一种能降低口腔上皮细胞健康风险的电子烟烟液
技术领域
本发明属于电子烟技术领域，具体涉及一种能降低口腔上皮细胞健康风险的电子烟烟液。
背景技术
随着国际烟草控制框架公约的逐步实施和人们健康意识的逐渐增强，传统卷烟销售市场受到强大冲击。为了应对市场的变化和消费者的需求，新型烟草制品受到了国内外各大烟草企业的高度关注和广泛研究。新型烟草制品具有以下一些主要特征：一是不需要燃烧，极大减少因燃烧产生的焦油和有害成分，相比传统卷烟危害性较小；二是不会产生或大幅度减少产生二手烟气，极大减轻对公共环境产生的影响，在一定程度上缓解了吸烟和公共场所禁烟的矛盾；三是能在一定程度上适应和满足消费者的生理需要。随着人们生活方式和消费观念的转变、科学技术的快速进步，烟草消费者的需求和关注点不断变化，同时受到烟草控制政策、社会舆论导向等因素的影响，传统卷烟的发展受到越来越多地制约，新型烟草制品的发展已经成为必然。近些年来特别是在欧美发达国家电子烟表现出强劲的发展趋势，数据表明世界电子烟销售总额近三年来年均增速高达60％。
口腔是人体最早接触食物并开始消化的器官。口腔上皮中，大多数部位并没有角化层（和皮肤相比），也没有粘液形成的粘液层（和胃肠道相比），因此口腔上皮细胞直接暴露于外界环境中，当卷烟烟气中的部分物质对上皮细胞产生死亡时，口腔不适随之发生。电子烟的烟雾成分快速溶解入唾液中，也对口腔上皮造成一定程度的损伤。消费者问卷调查表明，部分电子烟会引起口腔不适，包括造成唇部不适，唾液量增多，口腔有刺激感等，从而影响消费者在使用产品时的口腔感受。
左旋肉碱 (L-carnitine)，又称L-肉碱或音译卡尼丁，是一种促使脂肪转化为能量的类氨基酸，红色肉类是左旋肉碱的主要来源，对人体无毒副作用。不同类型的日常饮食已经含有5-100毫克的左旋肉碱，但一般人每天只能从膳食中摄入50毫克，素食者摄入更少。左旋肉碱的主要生理功能是促进脂肪转化成能量测试结构，服用左旋肉碱能够在减少身体脂肪、降低体重的同时，不减少水分和肌肉。但是左旋肉碱在抵御渗透压应激引起的细胞死亡中尚无应用。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术的不足，提供一种能降低口腔上皮细胞健康风险的电子烟烟液。本发明发现人在长期吸食电子烟时，口腔上皮细胞微环境的改变导致细胞死亡，在电子烟烟液中加入左旋肉碱可以改善因为其引起的细胞死亡，能显著降低吸食电子烟引起的口腔上皮健康风险。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一种能降低口腔上皮细胞健康风险的电子烟烟液，包括丙二醇、丙三醇、保润剂、香精香料和左旋肉碱；
按照重量百分数计，丙二醇、丙三醇的重量百分比为65~95%，保润剂重量百分比为1~20%，香精香料重量百分比为0.1~10%，左旋肉碱的重量百分比为0.1~5%。
进一步，优选的是，所述保润剂为丁二醇、聚乙二醇、三甘醇、三乙酸甘油酯和二乙酸甘油酯中的一种或多种的组合物。
进一步，优选的是，所述香精香料为柠檬、薄荷、咖啡、奶油、草莓、蓝莓、菠萝、桃子、苹果、橘子、西瓜、红枣、乌梅、橄榄味香精香料和烟草提取物香料中的一种或多种的组合物。
进一步，优选的是，所述电子烟烟液中不含有水分，且粘度小于100mPa.s。
本发明同时保护上述左旋肉碱在制备防治由于渗透压导致的口腔上皮细胞死亡的药物、保健品、烟草制品中的应用。
本发明与现有技术相比，其有益效果为：
1、本发明为左旋肉碱直接在电子烟使用中烟雾引起的口腔上皮细胞死亡保护中提供了基础。电子烟液（5%）和口腔上皮细胞孵育12小时导致30%口腔上皮细胞死亡，但是加入了1 mg/ml的左旋肉碱可以将细胞死亡的比例降低至5%以下。
2、本发明发现人在长期吸食电子烟时，口腔上皮细胞会因暴露在电子烟烟气中而部分死亡。在烟液中加入左旋肉碱可以改善因为其引起的细胞死亡，能显著降低吸食电子烟引起的口腔风险。
3、针对左旋肉碱在电子烟中的应用，本发明提供这种电子烟的配方特征，是一种具有防治由于渗透压导致的口腔上皮细胞死亡功效的电子烟。
附图说明
图1为在培养中添加左旋肉碱抑制细胞死亡结果图。**：t检验P<0.01；结果表明：添加左旋肉碱能够降低电子烟烟液引起口腔上皮细胞死亡。
图2为直接在烟液中添加左旋肉碱抑制细胞死亡结果图；结果表明：在电子烟烟液中直接加入左旋肉碱，和不加入左旋肉碱的电子烟相比，其烟液诱导的细胞死亡比例下降。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的详细描述。
本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用材料或设备未注明生产厂商者，均为可以通过购买获得的常规产品。
以下实施例中未有特别说明，百分比均为重量百分比，比例均为质量比。
实施例1
一种能降低口腔上皮细胞健康风险的电子烟烟液，包括丙二醇、丙三醇、保润剂、香精香料和左旋肉碱；
按照重量百分数计，丙二醇、丙三醇的重量百分比为65%，保润剂重量百分比为20%，香精香料重量百分比为10%，左旋肉碱的重量百分比为5%；
所述保润剂为丁二醇。
所述香精香料为柠檬香精。
实施例2
一种能降低口腔上皮细胞健康风险的电子烟烟液，包括丙二醇、丙三醇、保润剂、香精香料和左旋肉碱；
按照重量百分数计，丙二醇、丙三醇的重量百分比为95%，保润剂重量百分比为1%，香精香料重量百分比为0.1%，左旋肉碱的重量百分比为3.9%；
所述保润剂为三甘醇。
所述香精香料为薄荷香精。
所述电子烟烟液中不含有水分，且粘度小于100mPa.s。
实施例3
一种能降低口腔上皮细胞健康风险的电子烟烟液，包括丙二醇、丙三醇、保润剂、香精香料和左旋肉碱；
按照重量百分数计，丙二醇、丙三醇的重量百分比为75%，保润剂重量百分比为17%，香精香料重量百分比为7.9%，左旋肉碱的重量百分比为0.1%；
所述保润剂为三乙酸甘油酯和二乙酸甘油酯中的组合物（质量比为1：1）。
所述香精香料为咖啡香精和奶油香精的组合物（质量比为1：1）。
所述电子烟烟液中不含有水分，且粘度小于100mPa.s。
实施例4
一种能降低口腔上皮细胞健康风险的电子烟烟液，由以下重量百分比的组分组成：丙二醇30%、丙三醇55%、蓝莓香精2%、葡萄香料1%、聚乙二醇6%、薄荷香料1%、烟草提取物香料4%、左旋肉碱1%。
实施例5 口腔上皮细胞死亡检测
（1）细胞培养与传代：永生化的人口腔上皮细胞hTERT-OME购自Abmgood公司，并培养于含有1%胎牛血清（体积分数）（Hyclone产品）的MCDB151培养基（Sigma-Aldrich产品）的25cm2培养瓶中。细胞生长至80%融合状态后，弃培养液，用PBS洗涤一次，加入0.5-1mL0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化液（Sigma-Aldrich产品），37℃消化1-5分钟。细胞变圆后，弃去消化液。加入含10%胎牛血清（体积分数）的MCDB151培养基，吹打重悬细胞，600g离心5分钟，弃上清，细胞重悬于15 ml前述含1%胎牛血清的MCDB151培养基中，按照1:3的比例传代。每2-3天换液一次，半量换液，换液的时候是换成新的前述含有1%胎牛血清的MCDB151培养基。
（2）将处在对数生长期的hTERT-OME接种于96孔板中，每孔细胞数量为8000个，培养基体积为100 μl，采用无血清MCDB151培养基。细胞贴壁培养24小时后，更换细胞培养基为含有20%电子烟烟液（体积分数）的MCDB151，同时在培养基中加入左旋肉碱以检测其是否可以抑制电子烟烟液导致的细胞死亡（1-5mg/ml）。继续培养24小时。
其中，此处采用的电子烟烟液与实施例4的区别在于不含有左旋肉碱。
（3）在细胞培养终点，使用Promega的MTS试剂盒检测存活细胞，在每个细胞培养孔中加入10 μl MTS溶液，37℃孵育2小时。测定490nm各孔的吸光值。在实验中，同时设置空白组（培养基和MTS溶液，无细胞），对照组（不添加烟液，不添加左旋肉碱的正常培养细胞，图1中的0 mg/ml组），每组设置三个复孔。对照组减去空白组的数值设置为100%。
细胞存活率=（OD490[实验组]-OD490[空白组]）/(OD490[对照组]-OD490[空白组])×100%；
（4）在上述（2）中的的烟液处理细胞时添加左旋肉碱后细胞的存活比例如图1所示。
（5）在电子烟烟液（处采用的电子烟烟液与实施例4的区别在于不含有左旋肉碱）中直接加入1%左旋肉碱（实施例4产品），再和未加入左旋肉碱的烟液进行比较，比较它们对口腔上皮细胞的毒性。结果如图2所示，其中，对照组为不添加烟液，不添加左旋肉碱的正常培养细胞。
结论：添加了左旋肉碱的电子烟能明显降低口腔风险，降低口腔上皮细胞死亡比例。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
