KRAS及其突变体表达抑制剂
1、技术领域
本发明属于医药领域，具体涉及一种喹唑啉衍生物类化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐及其晶型在制备用于治疗由KRAS和/或其突变体表达介导的肿瘤患者的药物中的用途。
2、背景技术
KRAS是一种鼠类肉瘤病毒癌基因，ras基因家族与人类肿瘤相关的基因有三种—H-ras、K-ras和N-ras，分别定位在11、12和1号染色体上。K-ras基因就像体内一个“开关”，它在肿瘤细胞生长以及血管生成等过程的信号传导通路中起着重要调控作用，K-ras正常时能控制调控细胞生长的路径；发生异常时，则导致细胞持续生长，并阻止细胞自我毁灭。当K-ras基因发生突变时，该基因永久活化，持续刺激细胞生长，使细胞内信号传导紊乱，细胞增殖失控而癌变。
KRAS是人类最常见的癌症突变基因，全部癌症的大约30％与KRAS突变的激活相关，尤其在结肠、肺和胰腺癌中发病率最高。KRAS基因突变癌症与预后不良相关。尽管KRAS在若干类型的癌症中的作用是普遍的，但目前没有针对KRAS基因的靶向药物上市，KRAS被认为是“无药可治的”靶标，对于这些癌症患者而言，一旦检测到携带KRAS突变就意味着预后差，且没有治疗药物。在研的药物研发思路大多是攻击该基因的下游MEK靶点，但是效果并不理想。因此，寻找并发现高效的KRAS及其突变抑制剂具有重要意义。
WO2012/027960A1公开了一系列Pan-HER不可逆抑制的喹唑啉衍生物类酪氨酸激酶抑制剂，研究表明，Pan-HER酪氨酸激酶不可逆抑制剂除了有效抑制EGFR外，还对HER2/4具有抑制作用。在对上述专利化合物进行研究的过程中，发明人意外地发现，其化合物对KRAS突变相关肿瘤/癌症具有良好的抑制和治疗作用。
3、发明内容
本发明提供了式(I)所示化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐或其晶型在制备用于治疗由KRAS和/或其突变体介导的肿瘤的药物中的用途，
其中，
R1选自未被取代或被1至2个取代基Q1取代的以下基团：6-10元并环C0-6烷基、7-10元螺环C0-6烷基或7-10元桥环C0-6烷基，其中所述并环、螺环或桥环中的1-3个碳原子可以被1-3个相同或不同的选自O、S(O)m、N(H)m、NCH3和C(O)的杂原子和/或基团置换，但置换后的环中O和C(O)互不相邻，
Q1选自下列一组基团：卤素，羟基，氨基，羧基，氰基，C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6烷基胺基，二(C1-6烷基)胺基，C1-6烷基羰氧基，C1-6烷基酰胺基，C1-6烷基磺酰基，C1-6烷基亚磺酰基，C1-6烷基磺酰胺基和C3-8环烷基；
R2选自氢，未被取代或被1至2个取代基Q2取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基，被取代基Q2取代的甲酰基或N(H)m，
Q2选自下列一组基团：卤素，羟基，氨基，羧基，氰基，C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6烷基胺基，二(C1-6烷基)胺基，C1-6烷基羰氧基，C1-6烷基酰胺基，C1-6烷基磺酰基，C1-6烷基亚磺酰基，C1-6烷基磺酰胺基，C3-8环烷基，不饱和的C5-7环烃基以及饱和或不饱和的3-8元杂环基，其中所述C3-8环烷基、不饱和的C5-7环烃基以及饱和或不饱和的3-8元杂环基可以进一步被1至2个取代基Q3取代，
Q3选自下列一组基团：卤素，羟基，氨基，羧基，氰基，C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6烷基胺基，二(C1-6烷基)胺基，C1-6烷基羰氧基，C1-6烷基酰胺基，C1-6烷基磺酰基，C1-6烷基亚磺酰基，C1-6烷基磺酰胺基和卤素取代的C1-6烷氧基；
R3选自氢，卤素，羟基，氰基，硝基，C1-6烷基，C1-6烷氧基，卤素取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基，C1-6烷基羰氧基，C1-6烷基酰胺基，C1-6烷基磺酰基，C1-6烷基亚磺酰基或C1-6烷基磺酰胺基；
R4、R5和R6各自独立地选自氢，卤素，C1-6烷基，C1-6烷氧基，卤素取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基，C1-6烷基胺基或二(C1-6烷基)胺基；
L选自共价键，O，S(O)m，N(H)m，NCH3或C(O)；
n选自1，2或3；和
m独立选自0，1或2。
在一些优选的实施方案中，
R1选自未被取代或被1至2个取代基Q1取代的以下基团：6-10元饱和并环C0-4烷基、7-10元饱和螺环C0-4烷基或7-10元饱和桥环C0-4烷基，其中所述并环、螺环或桥环中的1-3个碳原子可以被1-3个相同或不同的选自O、S(O)m、N(H)m、NCH3和C(O)的杂原子和/或基团置换，但置换后的环中O和C(O)互不相邻，
Q1选自下列一组基团：卤素，羟基，氨基，羧基，氰基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷基胺基，二(C1-4烷基)胺基，C1-4烷基羰氧基，C1-4烷基酰胺基，C1-4烷基磺酰基，C1-4烷基亚磺酰基，C1-4烷基磺酰胺基和C3-6环烷基；
R2选自氢，未被取代或被1至2个取代基Q2取代的C1-4烷基或C1-4烷氧基，被取代基Q2取代的甲酰基或N(H)m，
Q2选自下列一组基团：卤素，羟基，氨基，氰基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷基胺基，二(C1-4烷基)胺基，C1-4烷基羰氧基，C1-4烷基酰胺基，C1-4烷基磺酰基，C1-4烷基亚磺酰基，C1-4烷基磺酰胺基，C3-6环烷基，不饱和的C5-7环烃基以及饱和或不饱和的5-8元杂环基，其中所述C3-6环烷基、不饱和的C5-7环烃基以及饱和或不饱和的5-8元杂环基可以进一步被1至2个取代基Q3取代，
Q3选自下列一组基团：卤素，羟基，氨基，氰基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷基胺基，二(C1-4烷基)胺基，C1-4烷基羰氧基，C1-4烷基酰胺基，C1-4烷基磺酰基，C1-4烷基亚磺酰基，C1-4烷基磺酰胺基和卤素取代的C1-4烷氧基；
R3选自卤素，氰基，硝基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，卤素取代的C1-4烷基或C1-4烷氧基，C1-4烷基羰氧基，C1-4烷基酰胺基，C1-4烷基磺酰基，C1-4烷基亚磺酰基或C1-4烷基磺酰胺基；
R4、R5和R6各自独立地选自氢，卤素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，卤素取代的C1-4烷基或C1-4烷氧基，C1-4烷基胺基或二(C1-4烷基)胺基；
L选自共价键，O，S(O)m或N(H)m；
n选自1，2或3；和
m独立选自0，1或2。
在一些优选的实施方案中，
R1选自未被取代或被1至2个取代基Q1取代的下列基团：
Q1选自下列一组基团：卤素，羟基，氨基，羧基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷基胺基，二(C1-4烷基)胺基和C3-6环烷基；
R2选自氢，未被取代或被1至2个取代基Q2取代的C1-4烷基，被取代基Q2取代的甲酰基或N(H)m，
Q2选自下列一组基团：卤素，羟基，氨基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷基胺基，二(C1-4烷基)胺基，C1-4烷基羰氧基，C1-4烷基酰胺基，C1-4烷基磺酰基，C1-4烷基磺酰胺基，C3-5环烷基以及饱和或不饱和的5-8元杂环基，其中所述C3-5环烷基、饱和或不饱和的5-8元杂环基可以进一步被1至2个取代基Q3取代，
Q3选自下列一组基团：卤素，羟基，氨基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷基胺基，二(C1-4烷基)胺基，C1-4烷基羰氧基，C1-4烷基酰胺基，C1-4烷基磺酰基，C1-4烷基磺酰胺基和卤素取代的C1-4烷氧基；
R3选自氟，氯，溴，C1-4烷基或C1-4烷氧基；
R4、R5和R6各自独立地选自氢，氟或氯；
L选自共价键，O，S(O)m或N(H)m；
n选自1，2或3；和
m选自0，1或2。
在一些优选的实施方案中，
R1选自未被取代或被1至2个取代基Q1取代的下列基团：
p选自0，1或2，
Q1选自下列一组基团：卤素，氨基，C1-4烷基，C1-4烷基胺基和二(C1-4烷基)胺基；
R2选自氢，未被取代或被1至2个取代基Q2取代的甲基或乙基，被取代基Q2取代的甲酰基或N(H)m，
Q2选自下列一组基团：
(1)卤素，羟基，氨基，C1-4烷氧基，C1-4烷基胺基，二(C1-4烷基)胺基，乙酰氧基，乙酰胺基，甲基磺酰基和甲基磺酰胺基，
(2)环丙基，环戊基，哌啶基，哌嗪基，吗啉基，吡咯烷基，呋喃基，噻吩基，吡咯基，咪唑基，噻唑基，异噻唑基，噁唑基，吡啶基，吡嗪基和嘧啶基，所述这些Q2基团可以进一步被1至2个取代基Q3取代，
Q3选自下列一组基团：卤素，羟基，氨基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷基胺基，二(C1-4烷基)胺基，卤素取代的C1-4烷氧基，乙酰氧基，乙酰胺基，甲基磺酰基和甲基磺酰胺基；
R3选自氟或氯；
R4、R5和R6为氢；
L选自共价键或O；
n为2；和
m独立选自0，1或2。
在一些优选的实施方案中，
R1选自：
R2选自氢，未被取代或被1至2个取代基Q2取代的甲基或乙基，
Q2选自下列一组基团：
(1)甲氧基和二(C1-4烷基)胺基，
(2)哌啶基，哌嗪基，吗啉基，吡咯烷基，呋喃基，环丙烷基，环戊烷基，吡咯基，吡啶基，嘧啶基和噻唑基，所述这些Q2基团可以进一步被1至2个取代基Q3取代，
Q3选自下列一组基团：卤素，羟基、氨基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷基胺基，二(C1-4烷基)胺基和卤素取代的C1-4烷氧基；
R3选自氟或氯；
R4、R5和R6为氢；
L选自共价键或O；和
n为2。
在一些优选的实施方案中，
R1选自：
R2选自氢，未被取代或被1至2个取代基Q2取代的甲基或乙基，
Q2选自下列一组基团：甲氧基，二甲胺基，二乙胺基，哌啶基，哌嗪基和吗啉基；
R3选自氟或氯；
R4、R5和R6为氢；
L选自共价键或O；和
n为2。
在一些优选的实施方案中，
R1选自：
优选R1选自：
在一些优选的实施方案中，
R2选自氢；
R3独立的选自氟或氯；
L选自O；和
n选自2。
在一些优选的实施方案中，其中所述的式(I)化合物选自：
在一些优选的实施方案中，所述的KRAS突变体选自突变位点在G12、G13、K117或Q61位的突变。
在一些优选的实施方案中，所述的KRAS突变体选自G12、K117位突变。
在一些优选的实施方案中，所述的KRAS突变体选自Q61位突变。
在一些优选的实施方案中，所述的KRAS突变体选自G12位突变。
在一些优选的实施方案中，所述的KRAS G12位突变选自G12A、G12D、G12F、G12K、G12N、G12S、G12V、G12Y、G12C、G12E、G12I、G12L、G12R、G12T和G12W中的一种或多种。
在一些优选的实施方案中，所述的KRAS G12位突变选自G12A、G12D、G12S、G12V、G12C和G12R中的一种或多种。
在一些优选的实施方案中，所述的KRAS G13位突变选自G13D、G13C、G13S、G13R、G13A和G13V中的一种或多种。
在一些优选的实施方案中，所述的KRAS Q61位突变选自Q61H、Q61K、Q61R、Q61L、Q61P和Q61E中的一种或多种。
在一些优选的实施方案中，所述的KRAS K117位突变选自K117N。
在一些优选的实施方案中，其中所述的晶型选自式(I)化合物游离体晶型、式(I)化合物的药学上可接受的盐的晶型、式(I)化合物的溶剂化物晶型、式(I)化合物的药学上可接受的盐的溶剂化物晶型或式(I)化合物的共晶体。
在一些优选的实施方案中，式(I)化合物的药学上可接受的盐的晶型选自式(I)化合物的盐酸盐晶型、磷酸盐晶型、甲磺酸盐晶型、三氟甲磺酸盐晶型、苹果酸盐晶型、富马酸盐晶型、琥珀酸盐晶型、酒石酸盐晶型、苯甲酸盐晶型或马来酸盐晶型，优选盐酸盐晶型、马酸盐晶型、琥珀酸盐晶型或苯甲酸盐晶型；
式(I)化合物的溶剂化物晶型选自水合物晶型，甲醇化物晶型、乙醇化物晶型、乙醚化物晶型、丙酮化物晶型，优选水合物晶型；
式(I)化合物的药学上可接受的盐的溶剂化物选自盐酸盐水合物晶型、盐酸盐甲醇化物晶型、盐酸盐乙醚化物晶型、苯甲酸盐水合物晶型、苯甲酸盐甲醇化物晶型、苯甲酸盐乙醚化物晶型、马来酸盐水合物晶型、马来酸盐甲醇化物晶型或马来酸盐乙醚化物晶型，优选盐酸盐水合物晶型，更优选二盐酸盐一水合物晶型；
式(I)化合物的共晶体选自式(I)化合物与脯氨酸、没食子酸、草酸、马来酸、酒石酸、糖精中的一种或多种形成的共晶体，优选与脯氨酸、酒石酸或糖精形成的共晶体。
在一些优选的实施方案中，所述的肿瘤选自胰腺癌、结直肠癌、肺癌、多发性骨髓瘤、黑色素瘤、脑癌、头颈癌、甲状腺癌、口腔癌、食道癌、食管腺癌、胃癌、肝癌、胆管癌、肾癌、腹膜癌、胆囊癌、膀胱癌、前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、表皮癌、非霍奇金淋巴瘤、神经胶质瘤、胶质母细胞瘤中的一种或多种。
在一些优选的实施方案中，所述的肿瘤选自非小细胞肺癌。在一些优选的实施方案中，所述的肿瘤选自肺腺癌、肺鳞癌和大细胞癌、结肠直肠癌、胃癌等。
本发明还提供了式(I)所示化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐或其晶型的药物制剂在制备用于治疗由KRAS和/或其突变体介导的肿瘤的药物中的用途，
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、L和n的定义如前述方案所述。
本发明还提供了式(I)所示化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐或其晶型与一种或多种其他抗肿瘤药物的组合物在制备用于治疗由KRAS和/或其突变体介导的肿瘤的药物中的用途，
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、L和n的定义如前述方案所述。
本发明还提供了式(I)所示化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐或其晶型治疗由KRAS和/或其突变体介导的肿瘤患者的方法，包括向需要此治疗的患者给予治疗有效量的式(I)化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐或其晶型，
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、L和n的定义如前述方案所述。
在本申请的说明书和权利要求书中，化合物都是依据化学结构式而命名的，如果表示同一化合物时化合物的命名与化学结构式不符，以化学结构式或化学反应式为准。
发明详述
本发明所述的KRAS G12位突变是指KRAS上编译甘氨酸的位点12发生的突变，其中“G”为氨基酸缩写，具体为甘氨酸；数字“12”为编译氨基酸的具体位点，G12位突变包括但不限于点突变、插入突变。KRAS其他位点的突变实例定义同KRAS G12位突变。
本发明所述的KRAS G12C突变是指KRAS上位点12发生点突变，其编译的氨基酸由甘氨酸突变为半胱氨酸。字母“G”含义如上所述，字母“C”为半胱氨酸的简写形式。其他KRAS12位突变实例定义同G12C突变。
本发明所述的KRAS G13D突变是指KRAS上位点13编译的氨基酸由甘氨酸突变为天冬氨酸，字母“G”含义如上所述，字母“D”为天冬氨酸的简写形式。其他KRAS 13位突变实例定义同G13D突变。
本发明所述的KRAS Q61H突变是指KRAS上位点61编译的氨基酸由谷氨酰胺突变为组氨酸，字母“Q”和“H”分别为谷氨酰胺和组氨酸的简写形式。其他KRAS 61位突变实例定义同Q61H突变。
在本发明中，“卤代”是指被“卤素”取代，术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘。
在本发明中，术语“C1-6烷基”指含有1-6个碳原子的直链或支链烷基基团，其实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、2-甲基丁基、新戊基、1-乙基丙基、正己基、异己基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、1-甲基-2-甲基丙基等。本发明所述的“C1-4烷基”是指C1-6烷基中的含有1-4个碳原子的具体实例。
在本发明中，术语“C1-6烷氧基”指“C1-6烷基-O-”基团，其中的C1-6烷基如前文所定义；其实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、戊氧基、新戊氧基、己氧基等。本发明所述的“C1-4烷氧基”是指C1-6烷氧基中的含有1-4个碳原子的具体实例。
在本发明中，术语“C3-8环烷基”指含有3-8个例如3、4、5、6、7或8个碳原子的单环饱和碳环基团，优选3-6个或3-5个碳原子，其实例包括但不限于环丙基、环丁基、1-甲基环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基等。
在本发明中，术语“C1-6烷基胺基”指“C1-6烷基-NH-”基团，其中的C1-6烷基如前文所定义；其实例包括但不限于甲胺基、乙胺基、丙胺基、异丙胺基、丁胺基、异丁胺基、叔丁胺基、仲丁胺基、戊胺基、新戊胺基、己胺基等。
在本发明中，术语“二(C1-6烷基)胺基”指“(C1-6烷基)2-N-”基团，其中的两个C1-6烷基可以相同或不同，分别如前文所定义；其实例包括但不限于二甲胺基、二乙胺基、二丙胺基、二丁胺基等。
在本发明中，术语“C1-6烷基羰氧基”、“C1-6烷基酰胺基”、“C1-6烷基磺酰基”、“C1-6烷基磺酰胺基”以及“C1-6烷基亚磺酰基”分别指“C1-6烷基-C(O)O-”、“C1-6烷基-C(O)NH-”、“C1-6烷基-SO2-”、“C1-6烷基-SO2NH-”和“C1-6烷基-SO-”基团，其中的C1-6烷基如前文所定义。
在本发明中，术语“6-10元并环”是指由至少两个环状结构彼此共用两个相邻的原子连接起来形成的含有6-10个碳原子的饱和或不饱和的稠环体系，其中的环碳原子可以被1-3个相同或不同的选自O、S(O)m、N(H)m、NCH3和C(O)的杂原子和/或基团置换，但置换后的环中O和C(O)互不相邻。其实例包括但不限于5,6-二氢咪唑[1.2-a]吡嗪-7(8H)-基、5,6-二氢-1,7-萘啶-7(8H)-基、5H-吡咯[3.4-b]吡啶-6(7H)-基、7,8-二氢吡啶[4.3-d]嘧啶-6(5H)-基、2,3,6,7-四氢-1H-吡唑[4.3-c]吡啶-5(4H)-基、6,7-二氢噻唑[5.4-c]吡啶-5(4H)-基、3-甲基-6,7-二氢-3H-吡唑[4.5-c]吡啶-5(4H)-基，2-甲基六氢环戊并[c]吡咯-5-基等。
在本发明中，术语“7-10元螺环”是指由至少两个环彼此共享一个原子形成的含有7-10个碳原子的饱和或不饱和的稠环体系，其中的环碳原子可以被1-3个相同或不同的选自O、S(O)m、N(H)m、NCH3和C(O)的杂原子和/或基团置换，但置换后的环中O和C(O)互不相邻。其实例包括但不限于6-氮螺[2.5]辛烷-6-基、7-氮螺[3.5]壬烷-7-基、8-氮螺[4.5]癸烷-8-基、1-甲基-1,7-二氮螺[4.4]壬烷-7-基、2-甲基-2,6-二氮螺[3.4]辛烷-6-基、6-氮螺[3.4]辛烷-6-基、2-氧杂-7-氮螺[4.5]癸烷-7-基、2-氧杂-8-氮螺[4.5]癸烷-8-基、2-甲基-2,7-二氮螺[4.5]癸烷等。
在本发明中，术语“7-10元桥环”是指任意两个环共用两不直接相连的原子形成的含有7-10个碳原子的饱和或不饱和的稠环体系，其中的环碳原子可以被1-3个相同或不同的选自O、S(O)m、N(H)m、NCH3和C(O)的杂原子和/或基团置换，但置换后的环中O和C(O)互不相邻。其实例包括但不限于(1S,4S)-2-甲基-2-氮双环[2.2.1]己烷、2-氮双环[2.2.1]庚烷、8-甲基双环[3.2.1]辛烷、3-氧杂-8氮双环[3.2.1]辛烷、2-氮双环[2.2.2]辛烷、7-氮双环[2.2.1]庚烷、3-氮双环[3.2.1]辛烷、3-氮双环[3.3.2]癸烷、7-氧杂双环[2.2.1]庚烷、8-氧杂双环[3.2.1]辛烷等。
在本发明中，术语“不饱和的C5-7环烃基”指含有5～7个例如5、6或7个碳原子的单环不饱和碳环基团，其实例包括但不限于环戊烯基、环己烯基、环己二烯基、环庚烯基、环庚二烯基、环庚三烯基等。
在本发明中，术语“3-8元杂环基”是指由3-8个例如3、4、5、6、7或8个、优选5-8个碳原子和1-4个(优选1-3个，更优选1-2个)选自氮、氧和硫的杂原子构成的环状体系，其实例包括但不限于下列环形成的基团：氮杂环丙烷、2H-氮杂环丙烷、二氮杂环丙烷、3H-二氮杂环丙烯、氮杂环丁烷、1,2-二氮杂环丁烷、氮杂环丁二烯、1,2-二氮杂环丁烯、吡咯、二氢吡咯、吡咯烷、咪唑、4,5-二氢咪唑、咪唑烷、吡唑、4,5-二氢吡唑、吡唑烷、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、四唑、吡啶、2-吡啶酮、4-吡啶酮、哌啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、哌嗪、1,2,3-三嗪、1,2,4-三嗪、1,3,5-三嗪、1,2,4,5-四嗪、氮杂环庚三烯、1,2-二氮杂环庚三烯、1,3-二氮杂环庚三烯、1,4-二氮杂环庚三烯、氮杂环辛四烯、1,4-二氢-1,4-二氮杂环辛三烯、环氧乙烷、二氧杂环丙烷、硫杂环丙烷、氧杂环丁烷、1,2-二氧杂环丁烷、硫杂环丁烷、1,2-二硫杂环丁烯、呋喃、四氢呋喃、噻吩、2,5-二氢噻吩、四氢噻吩、1,3-二氧杂环戊烷、1,3-二氧杂环戊烯-2-酮、1,2-二硫杂环戊烯、1,3-二硫杂环戊烷、2H-吡喃、2H-吡喃-2-酮、3,4-二氢-2H-吡喃、4H-吡喃、四氢吡喃、4H-吡喃-4-酮、1,4-二氧杂环己二烯、1,4-二硫杂环己二烯、1,4-氧硫杂环己二烯、1,4-二氧杂环己烷、1,3-二氧杂环己烷、1,3-氧硫杂环己烷、氧杂环庚三烯、硫杂环庚三烯、1,4-二氧杂环辛三烯、氧氮杂环丙烷、噁唑、4,5-二氢噁唑、异噁唑、4,5-二氢异噁唑、2,3-二氢异噁唑、1,2,3-噁二唑、1,2,5-噁二唑、噻唑、4,5-二氢噻唑、异噻唑、1,2,3-噻二唑、1,2,4-噻二唑、1,3,4-噻二唑、2H-1,2-噁嗪、4H-1,2-噁嗪、6H-1,2-噁嗪、2H-1,3-噁嗪、4H-1,3-噁嗪、5,6-二氢-4H-1,3-噁嗪、6H-1,3-噁嗪、2H-1,4-噁嗪、4H-1,4-噁嗪、2H-1,3-噻嗪、4H-1,3-噻嗪、5,6-二氢-4H-1,3-噻嗪、6H-1,3-噻嗪、2H-1,4-噻嗪、4H-1,4-噻嗪、吗啉等。
本发明所述的“C0-6烷基”是指直链或支链的含有0-6个碳原子的烷基，当该烷基含有0个碳原子时表示该烷基不存在，当该烷基含有1-6个碳原子时，其定义如前文“C1-6烷基”所述。
本发明所述的“卤代C1-6烷基”是指一个或多个卤素原子取代C1-6烷基上的一个或多个氢原子所衍生的基团，所述“卤素”和“C1-6烷基”如前文所定义。
本发明所述的“卤代C1-6烷氧基”是指一个或多个卤素原子取代C1-6烷氧基上的一个或多个氢原子所衍生的基团，所述“卤素”和“C1-6烷氧基”如前文所定义。
本发明所述的式(I)化合物的立体异构体包括所有可能的光学异构体和非对映异构体混合物和纯的或部分纯的化合物。光学异构体是指当本发明化合物含有一个或多个不对称中心，因而可作为外消旋体和外消旋混合物、单一对映异构体、非对映异构体混合物和单一非对映异构体的形式存在。
本发明式(I)化合物含有烯烃双键，除非特别说明，本发明所述的立体异构体包括其顺式异构体和反式异构体。
本发明式(I)化合物可以以互变异构体形式存在，各互变异构体及其混合物都包括在本发明范围内。
本发明所述的式(I)化合物的晶型包括式(I)化合物游离体晶型、式(I)化合物的药学上可接受的盐的晶型、式(I)化合物的溶剂化物晶型、式(I)化合物的药学上可接受的盐的溶剂化物晶型、式(I)化合物的共晶体等。所述“溶剂化物”中的“溶剂”包括水、甲醇、乙醇、异丙醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃、二氯甲烷、N,N’-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜等的一种或多种。
本发明所述的“式(I)化合物的溶剂化物晶型”和“式(I)化合物的药学上可接受的盐的溶剂化物晶型”中式(I)化合物与溶剂的分子比例为任意值，优选10:1-1:10，更优选3:1-1:3，其实例包括但不限于10:1、8:1、7:1、5:1、3:1、2:1、1.5:1、1:1、1:2、1:3、1:5等。
本发明所述的“式(I)化合物的共晶体”包括式(I)化合物与氨基酸、羧酸类化合物、糖类、矿物质、维生素或药物赋形剂等的一种或多种通过非共价键结合形成的共晶体系。
本发明所述的式(I)化合物的药学上可接受的盐包括碱金属盐，如钠盐、钾盐、锂盐等；碱土金属盐，如钙盐、镁盐等；其他金属盐，如铝盐、铁盐、锌盐、铜盐、镍盐、钴盐等；无机碱盐，如铵盐；有机碱盐，如叔辛基胺盐、二苄基胺盐、吗啉盐、葡糖胺盐、苯基甘氨酸烷基酯盐、乙二胺盐、N-甲基葡糖胺盐、胍盐、二乙胺盐、三乙胺盐、二环己基胺盐、N,N’-二苄基乙二胺盐、氯普鲁卡因盐、普鲁卡因盐、二乙醇胺盐、N-苄基-苯乙基胺盐、哌嗪盐、四甲基胺盐、三(羟甲基)氨基甲烷盐等；无机酸盐，例如氢卤酸盐，如氢氟酸盐、盐酸盐、二盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐等，硝酸盐，高氯酸盐，硫酸盐，磷酸盐等；有机酸盐，例如低级烷磺酸盐，如甲磺酸盐、三氟甲磺酸盐、乙磺酸盐等，芳基磺酸盐，如苯磺酸盐、对苯磺酸盐等，羧酸盐，如醋酸盐、苹果酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、草酸盐、马来酸盐、苯甲酸盐等，氨基酸盐，如甘氨酸盐、三甲基甘氨酸盐、精氨酸盐、鸟氨酸盐、谷氨酸盐、天冬氨酸盐等。
本发明所述的“式(I)化合物的药学上可接受的盐”和“式(I)化合物的药学上可接受的盐的溶剂化物晶型”中，式(I)化合物与相应碱金属、其他金属、有机碱、无机酸、有机酸的分子比例可为任意值，优选10:1-1:10，更优选3:1-1:3，其实例包括但不限于10:1、8:1、7:1、5:1、3:1、2:1、1.5:1、1:1、1:2、1:3、1:5等。
本发明所述的“药物制剂”，为药学上可接受的任一剂型，以口服、肠胃外、直肠或经肺给药等方式施用于需要其的患者。用于口服给药时，可制成常规的固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。用于肠胃外给药时，可制成注射剂，包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。制成注射剂时，可采用现有制药领域中的常规方法生产，配制注射剂时，可以不加入附加剂，也可根据药物的性质加入适宜的附加剂。用于直肠给药时，可制成栓剂等。用于经肺给药时，可制成吸入剂或喷雾剂等。
本发明还提供治疗由KRAS和/或其突变介导的肿瘤患者的方法，其包括向需要此治疗的患者给予治疗有效量的式(I)化合物，可以通过本领域中已知的任何常规和可接受的方式给药，治疗有效量根据患者的种族、性别、年龄、体重、医疗条件、疾病的类型、疾病的严重程度、施用途径和相关健康状况以及本领域技术人员已知的其他因素进行调整。
本发明还提供式(I)化合物与一种或多种其他抗肿瘤药物的组合物，可将这些其他药物与式(I)化合物同时或相继给药，用于治疗由KRAS和/或其突变介导的肿瘤患者。
所述的组合物还可包含药学上可接受的任一载体，其中所述的载体包括但不仅限于：填充剂、稀释剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、表面活性剂、防腐剂、着色剂、矫味剂、芳香剂、泡腾剂、乳化剂、絮凝剂、反絮凝剂、抑菌剂、增溶剂。
本发明所述的“其他抗肿瘤药物”，选自抗代谢物、生长因子抑制剂、抗体、有丝分裂抑制剂、抗肿瘤激素类、烷化剂类、金属铂类、拓扑异构酶抑制剂、免疫抑制类。
本发明所述的肿瘤、癌症或癌，还包括原发器官、组织和/或任何其它位置中的转移，不管肿瘤转移的位置。
4、具体实施方式
以下结合实验例对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实验例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
下述缩写所代表的定义如下：
DMSO：二甲基亚砜
1000×其中的“×”：倍
实验例1体外细胞学活性实验
供试品：化合物18-2晶型I，自制，其化学名称、XRPD图谱及制备方法参考国际专利申请WO2017107985A1的制备实施例。
方法
运用CTG试剂盒检测化合物对NCIH460(KrasQ61H)和NCIH358(KrasG12C)细胞增殖的影响。
化合物配制
将393μl DMSO加入装有2.45mg化合物18-2晶型I的EP管中，振荡混匀(10mM)；
1000×化合物储液配制：
用DMSO将化合物从10mM往下3.16倍稀释为：10000μM,3164.5μM,1001.4μM,316.9μM,100.3μM,31.7μM,10μM,3.18μM,1μM.
10×化合物:分别加入2μl 1000×待测化合物到198μl培养基中，振荡混匀。
化合物的加入
用排枪将配好的10×化合物按照化合物排布图加入细胞中(10μl)使其终浓度为10000nM,3164.5nM,1001.4nM,316.9nM,100.3nM,31.7nM,10nM,3.18nM,1nM.
细胞培养方法：使用RPMI1640+10％FBS培养基37℃，5％CO2培养细胞。
细胞铺板
1)收获处于对数生长期的细胞并采用血小板计数器进行细胞计数。用台盼蓝排斥法检测细胞活力，确保细胞活力在90％以上。
2)调整细胞浓度；分别添加90μL细胞悬液至96孔板中，培养液对照孔添加90μL培养基。
3)将96孔板中的细胞置于37℃、5％CO2、95％湿度条件下培养过夜。
药物处理
1)在接种有细胞的96孔板中每孔加入10μL10×化合物溶液，培养液对照孔和细胞对照孔各加入10μL培养基，每个药物浓度设置三个复孔，DMSO终浓度为0.1％。
2)将已加药的96孔板中的细胞置于37℃、5％CO2、95％湿度条件下继续培养72小时，之后进行CTG分析。
数据处理
使用GraphPad Prism 5.0软件分析数据，利用非线性S曲线回归来拟合数据得出剂量-效应曲线，并由此计算IC50值。
细胞存活率(％)＝(Lum待测药-Lum培养液对照)/(Lum细胞对照-Lum培养液对照)×100％.
实验结果
表1本发明化合物对细胞的抑制作用
实验结论
本发明化合物具有良好的肿瘤细胞抑制作用，尤其是针对含有KRAS突变的肿瘤细胞，抑制效果显著。
实验例2食管鳞癌PDX模型E7(Kras G12D)
材料与方法
供试品：化合物18-2晶型I，按照现有技术WO2017107985A1的方法制备。
方法
从人源异种移植食管鳞癌模型E7荷瘤小鼠收取肿瘤组织，切成[2-4mm]直径的瘤块接种于BALB/c裸小鼠右前肩胛处。当平均肿瘤体积达到100mm3时随机分组，小鼠根据肿瘤体积随机分入各个实验组，每组5只，分组日期为实验第1天。给药开始于分组当天，口服灌胃给药，每天给药一次，共连续给药21天。用游标卡尺测量肿瘤体积(TV)。根据相对肿瘤抑制率(TGI)进行疗效评价。
结果
实验结束时溶媒对照组平均肿瘤体积达到1.31cm3，给药组肿瘤体积为0.38cm3。
实验观察指标及计算：
肿瘤体积TV＝0.5a×b2。其中a是肿瘤的长径，b是肿瘤的短径。
相对肿瘤抑制率TGI(％)＝(1-T/C)×100％。T和C分别为治疗组和对照组在某一特定时间点的相对肿瘤体积(RTV)。
T/C％为相对肿瘤增值率，即在某一时间点，治疗组和对照组相对肿瘤体积的百分比值。计算公式如下：T/C％＝TRTV/CRTV×100％(TRTV：治疗组平均RTV；CRTV：溶媒对照组平均RTV；RTV＝Vt/V0，V0为分组时该动物的瘤体积，Vt为治疗后该动物的瘤体积)。
实验结果
表2.本发明化合物在E7人食管癌模型中各组TGI、T/C值
备注:a.平均值±标准误；
d.第22天时肿瘤体积与溶媒对照组相比，P<0.001与溶媒对照组相比。
实验结论
本发明化合物18-2在20mg/kg，每天口服给药一次的给药方案下表现出较好的肿瘤生长抑制作用。在连续给药21天后，平均肿瘤体积达到0.38cm3，TGI值为52.3％，与对照组相比具显著性差异(P<0.001)。
实验例3胃癌PDX模型GA0318(KrasG12D)
材料与方法
供试品：化合物18-2晶型I，按照现有技术WO2017107985A1的方法制备。
对照药：Neratinib，购买或按照现有技术方法制备，其结构式如下所示。
方法
从
实验观察指标及计算方式同实验例2
结果
表3.本发明化合物治疗
注:a.平均值±标准误差。
实验结论
本发明化合物对含有KRAS突变的人源性异体移植模型GA0318具有显著的肿瘤生长抑制作用。
