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一种玉米秸秆腐解菌剂

2021-02-06 15:20:28

一种玉米秸秆腐解菌剂

  【技术领域

  本发明涉及秸秆降解技术领域,尤其涉及一种玉米秸秆腐解菌剂。

  【背景技术

  东北地区玉米秸秆资源丰富,但却得不到合理处置和应用,因玉米秸秆结构复杂不能得到有效的处理,导致早期冬季和开春因秸秆焚烧造成的极其严重的大气污染。微生物法处理玉米秸秆的优点在于可持续作用直接还田,减少运输成本,投资少的优点。大多数秸秆腐解菌系都是由真菌或细菌组成,但是普通具有降解玉米秸秆的真菌、细菌的耐酸碱范围和温差适应范围都不是太大,其在恶劣环境下的生存能力也不够强,导致其作用效果不够持久,不能最大程度的腐解秸秆,成为制约玉米秸秆腐解率和腐解速度的瓶颈。

  因此,有必要研究一种新的玉米秸秆腐解菌剂来应对现有技术的不足,以解决或减轻上述一个或多个问题。

  【发明内容

  有鉴于此,本发明提供了一种玉米秸秆腐解菌剂,能够在酸碱环境和生存温度恶劣的条件下对玉米秸秆产生持久的降解和腐解作用,大大提高玉米秸秆的腐解率。

  一方面,本发明提供一种玉米秸秆腐解菌剂,其特征在于,所述腐解菌剂为放线菌,所述放线菌为链霉菌、诺卡氏菌、节杆菌和小单胞菌中一种或多种。

  如上所述的方面和任一可能的实现方式,进一步提供一种实现方式,所述链霉菌为复合菌,所述复合菌包括第一链霉菌、第二链霉菌和第三链霉菌。

  如上所述的方面和任一可能的实现方式,进一步提供一种实现方式,所述第一链霉菌、所述第二链霉菌和所述第三链霉菌均为革兰氏阳性好氧菌。

  如上所述的方面和任一可能的实现方式,进一步提供一种实现方式,所述第一链霉菌的基因序列为:

  TGATTACGAATTCGAGCTCGGTACCCGGGGATCCTCTAGAGATTAGAGTTTGATCCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGATGAACCACCTTCGGGTGGGGATTAGTGGCGAACGGGTGAGTAACACGTGGGCAATCTGCCCTGCACTCTGGGACAAGCCCTGGAAACGGGGTCTAATACCGGATACTGACCTGCCAAGGCATCTTGGCGGGTCGAAAGCTCCGGCGGTGCAGGATGAGCCCGCGGCCTATCAGCTTGTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCGACGACGGGTAGCCGGCCTGAGAGGGCGACCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGAAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGACGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTCAGCAGGGAAGAAGCGAAAGTGACGGTACCTGCAGAAGAAGCGCCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGCGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCGTAAAGAGCTCGTAGGCGGCTTGTCGCGTCGGTTGTGAAAGCCCGGGGCTTAACCCCGGGTCTGCAGTCGATACGGGCAGGCTAGAGTTCGGTAGGGGAGATCGGAATTCCTGGTGTAGCGGTGAAATGCGCAGATATCAGGAGGAACACCGGTGGCGAAGGCGGATCTCTGGGCCGATACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGGCACTAGGTGTGGGCAACATTCCACGTTGTCCGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGTGCCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGTGGCTTAATTCGACGCAACGCGAAGAACCTTACCAAGGCTTGACATACACCGGAAAGCATCAGAGATGGTGCCCCCCTTGTGGTCGGTGTACAGGTGGTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGTCCCGTGTTGCCAGCAACTCTTCGGAGGTTGGGGACTCACGGGAGACCGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCATCATGCCCCTTATGTCTTGGGCTGCACACGTGCTACAATGGCCGGTACAATGAGCTGCGATACCGCAAGGTGGAGCGAATCTCAAAAAGCCGGTCTCAGTTCGGATTGGGGTCTGCAACTCGACCCCATGAAGTCGGAGTCGCTAGTAATCGCAGATCAGCATTGCTGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACGTCACGAAAGTCGGTAACACCCGAAGCCGGTGGCCCAACCCCTTGTGGGAGGGAGCTGTCGAAGGTGGGACTGGCGATTGGGACGAAGTCGTAACAAGGTAGCCGTACCGGAAGGTGCGGCTGGATCACCTCCTTAATCGTCGACCTGCAGGCATGCAAGCTGGCACTG。

  如上所述的方面和任一可能的实现方式,进一步提供一种实现方式,所述第二链霉菌的基因序列为:

  TACGATTCGAGCTCGGTACCCGGGGATCCTCTAGAGATAGAGTTTGATCCTGGCTCAGGACGGACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGATGAAGCCCTTCGGGGTGGATTAGTGGCGAACGGGTGAGTAACACGTGGGCAATCTGCCCTTCACTCTGGGACAAGCCCTGGAAACGGGGTCTAATACCGGATACGAGTTCGGGAGGCATCTCCCGGACTGGAAAGCTCCGGCGGTGAAGGATGAGCCCGCGGCCTATCAGCTTGTTGGTGGGGTAATGGCCTACCAAGGCGACGACGGGTAGCCGGCCTGAGAGGGCGACCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGAAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGACGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTCAGCAGGGAAGAAGCGAGAGTGACGGTACCTGCAGAAGAAGCGCCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGCGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCGTAAAGAGCTCGTAGGCGGCTTGTCACGTCGGGTGTGAAAGCCCGGGGCTTAACCCCGGGTCTGCATCCGATACGGGCAGGCTAGAGTGTGGTAGGGGAGATCGGAATTCCTGGTGTAGCGGTGAAATGCGCAGATATCAGGAGGAACACCGGTGGCGAAGGCGGATCTCTGGGCCATTACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGTTGGGAACTAGGTGTTGGCGACATTCCACGTCGTCGGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGTTCCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCAGCGGAGCATGTGGCTTAATTCGACGCAACGCGAAGAACCTTACCAAGGCTTGACATATACCGGAAAGCATTAGAGATAGTGCCCCCCTTGTGGTCGGTATACAGGTGGTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGTCCTGTGTTGCCAGCATGCCCTTCGGGGTGATGGGGACTCACAGGAGACCGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCATCATGCCCCTTATGTCTTGGGCTGCACACGTGCTACAATGGCCGGTACAAAGAGCTGCGATGCCGCGAGGCGGAGCGAATCTCAAAAAGCCGGTCTCAGTTCGGATTGGGGTCTGCAACTCGACCCCATGAAGTCGGAGTTGCTAGTAATCGCAGATCAGCATTGCTGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACGTCACGAAAGTCGGTAACACCCGAAGCCGGTGGCCCAACCCCTTGTGGGAGGGAGCTGTCGAAGGTGGGACCAGCGATTGGGACGAAGTCGTAACAAGGTAGCCGTATCGGAAGGTGCGGCTGGATCACCTCCTTAATCGTCGACCTGCAGGCATGCAAGCTGGC。

  如上所述的方面和任一可能的实现方式,进一步提供一种实现方式,所述第三链霉菌的基因序列为:

  TACGATTCGAGCTCGGTACCCGGGGATCCTCTAGAGATTAGAGTTTGATCCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGATGAACCGGCTTCGGCCGGGGATTAGTGGCGAACGGGTGAGTAACACGTGGGCAATCTGCCCTGCACTCTGGGACAAGCCCTGGAAACGGGGTCTAATACCGGATACTGATTACCTTGGGCATCCTTGGTGATCGAAAGCTCCGGCGGTGCAGGATGAGCCCGCGGCCTATCAGCTTGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGACGGGTAGCCGGCCTGAGAGGGCGACCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGAAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGACGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTCGGCAGGGAAGAAGCGAAAGTGACGGTATCTGCAGAAGAAGCGCCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGCGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCGTAAAGAGCTCGTAGGCGGCTTGTCGCGTCGGTTGTGAAAGCCCGGGGCTTAACCCCGGGTCTGCAGTCGATACGGGCAGGCTAGAGTTCGGTAGGGGAGATCGGAATTCCTGGTGTAGCGGTGAAATGCGCAGATATCAGGAGGAACACCGGTGGCGAAGGCGGATCTCTGGGCCGATACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGGCACTAGGTGTGGGCAACATTCCACGTTGTCCGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGTGCCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGTGGCTTAATTCGACGCAACGCGAAGAACCTTACCAAGGCTTGACATACACCGGAAACATCCAGAGATGGGTGCCCCCTTGTGGTCGGTGTACAGGTGGTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGTCCCGTGTTGCCAGCAGGCCCTTGTGGTGCTGGGGACTCACGGGAGACCGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCATCATGCCCCTTATGTCTTGGGCTGCACACGTGCTACAATGGCCGGTACAATGAGCTGCGATACCGCGAGGTGGAGCGAATCTCAAAAAGCCGGTCTCAGTTCGGATTGGGGTCTGCAACTCGACCCCATGAAGTCGGAGTCGCTAGTTATCGCAGATCAGCATTGCTGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACGTCACGAAAGTCGGTAACACCCGAAGCCGGTGGCCCAACCCCTTGTGGGAGGGAGCTGTCGAAGGTGGGACTGGCGATTGGGACGAAGTCGTAACAAGGTAGCCGTACCGGAAGGTGCGGCTGGATCACCTCCTTAATCGTCGACCTGCAGGCATGCAAGCTGGC。

  如上所述的方面和任一可能的实现方式,进一步提供一种实现方式,所述腐解菌剂14周后对玉米秸秆的腐解率达到75%以上。

  如上所述的方面和任一可能的实现方式,进一步提供一种实现方式,所述第一链霉菌、所述第二链霉菌和所述第三链霉菌的浓度均为109个/mL以上,且所述第一链霉菌、所述第二链霉菌和所述第三链霉菌的数量比为1:1:1。

  如上所述的方面和任一可能的实现方式,进一步提供一种实现方式,所述腐解菌剂的溶剂包括酵母粉、无机盐和葡萄糖。

  如上所述的方面和任一可能的实现方式,进一步提供一种实现方式,使用所述腐解菌剂进行腐解时,所述腐解菌剂的质量为秸秆质量的5%以上。

  与现有技术相比,本发明可以获得包括以下技术效果:本发明的腐解菌剂既有高效的降解效果,同时又对玉米秸秆有持久的腐解作用,能够在恶劣环境下持续作用,达到玉米秸秆最大程度的腐解,对玉米秸秆的腐解率高达75%以上。

  当然,实施本发明的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有技术效果。

  【附图说明

  为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案,下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其它的附图。

  图1是本发明一个实施例提供的邻近法构建菌株G1与所有相似菌属的典型菌株的系统发育树;

  图2是本发明一个实施例提供的邻近法构建菌株G2与所有相似菌属的典型菌株的系统发育树;

  图3是本发明一个实施例提供的邻近法构建菌株G3与所有相似菌属的典型菌株的系统发育树;

  图4是本发明一个实施例提供的菌株Streptomyces sp.G1T纤维素酶活大小测定;

  图5是本发明一个实施例提供的菌株Streptomyces sp.G2T纤维素酶活大小测定;

  图6是本发明一个实施例提供的菌株Streptomyces sp.G3T纤维素酶活大小测定;

  图7是本发明一个实施例提供的复合菌群功能互补性验证实验;

  图8是本发明一个实施例提供的响应曲面图;

  图9是本发明一个实施例提供的不同处理玉米秸秆腐解效率;

  图10是本发明一个实施例提供的不同处理条件下的腐解效果图。

  【具体实施方式

  为了更好的理解本发明的技术方案,下面结合附图对本发明实施例进行详细描述。

  应当明确,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例,都属于本发明保护的范围。

  在本发明实施例中使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的,而非旨在限制本发明。在本发明实施例和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”、“所述”和“该”也旨在包括多数形式,除非上下文清楚地表示其他含义。

  放线菌在恶劣环境下能形成芽孢,具有较宽的酸碱和温差适应范围,恶劣环境下生存能力极强。通过在自然环境下筛选具有高效降解纤维素腐解玉米秸秆的放线菌,既有高效的降解效果,同时又对玉米秸秆有持久的腐解作用,达到玉米秸秆最大程度的腐解。

  可降解秸秆的放线菌包括链霉菌、诺卡氏菌、节杆菌、小单胞菌等,放线菌对秸秆的降解作用主要依靠其菌丝较强的穿透能力,在中、碱性环境中提高秸秆的水溶性,使秸秆降解速度加快。

  一:通过对在自然界土壤菌株进行筛选分离,获得具有高效降解能力的放线菌。

  1、刚果红透明圈筛选

  由菌株初筛透明圈实验(见表1),根据透明圈与菌落直径的比值,其中G1、G2和G3比值相比其他菌株有明显区别,比值较高,说明这三株菌,有较强的降解纤维素的能力,选取比值最高的三株菌株G1、G2和G3进行后续实验。

  表1透明圈与菌落直径比值

  

  2、菌种G1,G2,G3的16S rRNA和gyrB基因的测序及系统进化分析

  利用PCR技术对待鉴定菌株G1进行了16S rRNA基因序列的扩增,去掉引物后得到长度为1597bp的16S rRNA基因序列(序列信息见说明书后半部分基因序列)。采用邻近法将G1与其相似菌株构建系统进化发育树结果显示Streptomyces sp.G1T与Streptomycesdiastaticus NRRL B-1773T(DQ026631)形成一个独立的分支,并且与Streptomycescoelicoflavus NBRC 15399T(AB184650)和Streptomyces hyderabadensis OU-40T(FM998652)两株菌形成一个稳定的分支,证明其为该菌属的菌种。如图1所示,其中,分支处仅显示出>50%的靴值,0.001代表两个核苷的遗传距离。

  利用PCR技术对待鉴定菌株G2进行了16S rRNA基因序列的扩增,去掉引物后得到长度为1585bp的16S rRNA基因序列(序列信息见说明书后半部分基因序列)。采用邻近法将G2与其相似菌株构建系统进化发育树结果显示Streptomyces sp.G2T与Streptomycesgulbargensis DAS131T(DQ317411)形成一个独立的分支,并且与Streptomyces roseolusNBRC 12816T(AB184168)、Streptomyces filamentosus NBRC 12767T(AB184130)、Streptomyces roseofulvus NBRC 13194T(AB184327)、Streptomyces laurentii ATCC31255T(AP017424)四株菌形成一个稳定的分支,证明其为该菌属的菌种。如图2所示,其中,分支处仅显示出>50%的靴值,0.002代表两个核苷的遗传距离。

  利用PCR技术对待鉴定菌株G3进行了16S rRNA基因序列的扩增,去掉引物后得到长度为1589bp的16S rRNA基因序列(序列信息见说明书后半部分基因序列)。采用邻近法将G3与其相似菌株构建系统进化发育树结果显示Streptomyces sp.G3T与Streptomycescinereospinus NBRC 15397T(AB184648)、Streptomyces pluripotens MUSC 135T(CP021080)和Streptomyces leeuwenhoekii C34T(LN831790)三株菌形成独立稳定的分支,证明其为该菌属的菌种。如图3所示,分支处仅显示出>50%的靴值,0.001代表两个核苷的遗传距离。

  3生理生化特征

  菌株G1,G2,G3均为革兰氏阳性好氧菌,在ISP3培养基上通过在不同温度培养14天,检测到三株菌可生长温度范围为18-40℃,最适温度均为28℃。利用ISP2液体上培养14天来检测其pH耐受范围,结果为5-9,pH 7.0为最适生长条件,G1和G3氯化钠耐受范围为0-4%,G2氯化钠耐受范围为0-2%。三株菌在三个生理生化实验中均表现出阳性反应,包括淀粉分解反应、纤维素水解和过氧化氢酶实验;而硝酸盐还原、H2S产生实验、Tween80实验结果三株菌均显示为阴性;明胶液化实验,G1、G2结果为阳性,G3为阴性;牛奶凝固与胨化、七叶苷分解和Tween40实验结果,G1和G2显示为阴性,G3结果为阳性;Tween20实验结果显示G1为阳性,G2和G3显示为阴性;脲酶产生实验结果G1呈现阴性,G2和G3显示为阳性。通过生理生化实验,菌株G1,G2,G3的生理生化特征详情见表2。

  表2菌株G1,G2,G3生理生化特征

  +,阳性;-阴性

  

  

  二:通过单因素实验寻找影响发酵效果的最显著因素,设计响应曲面进行发酵条件优化,并对玉米秸秆发酵效果进行物理、化学等方面的分析,构建高效降解纤维素的菌群。

  1、菌株玉米秸秆发酵实验

  为验证菌株分解利用玉米秸秆的能力,分别测定菌株Streptomyces sp.G1T,Streptomyces sp.G2T,Streptomyces sp.G3T玉米秸秆发酵的第3d,第6d,第9d,第12d,第15d,第18d,第21d,第24d纤维素酶活大小,如图4,5,6所示。从图中可以看出3个菌株在玉米秸秆发酵过程中,纤维素酶活大小差异明显,Streptomyces sp.G1T在玉米秸秆发酵过程中CMCase和β-glucosidase纤维素酶活相对较高;Streptomyces sp.G2T在玉米秸秆发酵过程中Exoglucanases和CMCase纤维素酶活相对较高;Streptomyces sp.G3T在玉米秸秆发酵过程中β-glucosidase纤维素酶活相对较高。3个菌株在秸秆纤维素酶活中有互补作用。

  2、菌群功能互补性验证实验:

  通过单一菌种发酵处理玉米秸秆,与复合菌群发酵进行效果对比,如图7所示,菌株Streptomyces sp.G1T对纤维素,半纤维素有较高的腐解能力,但对木质素的利用能力较弱;菌株Streptomyces sp.G2T对纤维素和半纤维素的腐解能力是三株菌种中最强的;而菌株Streptomyces sp.G3T对木质素的腐解能力是三株菌中最强的;对比复合菌群的发酵效果,可以看出复合菌群对纤维素,半纤维素及木质素的腐解能力有明显的优势,这也说明,不同菌株的复合,可以形成能力互补,腐解效果优于单一菌株的腐解。后续实验将构建复合菌群并进行发酵条件的优化。

  3、响应曲面实验:

  使用Design-expert 8进行多响应值的最优条件选择,从而得出优化工艺参数:pH为7.07,温度为30.19℃,接菌量为5%,转速为210rpm时,玉米秸秆失重率的预测值为60.62%,如图8(a)和图8(b)所示。设计三组平行实验验证设计结果的准确性,考虑实际操作,将pH设为7,温度设为30℃,接菌量设为5%,转速设为210rpm为最优工艺,在此条件下三次取平均值得到玉米秸秆失重率为60.55%,与预测值基本相符,说明建立的回归方程能真实准确的反映上述4因素对玉米秸秆降解的影响,证明该工艺条件可行。

  三:通过室内模拟田间试验,验证复合菌群对玉米秸秆的实际促分解效果分析。

  试验在室内培养进行,将土壤样品在30℃恒温条件下黑暗培养,试验设计土壤(A)、土壤+秸秆(B)、土壤+秸秆+沃宝(C)、土壤+秸秆+复合菌剂ZP-G(D)。其中,D中复合菌剂的质量占秸秆质量的5%。在培养过程中每个2周取一次样,各个处理3次重复。D实验中的复合菌剂中G1、G2和G3的接种量比例1:1:1。使用的溶剂包括酵母粉、无机盐和葡萄糖等成分。三种菌在菌剂中的浓度均为109个/mL以上。

  从图9和图10可以看出,D处理秸秆腐解率最高,14周后玉米秸秆腐解率为75.83%,分别比B处理和C处理秸秆腐解率高24.81%和20.08%。赵聪(2014)在室内模拟培养条件下玉米秸秆的分解特征及物质组成变化中表明,添加微生物菌剂(黑曲霉菌悬液)的处理4、6、10处理,10周后秸秆腐解率分别为47.10%、46.54%和45.30%,均高于未添加菌剂的处理。本研究B、C、D处理在第10周玉米秸秆腐解率分别为45.46%、48.80%和62.75%。由此可见本研究未加微生物菌剂的处理与赵聪报道的腐解率基本一致,本研究添加秸秆腐解菌剂的处理D高于赵聪报道的4、6、10处理,约提高18.4%。穆春雷(2013)在玉米秸秆腐解复合菌系YM-1的构建及其降解性能研究中报道,在室内培养20天后,复合菌系YM-1处理的玉米秸秆腐解率为36.9%,本研究的D处理在14天后秸秆腐解菌剂为33.52%,28天后腐解率为42.75%。因此,本研究的玉米秸秆腐解菌剂ZP-G可以快速降解玉米秸秆,在秸秆还田过程中具有重要的应用价值。

  基因序列:

  Streptomyces sp.G1T 16S rRNA的基因序列(1597bp)为:

  TGATTACGAATTCGAGCTCGGTACCCGGGGATCCTCTAGAGATTAGAGTTTGATCCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGATGAACCACCTTCGGGTGGGGATTAGTGGCGAACGGGTGAGTAACACGTGGGCAATCTGCCCTGCACTCTGGGACAAGCCCTGGAAACGGGGTCTAATACCGGATACTGACCTGCCAAGGCATCTTGGCGGGTCGAAAGCTCCGGCGGTGCAGGATGAGCCCGCGGCCTATCAGCTTGTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCGACGACGGGTAGCCGGCCTGAGAGGGCGACCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGAAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGACGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTCAGCAGGGAAGAAGCGAAAGTGACGGTACCTGCAGAAGAAGCGCCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGCGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCGTAAAGAGCTCGTAGGCGGCTTGTCGCGTCGGTTGTGAAAGCCCGGGGCTTAACCCCGGGTCTGCAGTCGATACGGGCAGGCTAGAGTTCGGTAGGGGAGATCGGAATTCCTGGTGTAGCGGTGAAATGCGCAGATATCAGGAGGAACACCGGTGGCGAAGGCGGATCTCTGGGCCGATACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGGCACTAGGTGTGGGCAACATTCCACGTTGTCCGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGTGCCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGTGGCTTAATTCGACGCAACGCGAAGAACCTTACCAAGGCTTGACATACACCGGAAAGCATCAGAGATGGTGCCCCCCTTGTGGTCGGTGTACAGGTGGTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGTCCCGTGTTGCCAGCAACTCTTCGGAGGTTGGGGACTCACGGGAGACCGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCATCATGCCCCTTATGTCTTGGGCTGCACACGTGCTACAATGGCCGGTACAATGAGCTGCGATACCGCAAGGTGGAGCGAATCTCAAAAAGCCGGTCTCAGTTCGGATTGGGGTCTGCAACTCGACCCCATGAAGTCGGAGTCGCTAGTAATCGCAGATCAGCATTGCTGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACGTCACGAAAGTCGGTAACACCCGAAGCCGGTGGCCCAACCCCTTGTGGGAGGGAGCTGTCGAAGGTGGGACTGGCGATTGGGACGAAGTCGTAACAAGGTAGCCGTACCGGAAGGTGCGGCTGGATCACCTCCTTAATCGTCGACCTGCAGGCATGCAAGCTGGCACTG。

  Streptomyces sp.G2T 16S rRNA的基因序列(1585bp)为:

  TACGATTCGAGCTCGGTACCCGGGGATCCTCTAGAGATAGAGTTTGATCCTGGCTCAGGACGGACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGATGAAGCCCTTCGGGGTGGATTAGTGGCGAACGGGTGAGTAACACGTGGGCAATCTGCCCTTCACTCTGGGACAAGCCCTGGAAACGGGGTCTAATACCGGATACGAGTTCGGGAGGCATCTCCCGGACTGGAAAGCTCCGGCGGTGAAGGATGAGCCCGCGGCCTATCAGCTTGTTGGTGGGGTAATGGCCTACCAAGGCGACGACGGGTAGCCGGCCTGAGAGGGCGACCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGAAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGACGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTCAGCAGGGAAGAAGCGAGAGTGACGGTACCTGCAGAAGAAGCGCCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGCGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCGTAAAGAGCTCGTAGGCGGCTTGTCACGTCGGGTGTGAAAGCCCGGGGCTTAACCCCGGGTCTGCATCCGATACGGGCAGGCTAGAGTGTGGTAGGGGAGATCGGAATTCCTGGTGTAGCGGTGAAATGCGCAGATATCAGGAGGAACACCGGTGGCGAAGGCGGATCTCTGGGCCATTACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGTTGGGAACTAGGTGTTGGCGACATTCCACGTCGTCGGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGTTCCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCAGCGGAGCATGTGGCTTAATTCGACGCAACGCGAAGAACCTTACCAAGGCTTGACATATACCGGAAAGCATTAGAGATAGTGCCCCCCTTGTGGTCGGTATACAGGTGGTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGTCCTGTGTTGCCAGCATGCCCTTCGGGGTGATGGGGACTCACAGGAGACCGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCATCATGCCCCTTATGTCTTGGGCTGCACACGTGCTACAATGGCCGGTACAAAGAGCTGCGATGCCGCGAGGCGGAGCGAATCTCAAAAAGCCGGTCTCAGTTCGGATTGGGGTCTGCAACTCGACCCCATGAAGTCGGAGTTGCTAGTAATCGCAGATCAGCATTGCTGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACGTCACGAAAGTCGGTAACACCCGAAGCCGGTGGCCCAACCCCTTGTGGGAGGGAGCTGTCGAAGGTGGGACCAGCGATTGGGACGAAGTCGTAACAAGGTAGCCGTATCGGAAGGTGCGGCTGGATCACCTCCTTAATCGTCGACCTGCAGGCATGCAAGCTGGC。

  Streptomyces sp.G3T 16S rRNA的基因序列(1589bp)为:

  TACGATTCGAGCTCGGTACCCGGGGATCCTCTAGAGATTAGAGTTTGATCCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGATGAACCGGCTTCGGCCGGGGATTAGTGGCGAACGGGTGAGTAACACGTGGGCAATCTGCCCTGCACTCTGGGACAAGCCCTGGAAACGGGGTCTAATACCGGATACTGATTACCTTGGGCATCCTTGGTGATCGAAAGCTCCGGCGGTGCAGGATGAGCCCGCGGCCTATCAGCTTGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGACGGGTAGCCGGCCTGAGAGGGCGACCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGAAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGACGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTCGGCAGGGAAGAAGCGAAAGTGACGGTATCTGCAGAAGAAGCGCCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGCGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCGTAAAGAGCTCGTAGGCGGCTTGTCGCGTCGGTTGTGAAAGCCCGGGGCTTAACCCCGGGTCTGCAGTCGATACGGGCAGGCTAGAGTTCGGTAGGGGAGATCGGAATTCCTGGTGTAGCGGTGAAATGCGCAGATATCAGGAGGAACACCGGTGGCGAAGGCGGATCTCTGGGCCGATACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGGCACTAGGTGTGGGCAACATTCCACGTTGTCCGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGTGCCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGTGGCTTAATTCGACGCAACGCGAAGAACCTTACCAAGGCTTGACATACACCGGAAACATCCAGAGATGGGTGCCCCCTTGTGGTCGGTGTACAGGTGGTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGTCCCGTGTTGCCAGCAGGCCCTTGTGGTGCTGGGGACTCACGGGAGACCGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCATCATGCCCCTTATGTCTTGGGCTGCACACGTGCTACAATGGCCGGTACAATGAGCTGCGATACCGCGAGGTGGAGCGAATCTCAAAAAGCCGGTCTCAGTTCGGATTGGGGTCTGCAACTCGACCCCATGAAGTCGGAGTCGCTAGTTATCGCAGATCAGCATTGCTGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACGTCACGAAAGTCGGTAACACCCGAAGCCGGTGGCCCAACCCCTTGTGGGAGGGAGCTGTCGAAGGTGGGACTGGCGATTGGGACGAAGTCGTAACAAGGTAGCCGTACCGGAAGGTGCGGCTGGATCACCTCCTTAATCGTCGACCTGCAGGCATGCAAGCTGGC。

  以上对本申请实施例所提供的一种玉米秸秆腐解菌剂,进行了详细介绍。以上实施例的说明只是用于帮助理解本申请的方法及其核心思想;同时,对于本领域的一般技术人员,依据本申请的思想,在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处,综上所述,本说明书内容不应理解为对本申请的限制。

  如在说明书及权利要求书当中使用了某些词汇来指称特定组件。本领域技术人员应可理解,硬件制造商可能会用不同名词来称呼同一个组件。本说明书及权利要求书并不以名称的差异来作为区分组件的方式,而是以组件在功能上的差异来作为区分的准则。如在通篇说明书及权利要求书当中所提及的“包含”、“包括”为一开放式用语,故应解释成“包含/包括但不限定于”。“大致”是指在可接收的误差范围内,本领域技术人员能够在一定误差范围内解决所述技术问题,基本达到所述技术效果。说明书后续描述为实施本申请的较佳实施方式,然所述描述乃以说明本申请的一般原则为目的,并非用以限定本申请的范围。本申请的保护范围当视所附权利要求书所界定者为准。

  还需要说明的是,术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含,从而使得包括一系列要素的商品或者系统不仅包括那些要素,而且还包括没有明确列出的其他要素,或者是还包括为这种商品或者系统所固有的要素。在没有更多限制的情况下,由语句“包括一个……”限定的要素,并不排除在包括所述要素的商品或者系统中还存在另外的相同要素。

  应当理解,本文中使用的术语“和/或”仅仅是一种描述关联对象的关联关系,表示可以存在三种关系,例如,A和/或B,可以表示:单独存在A,同时存在A和B,单独存在B这三种情况。另外,本文中字符“/”,一般表示前后关联对象是一种“或”的关系。

  上述说明示出并描述了本申请的若干优选实施例,但如前所述,应当理解本申请并非局限于本文所披露的形式,不应看作是对其他实施例的排除,而可用于各种其他组合、修改和环境,并能够在本文所述申请构想范围内,通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离本申请的精神和范围,则都应在本申请所附权利要求书的保护范围内。

《一种玉米秸秆腐解菌剂.doc》
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