芹菜汁及芦笋汁所组成的群组中的至少一种。

  实施例6.蔬莓果发酵物与蔬莓果汁氧化自由基吸收能力(ORAC)分析

  在本发明的一实施例中,准备等重量的两份实验样品,其中一份为实施例5步骤1中得到的“蔬莓果汁”,另一份则是实施例5中经步骤1-6发酵而得到的“蔬莓果发酵物”;将前述“蔬莓果汁”与“蔬莓果发酵物”送至腾德姆斯技术顾问股份有限公司,进行ORAC的分析,其结果如图7。如图7可发现,本发明所提供的蔬莓果发酵物,其氧化自由基吸收能力为蔬莓果汁的1.4倍,可见得蔬莓果汁经发酵成为蔬莓果汁发酵物后,能提高原本的氧化自由基吸收能力。

  实施例7.蔬莓果发酵物与蔬莓果汁SOD活性分析

  本发明的一实施例为本发明的蔬莓果发酵物中超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)活性功效的测试实验,其中参考GB/T5009.171-2003保健食品中超氧化物歧化酶活性测定的准则进行测试,并同样以实施例6中所述的蔬莓果汁与蔬莓果发酵物进行比较,其中是以待测物抑制邻苯三酚(Pyrogallol)自氧化反应的效率,来进行其中SOD活性的定量。SOD是一种能够催化超氧化物通过歧化反应,并使其转化为氧气和过氧化氢的酵素,其广泛存在于各种动物、植物、及微生物中,是生物体内一种重要的抗氧化剂,保护暴露于氧气中的细胞。

  首先,配置用于测定的A溶液与B溶液,其中A溶液为将1.2114克的三羟甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,Tris)和37.2毫克(mg)的乙二胺四乙酸(EDTA-2Na)溶于62.4毫升(mL)浓度为0.1mole/L的盐酸(HCl)溶液中,并待溶解后以纯水定量至100毫升,B溶液则为将56.7毫克的邻苯三酚(pyrogallol)溶于少量浓度为10mmole/L的盐酸且待溶解后,以纯水定量至100毫升。

  处理待测样品,其中固体样品以下列方法制备:秤取1克的固体样品置于研钵中,加入9毫升的纯水研磨溶解后,将全部液体移入离心管内,并以少量纯水冲洗研钵后,将该剩余液体并入离心管中,并以纯水定量至总体积为10毫升,再以4000rpm离心15分钟后,取上清液进行测定。液态样品则以下列方法制备:澄清的液体样品可以原液直接测定;混浊的液体样品先以4000rpm离心5分钟后,取上清液进行测定。液体样品可以纯水进行适当稀释,最后再回乘稀释倍数以计算原本浓度。

  接着,请参照下表一,进行控制组的空白测定:于离心管中依序加入2.35毫升的A溶液、2毫升的纯水,震荡混和均匀后,加入0.15毫升的B溶液,加入B溶液混合后,快速地轻轻摇晃混合均匀,并立即倒入比色管中测定其于325纳米波长下的吸光值,反应1分钟后再检测一次其于325纳米波长下的吸光值,两数值的差值即为ΔA325;而待测样品的测定则分别是于离心管中依序加入2.35毫升的A溶液、1.8毫升的纯水、0.2毫升的待测样品(依前段所述方式处理的蔬莓果汁、蔬莓果发酵物)及0.15毫升的B溶液,加入B溶液混合后,快速轻轻摇晃混合均匀,并立即倒入比色管中测定其于325纳米波长下的吸光值,反应1分钟后再检测一次其于325纳米波长下的吸光值,两数值的差值即为ΔA’325。

  表一、SOD活性测定取量表

  最后,再以下列公式计算蔬莓果汁、及蔬莓果发酵物中的SOD活性,其中V为4.5、D为0.2。

  

  ΔA325:邻苯三酚自氧化速度

  ΔA′325:样品抑制邻苯三酚自氧化速度

  V:样品的体积

  D:样品的稀释倍数

  本发明的蔬莓果发酵物中超氧化物歧化酶活性的功效的测试结果如图8,由图8可发现,蔬莓果发酵物中超氧化物歧化酶活性为蔬莓果汁的1.7倍。此结果显示,本发明蔬莓果发酵物会提升超氧化物歧化酶的活性,以达到增强保健抗氧化功效的目的。

  实施例8.蔬莓果发酵物皮肤纤维母细胞胶原蛋白、弹性蛋白生合成基因分析

  本发明以人类皮肤纤维母细胞(CCD-966sk)进行本发明的蔬莓果发酵物的细胞实验。该人类皮肤纤维母细胞是购自美国典型培养物保藏中心,编号CRL-1881。该细胞是培养于含有10%的胎牛血清(Fetal Bovine Serum)的MEM(Minimum essential medium,购自Gibco,美国,12100-046)培养基,其中加入1mM的丙酮酸钠(sodium pyruvate)以及1%的青霉素/链霉素。

  本实施例将前述人类皮肤纤维母细胞培养于含有前述MEM培养基的24孔培养盘中,每孔中植入2x104个细胞,于37℃培养24小时。再将细胞分为两组:第一组为控制组(Control));第二组为实验组,实验组中加入实施例5的蔬莓果发酵物,使其蔬莓果发酵物最终浓度为1mg/mL。接着于37℃培养24小时后进行下述步骤。

  基于定量聚合酶链锁反应(quantitative polymerase chain reaction,简称qPCR)测定细胞中与胶原蛋白、弹力蛋白生合成相关的基因(目标基因)的表现量,其步骤简述如下。依据厂商使用说明,利用RNA萃取套组(RNA Extraction Kit;Geneaid)自细胞分离出RNA,于37℃下以反转录酶III Reverse Transcriptase(Invitrogen)将2000ng RNA反转录为cDNA。其后,通过目标基因与作为内部对照的甘油醛3-磷酸脱氢酶(Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)基因的引子对(表二),利用qPCR套组(KAPA CYBR FAST qPCR Kit(2X);KAPA Biosystems)在PCR反应仪(Step One PlusReal-Time PCR system;Applied Biosystems)对前述cDNA进行qPCR,以取得解链曲线(melting curve)。

  表二、引子序列表

  

  最终,使用2-ΔΔCT方法测定目标基因的相对表现量。该方法以GAPDH基因的循环阈值(CT)作为内部对照的参考基因的循环阈值,按照以下公式计算相对倍数变化:

  ΔCT=实验组或控制组的目标基因的CT-内部对照的CT

  ΔΔCT=实验组的ΔCT-控制组的ΔCT

  倍数变化=2-ΔΔCT平均值

  统计分析是使用Excel软件中的STDEV函数计算各基因相对表现量的标准偏差,并以单尾学生t检验(TTEST)计算统计上差异。

  本实施例检测对照组及实验组(蔬莓果发酵物)中α1-第一型胶原蛋白(collagen,type I,alpha 1)的基因COL1A1、α2-第一型胶原蛋白(collagen,type I,alpha 2)的基因COL1A2及弹性蛋白(Elastin)的基因ELN的表现量,以证明本发明所提供的蔬莓果发酵物是否具有促进胶原蛋白、弹力蛋白生合成的功能,结果请参照图9、10,由图9可发现COL1A1、COL1A2基因的表现量分别为对照组的1.22、1.26倍(*表示p<0.05),从图10亦可看出ELN的表现量为对照组的1.29倍(***表示p<0.001),由此可知,本发明所提供的蔬莓果发酵物确能提升胶原蛋白、弹力蛋白基因的表现量,进而提升胶原蛋白、弹力蛋白的生合成。

  实施例9.蔬莓果发酵物面膜人体功效试验

  本实施例的实验样品为蔬莓果发酵物面膜以及安慰剂面膜,其中蔬莓果发酵物面膜以及安慰剂面膜所使用的布体相同,而蔬莓果发酵物面膜与安慰剂面膜所含有的液态物质,其成分配比分别如表三所示:

  表三、面膜所含有的液态物质的成分配比

  其中,举例而言,抗氧化剂可为馨鲜酮(Hydroxyacetophenone);保湿剂可为1,3-丁二醇;增稠剂可为三仙胶(Xanthan gum)或/及丙烯酸酯/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物(Acrylates/C10-30 Alkyl Acrylate Crosspolymer),增溶剂可为1,2-己二醇(1,2-Hexanediol);pH平衡剂可为三乙醇胺(Triethanolamine)。

  本实施例的实验,受试者有8人,每人皆将前述蔬莓果发酵物面膜与安慰剂面膜分别贴敷于左右半脸,15分钟后取下,以指腹稍加按摩促进吸收,并于使用前、后分别使用VISIA肤质分析系统(VISIA Complexion Analysis System)(购自Canfield scientific,USA)进行检测,检测项目为:皮肤含水量、弹性、纹理状态及皱纹状态,此处的「纹理状态的检测」是用仪器针对脸颊部位高低差来计算肌肤平滑度,而「皱纹状态的检测」是用仪器看眼周皱纹的深浅跟数量一起评估出来的数值,结果如图11-14所示。

  由图11可以得知受试者在使用本发明的蔬莓果发酵物面膜后,皮肤含水量相较于使用前,可明显提升13.7%(**表示p<0.01),而安慰剂面膜仅能增加不具显着性的3.2%;由图12可得知受试者在使用本发明的蔬莓果发酵物面膜后,皮肤弹性相较于使用前,增加了4.4%,而安慰剂面膜仅有0.9%的改变;由图13可得知受试者在使用本发明的蔬莓果发酵物面膜后,皮肤纹理状态相较于使用前,改善了2.9%,而使用安慰剂面膜后,则与使用前没有明显差异;最后,由图14可得知受试者在使用本发明的蔬莓果发酵物面膜后,皮肤皱纹状态相较于使用前,大幅改善了50%(*表示p<0.05),而使用安慰剂面膜仅有29.4%的改善。

  由上述可知,本发明的蔬莓果发酵物面膜可有效增加皮肤含水量及弹性,并具有改善纹理、抚平皱纹的美肌功效。

  由上述本发明实施方式或实施例可知,本发明提供的纳米嫘萦纤维布,是一种改良的面膜材质,肤感比人造纤维好很多,并可提升原缧萦布的拉伸强度、延展能力、机械强度、致密度及吸水力;此外,本发明所提供的蔬莓果发酵物可提高细胞氧化自由基吸收能力以及抗氧化的功效,亦能提升胶原蛋白、弹力蛋白的生合成,人体功效试验也进一步证明蔬莓果发酵物面膜可有效增加皮肤含水量及弹性,并具有改善纹理、抚平皱纹的美肌功效,由此可见,以纳米嫘萦纤维布结合含有蔬莓果发酵物的精华液,更能将蔬莓果发酵物本身的抗氧化、美肌功能,更有效的导入肌肤,产生加乘的功效。

  以上所述仅为举例性,而非为限制性者。任何未脱离本发明的精神与范畴,而对其进行的等效修改或变更,均应包含于所附的权利要求书所界定的范围中。

  序列表

  <110> 大江生医股份有限公司

  <120> 一种用于保湿及抗老化的蔬莓果发酵物嫘萦纤维面膜

  <150> US62/804,228、US 62/871,216

  <151> 2019-02-12、2019-07-08

  <160> 6

  <210> 1

  <211> 21

  <212> DNA

  <213> 人工序列

  <220>

  <223> 合成引物

  <400> 1

  atcaaccgga ggaatttccg t 21

  <210> 2

  <211> 21

  <212> DNA

  <213> 人工序列

  <220>

  <223> 合成引物

  <400> 2

  caccaggacg accaggtttt c 21

  <210> 3

  <211> 20

  <212> DNA

  <213> 人工序列

  <220>

  <223> 合成引物

  <400> 3

  ggccctcaag gtttccaagg 20

  <210> 4

  <211> 21

  <212> DNA

  <213> 人工序列

  <220>

  <223> 合成引物

  <400> 4

  caccctgtgg tccaacaact c 21

  <210> 5

  <211> 20

  <212> DNA

  <213> 人工序列

  <220>

  <223> 合成引物

  <400> 5

  gctaaggcag ccaagtatgg 20

  <210> 6

  <211> 20

  <212> DNA

  <213> 人工序列

  <220>

  <223> 合成引物

  <400> 6

  cacctgggac aactggaatc 20

《一种用于保湿及抗老化的蔬莓果发酵物嫘萦纤维面膜.doc》
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