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一种火棘果提取物的用途以及制备方法

2022-12-13 21:30:54

一种火棘果提取物的用途以及制备方法

  技术领域

  本发明属于保健食品领域,具体涉及一种火棘果提取物的用途以及制备方法。

  背景技术

  随着经济的高速发展,现代人群生活节奏快、饮食不规律并高脂高糖、过度劳累、缺乏运动,引发了一系列亚健康状态,通常伴随胃肠功能紊乱,出现食欲不振、消化不良、排便异常等现象,严重影响生活的同时极大的增加了疾病的发生率,长期积累则可能导致肠炎、肠癌等严重后果。因此,缓解功能失调和改善胃肠功能对于维持机体健康具有重要意义。

  在胃肠功能的调节中,激素发挥着重要的功能。而胃肠激素可通过调节神经递质的传递和释放发挥生理功效,例如胃泌素(GAS)可刺激胃酸、蛋白酶等物质的分泌,促进胃肠粘膜生长;胃动素(MTL)可促进消化系统运动,加速胃排空。此外,小肠推进率和排便行为直观反映了肠功能。当小肠推进率升高、单位时间内排便数增多,则是提示机体消化道运动亢进,排空功能异常。

  目前,对于火棘果产品开发研究较少,火棘果资源利用主要集中在色素的提取上,鲜有研究将火棘果制备成提取物进而开发为具有生理功能的产品。现有提取工艺较为简单,所含的主要功效成分含量不明确,质量不稳定。因此,优化火棘果的提取方法并将其用于制备功能性产品具有一定的前景

  鉴于现代人群中上述胃肠功能失调等现象普遍,且相比于治疗疾病的药物,调节亚健康状态将是一个长期过程,亟需研究开发一种火棘果中各成分提取率高、生产成本低、产品质量高、适合大规模生产的火棘果提取物的制备方法,从而能够获得具有改善胃肠功能药物组合物、食品或保健品。

  发明内容

  鉴于上述问题,本发明提供一种火棘果提取物的用途以及制备方法。本发明所制备得到的火棘果提取物能够显著改善胃肠功能,可作为改善胃肠功能食品的原料;还可用于促进胃泌素和/或胃动素的分泌以促进胃酸分泌、增强胃动力、缓解小肠蠕动异常、提高摄食量;本发明所述提取方法易于操作,方法简单,无毒副作用,所制备得到的火棘果提取物易于标准化检测控制,所含的主要功效成分含量明确,质量稳定,具有一定的产业化开发价值。

  用于实现上述目的的技术方案如下:

  本发明提供一种火棘果提取物在制备用于改善胃肠功能的药物组合物或功能性产品中的用途;

  其中,按质量百分比计,所述火棘果提取物包含:总黄酮1.0~1.8%和总多酚化合物3.1~5.5%。

  在一些实施方案中,本发明所述的用途中,按质量百分比计,所述火棘果提取物还包含:芦丁0.9~1.6%、绿原酸0.05~0.2%、金丝桃苷0.1~0.3%。

  在一些实施方案中,本发明所述的用途中,所述功能性产品为食品和/或保健品。

  在一些实施方案中,本发明所述的用途中,所述改善胃肠功能包括但不限于:改善胃泌素和/或胃动素的分泌、促进胃酸分泌、增强胃动力、缓解小肠蠕动异常、提高摄食量。

  在一些实施方案中,本发明所述的用途中,所述小肠蠕动异常包括但不限于:小肠蠕动过快和/或排便次数过多。

  在一些实施方案中,本发明所述的用途中,所述改善胃肠功能包括但不限于:改善胃肠功能虚弱对象的胃肠功能;其中,所述胃肠功能虚弱是由饮食不规律导致的;

  在一些实施方案中,本发明所述的用途中,所述对象包括:人和/或非人哺乳动物。

  在一些实施方案中,本发明所述的用途中,所述火棘果提取物的制备方法包括以下步骤:

  将无籽火棘果与提取溶剂混合,静置,得到无籽火棘果溶液;

  将所述无籽火棘果溶液进行回流提取,过滤,取上清液,得到火棘果提取液;

  将所述火棘果提取液浓缩,得到火棘果提取浓缩液;

  将所述火棘果提取浓缩液进行萃取除杂,得到萃取液;

  将所述萃取液进行真空浓缩,得到浸膏,即得到所述火棘果提取物;

  其中,所述提取溶剂的配制步骤为:取质量分数为60~80%的乙醇水溶液,调节所述乙醇水溶液的pH值为2.5~4,得到所述提取溶剂;

  所述真空浓缩的步骤为:

  (1)将所述萃取液在温度为45~55℃、真空度为0.08~0.1MPa下真空浓缩;

  (2)将经步骤(1)浓缩后的物料在梯度升温、真空度为0.08~0.1MPa下真空浓缩;所述梯度升温为以升温速率0.5~1℃/min从15℃升温至50℃。

  本发明还提供一种火棘果提取物的制备方法,所述方法包括以下步骤:

  将无籽火棘果与提取溶剂混合,静置,得到无籽火棘果溶液;

  将所述无籽火棘果溶液进行回流提取,过滤,取上清液,得到火棘果提取液;

  将所述火棘果提取液浓缩,得到火棘果提取浓缩液;

  将所述火棘果提取浓缩液进行萃取除杂,得到萃取液;

  将所述萃取液进行真空浓缩,得到浸膏,即得到所述火棘果提取物;

  其中,所述提取溶剂的配制步骤为:取质量分数为60~80%的乙醇水溶液,调节所述乙醇水溶液的pH值为2.5~4,得到所述提取溶剂;

  所述真空浓缩的步骤为:

  (1)将所述萃取液在温度为45~55℃、真空度为0.08~0.1MPa下真空浓缩;

  (2)将经步骤(1)浓缩后的物料在梯度升温、真空度为0.08~0.1MPa下真空浓缩;所述梯度升温为以升温速率0.5~1℃/min从15℃升温至50℃。

  在一些实施方案中,本发明所述火棘果提取物的制备方法中,按质量百分比计,所述火棘果提取物包含:总黄酮1.0~1.8%和总多酚化合物3.1~5.5%;

  在一些优选实施方案中,本发明所述火棘果提取物的制备方法中,按质量百分比计,所述火棘果提取物还包含:芦丁0.9~1.6%、绿原酸0.05~0.2%、金丝桃苷0.1~0.3%。

  本发明又提供本发明所述的制备方法制备得到的火棘果提取物。

  在一些实施方案中,本发明所述火棘果提取物的制备方法包括以下步骤:

  将所述无籽火棘果与所述提取溶剂以料液比1:(4~6)混合,静置,得到所述无籽火棘果溶液;

  将所述无籽火棘果溶液在温度为45~65℃下第一次回流提取3~5h,过滤,取第一次上清液和第一次提取滤渣;将所述第一次提取滤渣与所述提取溶剂以料液比1:(3~5)混合,在温度为45~65℃下第二次回流提取2~4h,过滤,取所述第二次上清液和所述第二次提取滤渣;将所述第二次提取滤渣与所述提取溶剂以料液比1:(1~3)混合,在温度为45~65℃下第三次回流提取1~3h,过滤,取所述第三次上清液;合并所述第一次上清液、所述第二次上清液和所述第三次上清液,得到所述火棘果提取液;

  将所述火棘果提取液浓缩,得到所述火棘果提取浓缩液;

  将所述火棘果提取浓缩液采用石油醚进行萃取除杂,得到所述萃取液;

  将所述萃取液进行真空浓缩,得到所述浸膏,即得到所述火棘果提取物。

  在一些优选实施方案中,本发明的火棘果提取物的制备方法包括以下步骤:

  将所述无籽火棘果与所述提取溶剂以料液比1:5混合,静置,得到所述无籽火棘果溶液;

  将所述无籽火棘果溶液在温度为50℃下第一次回流提取4h,过滤,取所述第一次上清液和所述第一次提取滤渣;将所述第一次提取滤渣与所述提取溶剂以料液比1:4混合,在温度为50℃下第二次回流提取3h,过滤,取所述第二次上清液和所述第二次提取滤渣;将所述第二次提取滤渣与所述提取溶剂以料液比1:2混合,在温度为50℃下第三次回流提取2h,过滤,取所述第三次上清液;合并所述第一次上清液、所述第二次上清液和所述第三次上清液,得到所述火棘果提取液;

  将所述火棘果提取液浓缩,得到所述火棘果提取浓缩液;

  将所述火棘果提取浓缩液采用石油醚进行萃取除杂,弃去石油醚层,得到所述萃取液;

  将所述萃取液进行真空浓缩,得到所述浸膏,即得到所述火棘果提取物。

  在一些实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,在所述提取溶剂的配制步骤中,使用一水柠檬酸、苹果酸、乳酸、冰醋酸中的一种或两种以上来调节所述乙醇水溶液的pH值。

  在一些实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,所述无籽火棘果的制备过程为:取火棘果鲜果,晾干,取无籽果皮肉,得到所述无籽火棘果;

  在一些实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,所述无籽火棘果的制备过程为:取火棘果鲜果,清洗,晾干,后将所述火棘果鲜果挤压破碎并避免果籽受损,除去该果籽,取无籽果皮肉,得到所述无籽火棘果;

  在一些优选实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,所述静置时间为4~10h,优选8h;

  在一些优选实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,所述过滤采用150~350目纱布进行过滤。

  在一些实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,所述真空浓缩的步骤为:

  (1)将所述萃取液在温度为45~55℃、真空度为0.08~0.1MPa下真空浓缩;

  (2)将经步骤(1)浓缩后的物料在梯度升温、真空度为0.08~0.1MPa下真空浓缩;其中,所述梯度升温为从15℃升温至50℃;

  在一些优选实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,所述升温速率为0.5~1℃/min;

  在一些优选实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,所述浸膏的固含量(固体物质占总量的质量分数)为65-80%。

  在一些实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,根据HPLC-MS检测,以几种单体化合物的图谱信息为参照,以分光光度法测定,所述制备方法得到的火棘果提取物包含总黄酮和总多酚化合物;

  在一些实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,按质量百分比计,所述火棘果提取物包含:总黄酮1.0~1.8%和总多酚化合物3.1~5.5%。

  在一些实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,所述火棘果提取物还包含:芦丁0.9~1.6%、绿原酸0.05~0.2%、金丝桃苷0.1~0.3%。

  本发明还提供一种根据本发明所述的火棘果提取物的制备方法制备的火棘果提取物。

  本发明所述制备方法得到的火棘果提取物能够显著改善胃肠功能,可作为改善胃肠功能食品的原料;该提取物还可用于促进胃泌素和/或胃动素的分泌以促进胃酸分泌、增强胃动力、缓解小肠蠕动异常、提高摄食量。

  附图说明

  为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案,下面将对实施例描述中所需要使用的附图作一简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其它的附图。

  图1示出了本发明所述火棘果提取物对大鼠的尿液量的影响。

  具体实施方式

  下文将结合具体实施方式和实施例,具体阐述本发明,本发明的优点和各种效果将由此更加清楚地呈现。本领域技术人员应理解,这些具体实施方式和实施例是用于说明本发明,而非限制本发明。

  在整个说明书中,除非另有特别说明,本文使用的术语应理解为如本领域中通常所使用的含义。因此,除非另有定义,本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员的一般理解相同的含义。若存在矛盾,本说明书优先。

  除非另有特别说明,本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等,均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。

  本发明实施例提供的技术方案为解决上述技术问题,总体思路如下:

  本发明提供一种火棘果提取物在制备用于改善胃肠功能的药物组合物或功能性产品中的用途;

  其中,按质量百分比计,所述火棘果提取物包含:总黄酮1.0~1.8%和总多酚化合物3.1~5.5%。

  在一些实施方案中,本发明所述的用途中,按质量百分比计,所述火棘果提取物还包含:芦丁0.9~1.6%、绿原酸0.05~0.2%、金丝桃苷0.1~0.3%。

  在一些实施方案中,本发明所述的用途中,所述功能性产品为食品和/或保健品。

  在一些实施方案中,本发明所述的用途中所述改善胃肠功能包括但不限于:改善胃泌素和/或胃动素的分泌、促进胃酸分泌、增强胃动力、缓解小肠蠕动异常、提高摄食量。

  在一些实施方案中,本发明所述的用途中所述小肠蠕动异常包括:小肠蠕动过快和/或排便次数过多。

  在一些实施方案中,本发明所述的用途中,所述改善胃肠功能包括但不限于改善胃肠功能虚弱对象的胃肠功能;其中,所述胃肠功能虚弱是由饮食不规律导致的;

  优选地,所述对象包括:人和/或非人哺乳动物。

  在一些实施方案中,本发明所述的用途中,所述火棘果提取物的制备方法包括以下步骤:

  将无籽火棘果与提取溶剂混合,静置,得到无籽火棘果溶液;

  将所述无籽火棘果溶液进行回流提取,过滤,取上清液,得到火棘果提取液;

  将所述火棘果提取液浓缩,得到火棘果提取浓缩液;

  将所述火棘果提取浓缩液进行萃取除杂,得到萃取液;

  将所述萃取液进行真空浓缩,得到浸膏,即得到所述火棘果提取物;

  其中,所述提取溶剂的配制步骤为:取质量分数为60~80%的乙醇水溶液,调节所述乙醇水溶液的pH值为2.5~4,得到所述提取溶剂;

  所述真空浓缩的步骤为:

  (1)将所述萃取液在温度为45~55℃、真空度为0.08~0.1MPa下真空浓缩;

  (2)将经步骤(1)浓缩后的物料在梯度升温、真空度为0.08~0.1MPa下真空浓缩;所述梯度升温为以升温速率0.5~1℃/min从15℃升温至50℃。

  本发明人通过大量试验,选择本发明所述提取溶剂来提取火棘果中的有效成分,进而提高活性成分的分配系数,增大活性成分在溶剂中的溶解度,节省溶剂用量,提高提取效能,同时增强其稳定性,从而更好地控制火棘果提取物中的总黄酮和总多酚化合物,提高了火棘果的开发利用效率。

  本发明还提供一种火棘果提取物的制备方法,所述方法包括以下步骤:

  将无籽火棘果与提取溶剂混合,静置,得到无籽火棘果溶液;

  将所述无籽火棘果溶液进行回流提取,过滤,取上清液,得到火棘果提取液;

  将所述火棘果提取液浓缩,得到火棘果提取浓缩液;

  将所述火棘果提取浓缩液进行萃取除杂,得到萃取液;

  将所述萃取液进行真空浓缩,得到浸膏,即得到所述火棘果提取物;

  其中,所述提取溶剂的配制步骤为:取质量分数为60~80%的乙醇水溶液,调节所述乙醇水溶液的pH值为2.5~4,得到所述提取溶剂;

  所述真空浓缩的步骤为:

  (1)将所述萃取液在温度为45~55℃、真空度为0.08~0.1MPa下真空浓缩;

  (2)将经步骤(1)浓缩后的物料在梯度升温、真空度为0.08~0.1MPa下真空浓缩;所述梯度升温为以升温速率0.5~1℃/min从15℃升温至50℃。

  在一些实施方案中,本发明所述的制备方法中,按质量百分比计,所述火棘果提取物包含:总黄酮1.0~1.8%和总多酚化合物3.1~5.5%;

  在一些优选实施方案中,本发明所述的制备方法中,按质量百分比计,所述火棘果提取物还包含:芦丁0.9~1.6%、绿原酸0.05~0.2%、金丝桃苷0.1~0.3%。

  本发明又提供本发明所述的制备方法制备得到的火棘果提取物。

  在一些实施方案中,本发明所述的制备方法包括以下步骤:

  将所述无籽火棘果与所述提取溶剂以料液比1:(4~6)混合,静置,得到所述无籽火棘果溶液;将所述无籽火棘果溶液在温度为45~65℃下第一次回流提取3~5h,过滤,取第一次上清液和第一次提取滤渣;将所述第一次提取滤渣与所述提取溶剂以料液比1:(3~5)混合,在温度为45~65℃下第二次回流提取2~4h,过滤,取所述第二次上清液和所述第二次提取滤渣;将所述第二次提取滤渣与所述提取溶剂以料液比1:(1~3)混合,在温度为45~65℃下第三次回流提取1~3h,过滤,取所述第三次上清液;合并所述第一次上清液、所述第二次上清液和所述第三次上清液,得到所述火棘果提取液;将所述火棘果提取液浓缩,得到所述火棘果提取浓缩液;将所述火棘果提取浓缩液采用石油醚进行萃取除杂,得到所述萃取液;将所述萃取液进行真空浓缩,得到所述浸膏,即得到所述火棘果提取物。

  本发明人通过大量试验,优化选择了上述提取工艺,通过升高温度使得火棘果的组织软化、膨胀,从而促进可溶性有效成分的浸出,同时防止温度过高而导致有效成分的活性损失以及无效成分的浸出。上述提取次数的限定可提高活性成分的提取率,考虑到浸出后剩余成分在物料中的溶剂量,第一次提取所使用的溶剂用量较大,从而最大程度的在保证提取率的同时节省溶剂用量,从而实现提取效率的最大化。

  在一些优选实施方案中,本发明的火棘果提取物的制备方法包括以下步骤:将所述无籽火棘果与所述提取溶剂以料液比1:5混合,静置,得到所述无籽火棘果溶液;将所述无籽火棘果溶液在温度为50℃下第一次回流提取4h,过滤,取所述第一次上清液和所述第一次提取滤渣;将所述第一次提取滤渣与所述提取溶剂以料液比1:4混合,在温度为50℃下第二次回流提取3h,过滤,取所述第二次上清液和所述第二次提取滤渣;将所述第二次提取滤渣与所述提取溶剂以料液比1:2混合,在温度为50℃下第三次回流提取2h,过滤,取所述第三次上清液;合并所述第一次上清液、所述第二次上清液和所述第三次上清液,得到所述火棘果提取液;将所述火棘果提取液浓缩,得到所述火棘果提取浓缩液;将所述火棘果提取浓缩液采用石油醚进行萃取除杂,弃去石油醚层,得到所述萃取液;将所述萃取液进行真空浓缩,得到所述浸膏,即得到所述火棘果提取物。

  本发明人通过进一步优化技术方案,能够最大程度地改善火棘果提取物被制备为药物组合物等药物后的外观与口感。

  在一些实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,在所述提取溶剂的配制步骤中,使用一水柠檬酸、苹果酸、乳酸、冰醋酸中的一种或两种以上,调节所述乙醇水溶液的pH值。

  在一些实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,所述无籽火棘果的制备过程为:取火棘果鲜果,晾干,取无籽果皮肉,得到所述无籽火棘果;

  在一些实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,所述无籽火棘果的制备过程为:取火棘果鲜果,清洗,晾干,后将所述火棘果鲜果挤压破碎并避免果籽受损,除去该果籽,取无籽果皮肉,得到所述无籽火棘果;

  在一些优选实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,所述静置时间为4~10h,优选8h;

  本发明人通过限定所述火棘果提取物的制备方法中的静置时间,能够使火棘果充分接触提取溶剂,溶剂充分浸润果肉颗粒表面,增加溶剂扩散、渗透到火棘果肉内部微孔或细胞,使得活性成分溶解进入提取溶剂中,从而达到提取平衡,同时防止过长时间导致杂质大量溶出。

  在一些优选实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,所述过滤采用150~350目纱布进行过滤。

  在一些实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,所述真空浓缩的步骤为:(1)将所述萃取液在温度为45~55℃、真空度为0.08~0.1MPa下真空浓缩;(2)将经步骤(1)浓缩后的物料在梯度升温、真空度为0.08~0.1MPa下真空浓缩;其中,所述梯度升温为从15℃升温至50℃;

  在一些优选实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,所述升温速率为0.5~1℃/min;

  本发明人通过限定所述火棘果提取物的制备方法中的真空浓缩的步骤,能够减少提取物在真空浓缩的过程中因温度过高导致的爆沸,从而保持提取物制备过程的稳定性。

  在一些优选实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,所述浸膏的固含量(固体物质占总量的质量分数)为65-80%。

  在一些实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,根据HPLC-MS检测,以几种单体化合物的图谱信息为参照,以分光光度法测定,所述制备方法得到的火棘果提取物包含总黄酮和总多酚化合物;

  在一些实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,按质量百分比计,所述火棘果提取物包含:总黄酮1.0~1.8%和总多酚化合物3.1~5.5%。

  在一些实施方案中,本发明所述的火棘果提取物的制备方法中,所述火棘果提取物还包含:芦丁0.9~1.6%、绿原酸0.05~0.2%、金丝桃苷0.1~0.3%。

  下面将结合实施例、对比例及实验数据对本申请所述的火棘果提取物的制备方法进行详细说明。

  实施例1:制备本发明所述火棘果提取物

  (1)取火棘果鲜果,清洗,晾干,后将所述火棘果鲜果挤压破碎并避免果籽受损,除去该果籽,取无籽果皮肉,得到所述无籽火棘果;

  (2)取质量分数为60%的乙醇水溶液,使用苹果酸调节所述乙醇水溶液的pH值为2.5,得到所述提取溶剂;

  (3)将所述无籽火棘果与所述提取溶剂以料液比1:4混合,静置4h,得到所述无籽火棘果溶液;将所述无籽火棘果溶液在温度为45℃下第一次回流提取3h,用150目纱布进行过滤,取所述第一次上清液和所述第一次提取滤渣;将所述第一次提取滤渣与所述提取溶剂以料液比1:3混合,在温度为45℃下第二次回流提取2h,用150目纱布进行过滤,取所述第二次上清液和所述第二次提取滤渣;将所述第二次提取滤渣与所述提取溶剂以料液比1:1混合,在温度为45℃下第三次回流提取1h,用150目纱布进行过滤,取所述第三次上清液;合并所述第一次上清液、所述第二次上清液和所述第三次上清液,得到所述火棘果提取液;将所述火棘果提取液浓缩,得到所述火棘果提取浓缩液;

  (4)将所述火棘果提取浓缩液采用石油醚进行萃取除杂,弃去石油醚层,得到所述萃取液;将所述萃取液进行真空浓缩,得到所述浸膏(固含量为65%),即得到所述火棘果提取物;

  其中所述真空浓缩包括以下步骤:(1)将所述萃取液在温度为45℃、真空度为0.08MPa下真空浓缩;(2)将经步骤(1)浓缩后的物料在从15℃升温至50℃(升温速率为0.5℃/min)、真空度为0.08MPa下真空浓缩。

  实施例2:制备本发明所述火棘果提取物

  (1)取火棘果鲜果,清洗,晾干,后将所述火棘果鲜果挤压破碎并避免果籽受损,除去该果籽,取无籽果皮肉,得到所述无籽火棘果;

  (2)取质量分数为80%的乙醇水溶液,使用一水柠檬酸调节所述乙醇水溶液的pH值为4,得到所述提取溶剂;

  (3)将所述无籽火棘果与所述提取溶剂以料液比1:6混合,静置10h,得到所述无籽火棘果溶液;将所述无籽火棘果溶液在温度为65℃下第一次回流提取5h,用350目纱布进行过滤,取所述第一次上清液和所述第一次提取滤渣;将所述第一次提取滤渣与所述提取溶剂以料液比1:5混合,在温度为65℃下第二次回流提取4h,用350目纱布进行过滤,取所述第二次上清液和所述第二次提取滤渣;将所述第二次提取滤渣与所述提取溶剂以料液比1:3混合,在温度为65℃下第三次回流提取3h,用350目纱布进行过滤,取所述第三次上清液;合并所述第一次上清液、所述第二次上清液和所述第三次上清液,得到所述火棘果提取液;将所述火棘果提取液浓缩,得到所述火棘果提取浓缩液;

  (4)将所述火棘果提取浓缩液采用石油醚进行萃取除杂,弃去石油醚层,得到所述萃取液;将所述萃取液进行真空浓缩,得到所述浸膏(固含量为80%),即得到所述火棘果提取物;

  其中所述真空浓缩包括以下步骤:(1)将所述萃取液在温度为55℃、真空度为0.1MPa下真空浓缩;(2)将经步骤(1)浓缩后的物料在从15℃升温至50℃(升温速率为1℃/min)、真空度为0.1MPa下真空浓缩。

  实施例3:制备本发明所述火棘果提取物

  (1)取火棘果鲜果,清洗,晾干,后将所述火棘果鲜果挤压破碎并避免果籽受损,除去该果籽,取无籽果皮肉,得到所述无籽火棘果;

  (2)取质量分数为70%的乙醇水溶液,使用乳酸和冰醋酸调节所述乙醇水溶液的pH值为3,得到所述提取溶剂;

  (3)将所述无籽火棘果与所述提取溶剂以料液比1:5混合,静置8h,得到所述无籽火棘果溶液;将所述无籽火棘果溶液在温度为50℃下第一次回流提取4h,用250目纱布进行过滤,取所述第一次上清液和所述第一次提取滤渣;将所述第一次提取滤渣与所述提取溶剂以料液比1:4混合,在温度为50℃下第二次回流提取3h,用250目纱布进行过滤,取所述第二次上清液和所述第二次提取滤渣;将所述第二次提取滤渣与所述提取溶剂以料液比1:2混合,在温度为50℃下第三次回流提取2h,用250目纱布进行过滤,取所述第三次上清液;合并所述第一次上清液、所述第二次上清液和所述第三次上清液,得到所述火棘果提取液;将所述火棘果提取液浓缩,得到所述火棘果提取浓缩液;

  (4)将所述火棘果提取浓缩液采用石油醚进行萃取除杂,弃去石油醚层,得到所述萃取液;将所述萃取液进行真空浓缩,得到所述浸膏(固含量为70%),即得到所述火棘果提取物;

  其中所述真空浓缩包括以下步骤:(1)将所述萃取液在温度为55℃、真空度为0.08MPa下真空浓缩;(2)将经步骤(1)浓缩后的物料在从15℃升温至50℃(升温速率为0.5℃/min)、真空度为0.1MPa下真空浓缩。

  对比例1:制备火棘果提取物

  取火棘果鲜果,清洗,晾干,后将所述火棘果鲜果挤压破碎并避免果籽受损,除去该果籽,取无籽果皮肉,得到所述无籽火棘果;

  取质量分数为50%的乙醇水溶液,使用冰醋酸调节所述乙醇水溶液的pH值为3,得到所述提取溶剂;

  将所述无籽火棘果与所述提取溶剂以料液比1:3混合,静置3h,得到所述无籽火棘果溶液;将所述无籽火棘果溶液在温度为40℃下回流提取4h,用250目纱布进行过滤,取所述上清液和所述提取滤渣;将所述火棘果上清液浓缩,得到所述火棘果提取浓缩液;

  将所述火棘果提取浓缩液采用石油醚进行萃取除杂,弃去石油醚层,得到所述萃取液;将所述萃取液进行真空浓缩,得到所述浸膏(固含量为70%),即得到所述火棘果提取物;

  其中所述真空浓缩包括以下步骤:(1)将所述萃取液在温度为40℃、真空度为0.08MPa下真空浓缩;(2)将经步骤(1)浓缩后的物料在从15℃升温至40℃(升温速率为0.5℃/min)、真空度为0.1MPa下真空浓缩。

  对比例2:制备火棘果提取物

  取火棘果鲜果,清洗,晾干,后将所述火棘果鲜果挤压破碎并避免果籽受损,除去该果籽,取无籽果皮肉,得到所述无籽火棘果;

  取质量分数为90%的乙醇水溶液,使用柠檬酸调节所述乙醇水溶液的pH值为3,得到所述提取溶剂;

  将所述无籽火棘果与所述提取溶剂以料液比1:6混合,静置10h,得到所述无籽火棘果溶液;将所述无籽火棘果溶液在温度为60℃下回流提取5h,用250目纱布进行过滤,取所述上清液和所述提取滤渣;将所述火棘果提取液浓缩,得到所述火棘果提取浓缩液;

  将所述火棘果提取浓缩液采用石油醚进行萃取除杂,弃去石油醚层,得到所述萃取液;将所述萃取液进行真空浓缩,得到所述浸膏(固含量为70%),即得到所述火棘果提取物;

  其中所述真空浓缩包括以下步骤:(1)将所述萃取液在温度为40℃、真空度为0.08MPa下真空浓缩;(2)将经步骤(1)浓缩后的物料在从15℃升温至40℃(升温速率为0.5℃/min)、真空度为0.1MPa下真空浓缩。

  实施例4:本发明所述火棘果提取物的特征检测

  称取适量实施例1所制备的火棘果提取物,以分光光度法测定各特征物质含量。具体的,采用NaNO2-AlCl3法、以芦丁为标准对照品,测定该火棘果提取物中总黄酮含量为1.0%;采用Folin-Ciocalteu法、以没食子酸为标准对照品,测定该火棘果提取物中总多酚含量为3.1%;

  称取适量实施例1所制备的火棘果提取物,采用HPLC-MS检测、Agilent HPLC系统、DAD检测器、串联ESI源质谱仪,使用Agilent ZORBOX SB-苯基柱(5μm,250mm×4.6mm)进行色谱分离。液相条件为:流速1.0ml/min,进样量20μl,柱温40℃。流动相梯度:A相为5%甲酸水,B相为乙腈,0-10min,5-40%B;10-50min,40-95%B;50-60min,95-5%B。质谱条件为:正负离子模式,离子喷雾电压为5500V,喷射温度为365℃,以几种单体化合物的图谱信息为参照,可知该提取物中典型的单体化合物包含芦丁、绿原酸、金丝桃苷,含量分别为0.9%、0.05%、0.1%。

  称取适量实施例2所制备的火棘果提取物,以分光光度法测定各特征物质含量。具体的,采用NaNO2-AlCl3法、以芦丁为标准对照品,测定该火棘果提取物中总黄酮含量为1.6%;采用Folin-Ciocalteu法、以没食子酸为标准对照品,测定该火棘果提取物中总多酚含量为4.9%;

  称取适量实施例2所制备的火棘果提取物,采用HPLC-MS检测、Agilent HPLC系统、DAD检测器、串联ESI源质谱仪,使用Agilent ZORBOX SB-苯基柱(5μm,250mm×4.6mm)进行色谱分离。液相条件为:流速1.0ml/min,进样量20μl,柱温40℃。流动相梯度:A相为5%甲酸水,B相为乙腈,0-10min,5-40%B;10-50min,40-95%B;50-60min,95-5%B。质谱条件为:正负离子模式,离子喷雾电压为5500V,喷射温度为365℃,以几种单体化合物的图谱信息为参照,可知该提取物中典型的单体化合物包含芦丁、绿原酸、金丝桃苷,含量分别为1.0%、0.1%、0.2%。

  称取适量实施例3所制备的火棘果提取物,以分光光度法测定各特征物质含量。具体的,采用NaNO2-AlCl3法、以芦丁为标准对照品,测定该火棘果提取物中总黄酮含量为1.8%;采用Folin-Ciocalteu法、以没食子酸为标准对照品,测定该火棘果提取物中总多酚含量为5.5%;

  称取适量实施例3所制备的火棘果提取物,采用HPLC-MS检测、Agilent HPLC系统、DAD检测器、串联ESI源质谱仪,使用Agilent ZORBOX SB-苯基柱(5μm,250mm×4.6mm)进行色谱分离。液相条件为:流速1.0ml/min,进样量20μl,柱温40℃。流动相梯度:A相为5%甲酸水,B相为乙腈,0-10min,5-40%B;10-50min,40-95%B;50-60min,95-5%B。质谱条件为:正负离子模式,离子喷雾电压为5500V,喷射温度为365℃,以几种单体化合物的图谱信息为参照,可知该提取物中典型的单体化合物包含芦丁、绿原酸、金丝桃苷,含量分别为1.6%、0.2%、0.3%。

  对比例1中火棘果提取物中总黄酮、总多酚含量分别为1.1%、1.8%;典型的单体化合物芦丁、绿原酸、金丝桃苷含量分别为0.9%、0.09%、0.1%。对比例2中火棘果提取物中总黄酮、总多酚含量分别为2.0%、2.9%;典型的单体化合物芦丁、绿原酸、金丝桃苷含量分别为1.7%、0.1%、0.07%。

  实施例5:本发明所述火棘果提取物在改善胃肠功能中的应用

  选取体重为100±20g的雄性SD大鼠为试验对象,饲养于SPF级动物房,室温为25±3℃,相对湿度为60%-70%,进行12h光照、12h黑暗环境。采取饮食失节加过度劳累法建立大鼠脾虚模型。适应性饲养1周后,将该大鼠随机分为4组:1)正常对照组,大鼠自由饮食;2)脾虚模型组SDG,脾虚处理4周,单日禁食不禁水,隔日自由饮食,灌胃猪油并进行游泳耐力实验;3)本发明所述火棘果提取物(PFE)给药组,脾虚处理2周后,在造模处理基础上每天灌胃PFE(600mg/kg);4)对比例1组,脾虚处理2周后,在造模处理基础上每天灌胃对比例1中提取物(600mg/kg);5)对比例2组,脾虚处理2周后,在造模处理基础上每天灌胃对比例2中提取物(600mg/kg)。正常对照组灌胃蒸馏水。

  4周后,取大鼠血清,采用ELISA试剂盒检测大鼠血清胃泌素(GAS)和胃动素(MTL)水平。

  采用SPSS 16.0软件进行数据分析,结果以x±s表示,组间比较采用单因素方差分析及最小显著差异法,P<0.05为差异有统计学意义;结果见表1;表1:本发明所述火棘果提取物对大鼠胃泌素(GAS)和胃动素(MTL)分泌的影响

  

  注:a表示与模型组比较有显著差异;b表示与正常对照组比较有显著差异。

  由表1所示结果可知,脾虚模型组大鼠的胃泌素和胃动素水平明显降低,说明大鼠肠胃受损,功能减弱,出现肠胃功能障碍症状。当该脾虚模型组大鼠摄入本发明所述火棘果提取物后,大鼠胃泌素和胃动素水平均显著上升,且效果优于同剂量下火棘果粉的作用,说明本发明所述火棘果提取物能够提高老龄大鼠胃泌素、胃动素分泌,一定程度促进胃酸分泌、提升胃动力,改善大鼠体内肠胃功能。

  实施例6:本发明所述火棘果提取物在缓解小肠运动异常中的应用

  采用大鼠为实验动物,饲养条件、造模方法和分组同实施例5。采用碳末灌胃法测定小肠推进率。大鼠禁食不禁水20h,各组大鼠灌胃碳末(溶解于羧甲基纤维素钠)1.5ml/100g·BW,20min后麻醉大鼠,取出胃肠组织,将小肠平铺于纸上,测量幽门至盲肠距离L2及碳末至幽门的距离即小肠全长L1,计算小肠推进率=L1/L2×100%。各组结果见表2,与正常对照组相比,模型组大鼠小肠推进率显著升高,表明饮食不规律加游泳疲劳造成肠蠕动异常。而与模型组比较,本发明所述火棘果提取物显著抑制大鼠小肠推进率,改善了肠功能异常现象,且效果优于对比例1、2。

  表2:本发明所述火棘果提取物对大鼠的小肠推进率影响

  

  注:a表示与模型组比较有显著差异;b表示与正常对照组比较有显著差异。

  实施例7:本发明所述火棘果提取物在缓解排便行为异常中的应用

  采用大鼠为实验动物,饲养条件、造模方法和分组同实施例5。排便颗粒数反映排便行为,每周测定3次排便颗粒数并取平均值。测定时,于当天下午3:00更换新的垫料,并于晚上9:00统计各笼粪便颗粒数,除以该笼大鼠只数,即为即为6h内大鼠排便颗粒数。如图1所示,模型组大鼠同时间内排便颗粒数显著高于正常对照组,给药两周后火棘果提取物给药组降低了排便颗粒数,且差异显著。证明本发明所述提取物可抑制饮食不规律和游泳疲劳导致的排便行为异常变化,缓解小肠蠕动过快现象。对比例中提取物具有一定缓解缓解作用,但与本发明所述火棘果提取物相比作用较小。图1为本发明所述火棘果提取物对大鼠的尿液量影响。

  实施例8:本发明所述火棘果提取物在提高摄食量中的应用

  采用KM小鼠为实验动物,选取体重约为20g雌性昆明小鼠(SPF级),适应性喂养1周后,分为4组,每组5只。正常组饲喂普通饲料;低剂量组饲喂掺入1%的本发明所述火棘果提取物的特制饲料;中剂量组饲喂掺入2%的本发明所述火棘果提取物的特制饲料;高剂量组饲喂掺入5%的本发明所述火棘果提取物的特制饲料。4周实验过程中,每隔2天测定一次摄食量,以每笼饲料总重量差/每笼小鼠数量计算小鼠平均摄食量,每周3次结果取平均值,结果见表3;

  表3:本发明所述火棘果提取物对小鼠摄食量的影响

  

  注:a表示与对照组比较有显著差异。

  由表3所示可知,摄入本发明所述火棘果提取物的小鼠组的摄食量明显大于摄入普通饲料的对照组,说明本发明所述火棘果提取物具有促进食欲的功效。

  综上可以看出,本发明所述制备方法得到的火棘果提取物在改善胃肠功能用途上表现为促进胃泌素和/或胃动素的分泌以促进胃酸分泌、增强胃动力、缓解小肠蠕动异常及排便行为异常、提高摄食量。

  最后,还需要说明的是,术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含,从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素,而且还包括没有明确列出的其他要素,或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。

  尽管已描述了本发明的优选实施例,但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念,则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以,所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。

  显然,本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样,倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内,则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

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