一种含褐藻寡糖组合物拌种剂的制备方法
技术领域
本发明属于农业领域，涉及生物刺激素组合物，具体来说是一种含褐藻寡糖、甘露醇、有机碘和功能型氨基酸的组合物，可用于拌种提高出苗率和幼苗生长势。
背景技术
天然海藻含有大量有利于植物生长发育的天然生物活性物质和矿物质营养元素：包括海藻多糖、酚类、甜菜碱、氨基酸、甘露醇、植物生长调节物质、氮、磷、钾及铁、硼、钼、钙、镁、铁、碘、钴、镍、锌、锰、铜等微量元素。海藻多糖及褐藻寡糖具有增强植物的光合作用、重金属离子的螯合作用，增强细胞渗透压。施入土壤后，可改善土壤结构，增加土壤透气和聚结的能力。作物吸收后，能提高机体免疫力，有效改善作物品质。酚类多聚化合物可增强作物抗性，防治病毒性侵染；可增强作物抗寒、抗旱和抗盐碱能力。甜菜碱是一种氨基酸或亚氨基酸的衍生物，可大大提高植物叶绿素的含量，增强作物的抗寒、抗旱和抗盐碱能力，对植物的生长有调节和促进作用。甘露醇具有参与机体的光合作用，调节机体营养渗透平衡，迅速修复愈合伤口，疏通植物受阻(伤)微管束。增强植物的免疫力，提高植物抗盐能力，维持细胞生存和促进生长分化的作用。有机碘能促进维生素的吸收利用，增强酶的活力，促进生长发育。能杀死细菌、真菌、病毒和阿半巴原虫。细胞激动素作为植物内激素，刺激其生长。具有促进细胞分裂，细胞体扩大，打破种子休眠、侧芽促使萌发，解除顶端优势，促进生长，抑制衰老等作用。赤霉素及吲哚乙酸、吲哚丁酸等生长素可打破休眠，促进植物生长，诱导开花，刺激新根的形成，促进插条发根、调节愈伤组织的形态建成。
利用褐藻胶裂解酶将褐藻多糖裂解为活性褐藻寡糖，打破细胞壁，释放内容物质，相比传统的物理、化学破壁法，利用酶解技术可显著提高提取物的生物活性。
γ-氨基丁酸是广泛存在于从细菌到高等植物的一种四碳非蛋白质氨基酸，可通过GABA支路(经过两步三羧酸循环)代谢的，支路包括三个关键酶：存在于细胞质中的谷氨酸脱羧酶(GAD)、存在于线粒体中的GABA转移酶(GABA-T)和琥珀酸半醛脱氢酶(SSADH)。GABA支路和很多生理反应有关，包括胞内pH调控、碳素进入三羧酸循环、氮代谢、昆虫防御、抵御氧化胁迫、渗透调节以及信号传递等。L-精氨酸在植物中除作为一种重要的氮素贮藏营养物供再利用外，还是生成多胺(PA)和一氧化氮(NO)等的前体物质，而PA和NO都是植物中重要的信使分子，参与包括生长发育、抗逆性等在内的几乎所有的生理生化过程。精氨酸脱羧酶(ADC)、精氨酸酶和一氧化氮合酶(NOS)是L-精氨酸分解代谢的关键酶，精氨酸可经ADC或精氨酸酶-鸟氨酸脱羧酶(ODC)途径形成PA，也可经NOS途径形成NO，精氨酸代谢对于植物感知和适应环境变化有重要意义。谷氨酸是植物同化氮的产物，植物体内的谷氨酸既通过转氨基、脱氨基和其他过程形成各种氨基酸，同时还通过三羧酸循环、糖酵解和其他代谢途径形成有机酸、糖等产物，最后转化为蛋白质等植物组成部分，对植物的生理生化过程有重要影响。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有抑制种子霉变、促进种子发芽、提高幼苗生长发育、抵抗环境胁迫、补充微量元素的拌种剂的制备方法。
本发明涉及一种含褐藻寡糖组合物拌种剂的制备方法，其制备方法如下：
步骤a：将淡干褐藻投入到3-8倍质量的0.5％-5％的碳酸钾溶液浸泡2-10小时；
步骤b：将褐藻与浸泡液一起磨成浆液，超声波空化反应2-5小时；
步骤c：加入与碳酸钾等量的柠檬酸搅拌20分钟；
步骤d：加入褐藻胶裂解酶800u/g(以干褐藻当量计算)和氯化镁，20-50℃反应2-24小时；
步骤e：固液分离，分离液添加复合氨基酸0.5％-10％，搅拌至完全溶解。
所得组合物即可用于玉米、水稻、花生等种子的拌种。
一定浓度的碳酸钾溶液浸泡、集合物理磨浆使得藻体微粒更细小，有利于超声波空化降解和褐藻胶裂解酶联合作用使得多糖更彻底的降解为活性寡糖及细胞内容物质充分释放，提高提取液生物活性。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案及优点更明晰，下面结合实施案例对本发明作进一步说明，但本发明包含但不限于如下实施案例。
实施例1
一种含褐藻寡糖组合物拌种剂的制备方法，其制备方法如下：
步骤a：将1kg淡干褐藻投入到4kg的2.5％的碳酸钾溶液浸泡5小时；
步骤b：将褐藻与浸泡液一起磨成浆液，超声波空化反应2.5小时；
步骤c：加入0.1kg的柠檬酸搅拌20分钟；
步骤d：加入褐藻胶裂解酶80万u和氯化镁0.0025kg，50℃反应5小时；
步骤e：固液分离，分离液添加复合氨基酸搅拌至完全溶解，分离液与复合氨基酸质量比19:1，复合氨基酸中γ-氨基丁酸、精氨酸、谷氨酸，质量比为2:3:10。
所得组合物即可用于玉米、水稻、花生等种子的拌种。
实施例2
使用本发明所述含褐藻寡糖组合物的拌种剂提高花生和玉米的出苗率及生长势。
花生和玉米拌种方法如下：
上述拌种剂4g+花生种子200g，搅拌均匀，晾干；上述拌种剂3g+玉米种子200g，搅拌均匀，晾干；以与拌种剂等质量清水拌种为对照。
拌种试验设计：
每个处理5个重复，将拌种后的种子分别点播如大田土中，观察种子生长的差异性。播种后15天，根据出苗数量计算出苗率(出苗数/播种数*100％)，每个处理随机选取20株测定株高(苗茎基部到最长叶子顶部高度)，根长(主根长度)、根数，结果如下表所示。
表1.使用本发明所述含褐藻寡糖组合物的拌种剂提高花生和玉米的出苗率、株高根长的积极影响。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。
