一种黄籽高油酸甘蓝型油菜的选育方法
技术领域
本发明涉及黄籽高油酸甘蓝型油菜选育技术领域，具体为一种黄籽高油酸甘蓝型油菜的选育方法。
背景技术
油菜是世界上主要油料作物之一，也是重要的食用油源、和蛋白质饲料、工业原料和蜜源植物，高油酸菜油较普通低芥酸菜油更是一种健康营养油，可降低人体动脉血管中低密度脂蛋白的含量，且对高密度脂蛋白含量则没有影响，从而减少胆固醇的形成，能有效预防人体心血管疾病，高油酸菜油较耐贮藏，货架期较长，另外，高油酸菜油能有效进行甲酯化，有利于生产生物柴油，因此，高油酸菜油在健康保健、食品加工和工业应用上都具有非常重要的作用，高油酸育种成为现代油菜育种一个重要的研究方向。
在高油酸材料创制方面，过去主要的化学诱变和物理诱变等方式由于诱变的定向性差，需要在诱变初期具有较大的诱变群体，工作量大，选育时间长，转基因技术可以快速有效的获得高油酸材料，但是由于现有的转基因安全疑虑，使得其材料在生产中被有效、大面积利用需要较长时间，使用远缘杂交手段进行高油酸材料的创制，通过该手段可以创制出遗传背景更广泛的遗传育种新材料，但是远缘杂交不结实和后代不可育等严重限制了条件较差的育种单位利用该手段开展高油酸育种，同时现有的高油酸油菜品种常规育种方法主要采用已经获得的高油酸材料和现有的低芥酸油菜进行杂交，或者直接在低芥酸油菜中进行定向选择来获得高油酸材料，由于低芥酸油菜种质资源匮乏，育种中近亲繁殖严重，导致现有低芥酸甘蓝型油菜存在着产量低、抗病性差等问题，再从中创制出性状优良的高油酸材料难度越来越大，现提供一种新型高油酸材料选育技术，该技术以高芥酸油菜(芥酸含量大于45%)和普通低芥酸油菜(芥酸含量小于1%)杂交，聚合高芥酸油菜在脂肪酸合成代谢中脂肪酸脱氢酶基因(FAD2)缺陷和低芥酸油菜脂肪酸链延长酶基因(FAE1)的缺陷，实现对高油酸新材料创制，进一步用于生产或者育种。
综上所述，现有的黄籽高油酸甘蓝型油菜在选育过程中存在着诱变育种的不定向性和不确定性，远缘杂交工作难度高和高油酸油菜种质资源匮乏的缺点。针对上述问题，急需在原有黄籽高油酸甘蓝型油菜选育的基础上进行创新设计。
发明内容
本发明的目的在于提供一种黄籽高油酸甘蓝型油菜的选育方法，以解决上述背景技术中提出诱变育种的不定向性和不确定性，远缘杂交工作难度高和高油酸油菜种质资源匮乏的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种黄籽高油酸甘蓝型油菜的选育方法，包括以下步骤：
步骤1)、亲本的选配和杂种F1代的获得
选育农艺性状好的两个亲本(其中一个为高芥酸油菜，另外一个为普通油酸的双低油菜)进行杂交，获得杂种F1代，其中两亲本除了农业性状优良外，还需要满足以下条件：
(1)两个亲本中至少有一个为黄籽;
(2)两个亲本中至少有一个为高产、高抗(抗病、抗倒伏等)、含油量较高;
(3)高芥酸甘蓝型油菜亲本芥酸含量大于50%，低含量的亚油酸;
(4)普通双低甘蓝型油菜亲本芥酸小于1%、硫苷低于30%;
步骤2)、杂交后代选育
方式一：
(1)杂种F1自交，获得群体F2:1，该群体至少保证300-500个单株;
(2)杂种F2:1单株自交种子利用近红外光谱仪进行品质测定，筛选油酸含量高于70%的单株，构建高油酸的F2:2株系;
(3)F2:2每个株系内选择性状优良的单株进行自交，收获种子利用近红外光谱仪进行品质测定，继续筛选油酸含量高于70%的单株，构建F2:3株系;
(4)从F2:3每个株系内继续选择性状优良的单株进行自交，收获种子继续利用近红外光谱仪进行品质测定，继续筛选油酸含量高于70%的单株，且籽粒颜色为黄色构建F2:4株系;
(5)F2:4和F2:5每个单株工作继续4中的选择方法进行选择，从F2:4开始，对近红外扫描筛选出的油酸含量高于75%的单株通过气相色谱仪进行油酸含量的精准测定，筛选油酸含量高于75%的单株进行扩繁，形成高油酸品系，并连续进行遗传一致性观察;
方式二：
(1)杂种F1进行小孢子培养，构建包含至少200个株系的DH系群体;
(2)先对每一个DH群体的单株自交种子利用近红外光谱仪进行品质测定，筛选粒色黄色、油酸含量的单株，再通过气相色谱仪进行油酸含量的精准测定，筛选油酸含量高于75%的单株进行扩繁，形成高油酸品系。
优选的，所述该黄籽高油酸甘蓝型油菜的选育方法中选取性状优良的黄籽高芥酸甘蓝型油菜(芥酸含量高于50%、亚油酸和亚麻酸含量尽量低)和性状优良的高含油量低芥酸油菜(芥酸含量低于1%，籽粒颜色褐色或者黄色、含油量高于45%)杂交。
优选的，所述该黄籽高油酸甘蓝型油菜的选育方法中杂种F1代自交、获得F2:1群体，该群体含有300以上的单株，或将F1代通过小孢子培养构建DH株系群体，该群体至少包含200个DH株系。
优选的，所述该黄籽高油酸甘蓝型油菜的选育方法中对300个以上的F2:1单株或者200个DH系自交种子株系品质性状通过近红外光谱扫描进行初步测定，筛选油酸含量高于70%(DH系筛选标准为75%)的单株(或者株系)用于构建F2:2株系群体(或者DH系群体)。
优选的，所述该黄籽高油酸甘蓝型油菜的选育方法中在选择后的F2:2每个株系内选择性状优良单株5株左右进行自交，按照F2:2株系群体构建方法分别构建选择后的F2:3、F2:4株系群体，在F2:4株系群体(或DH群体)内选择优势含量高于75%的单株(近红外和气相色谱仪测定均大于75%)构建株系用于遗传稳定性调查和籽粒颜色、株型性状、产量性状等鉴定，选择满足育种要求的株系扩繁，用于育种或者遗传研究。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1.该黄籽高油酸甘蓝型油菜的选育方法，通过高芥酸油菜和普通低芥酸油菜杂交，利用二者在脂肪酸合成代谢中的缺陷差异进行聚合，在杂种后代中选育高油酸油菜材料，克服了诱变育种的不定向性和不确定性、转基因技术的安全顾虑和远缘杂交的工作难度;
2.该黄籽高油酸甘蓝型油菜的选育方法，从高芥酸油菜中选育出高油酸油菜，必将拓宽高油酸油菜种质资源范围，克服种质资源匮乏的问题，提高育种效率。
附图说明
图1为本发明流程结构示意图。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
请参阅图1，本发明提供一种技术方案：一种黄籽高油酸甘蓝型油菜的选育方法，包括以下步骤：
步骤1)、亲本的选配和杂种F1代的获得
选育农艺性状好的两个亲本(其中一个为高芥酸油菜，另外一个为普通油酸的双低油菜)进行杂交，获得杂种F1代，其中两亲本除了农业性状优良外，还需要满足以下条件：
(1)两个亲本中至少有一个为黄籽;
(2)两个亲本中至少有一个为高产、高抗(抗病、抗倒伏等)、含油量较高;
(3)高芥酸甘蓝型油菜亲本芥酸含量大于50%，低含量的亚油酸;
(4)普通双低甘蓝型油菜亲本芥酸小于1%、硫苷低于30%;
步骤2)、杂交后代选育
方式一：
(1)杂种F1自交，获得群体F2:1，该群体至少保证300-500个单株;
(2)杂种F2:1单株自交种子利用近红外光谱仪进行品质测定，筛选油酸含量高于70%的单株，构建高油酸的F2:2株系;
(3)F2:2每个株系内选择性状优良的单株进行自交，收获种子利用近红外光谱仪进行品质测定，继续筛选油酸含量高于70%的单株，构建F2:3株系;
(4)从F2:3每个株系内继续选择性状优良的单株进行自交，收获种子继续利用近红外光谱仪进行品质测定，继续筛选油酸含量高于70%的单株，且籽粒颜色为黄色构建F2:4株系;
(5)F2:4和F2:5每个单株工作继续4中的选择方法进行选择，从F2:4开始，对近红外扫描筛选出的油酸含量高于75%的单株通过气相色谱仪进行油酸含量的精准测定，筛选油酸含量高于75%的单株进行扩繁，形成高油酸品系，并连续进行遗传一致性观察;
方式二：
(1)杂种F1进行小孢子培养，构建包含至少200个株系的DH系群体;
(2)先对每一个DH群体的单株自交种子利用近红外光谱仪进行品质测定，筛选粒色黄色、油酸含量的单株，再通过气相色谱仪进行油酸含量的精准测定，筛选油酸含量高于75%的单株进行扩繁，形成高油酸品系。
本例中该黄籽高油酸甘蓝型油菜的选育方法中选取性状优良的黄籽高芥酸甘蓝型油菜(芥酸含量高于50%、亚油酸和亚麻酸含量尽量低)和性状优良的高含油量低芥酸油菜(芥酸含量低于1%，籽粒颜色褐色或者黄色、含油量高于45%)杂交。
该黄籽高油酸甘蓝型油菜的选育方法中杂种F1代自交、获得F2:1群体，该群体含有300以上的单株，或将F1代通过小孢子培养构建DH株系群体，该群体至少包含200个DH株系。
该黄籽高油酸甘蓝型油菜的选育方法中对300个以上的F2:1单株或者200个DH系自交种子株系品质性状通过近红外光谱扫描进行初步测定，筛选油酸含量高于70%(DH系筛选标准为75%)的单株(或者株系)用于构建F2:2株系群体(或者DH系群体)。
该黄籽高油酸甘蓝型油菜的选育方法中在选择后的F2:2每个株系内选择性状优良单株5株左右进行自交，按照F2:2株系群体构建方法分别构建选择后的F2:3、F2:4株系群体，在F2:4株系群体(或DH群体)内选择优势含量高于75%的单株(近红外和气相色谱仪测定均大于75%)构建株系用于遗传稳定性调查和籽粒颜色、株型性状、产量性状等鉴定，选择满足育种要求的株系扩繁，用于育种或者遗传研究。
实施例
1.以黄籽高芥酸油菜10D130(芥酸含量高于50%)为母本、褐籽低芥酸油菜中双11号(芥酸含量低于1%)为父本，构建了一个包含250个株系的重组自交系群体(RILs)，按照该技术路线，从F2：1开始进行高油酸油菜新品种选育，结果在后代中获得了4个油酸含量黄籽高油酸油菜新品系(其中有1个油酸含量高于80%);
2.以黄籽高芥酸油菜10D130(芥酸含量高于50%)为母本、褐籽低芥酸油菜中双11号(芥酸含量低于1%)为父本，构建一个包含94个株系的DH群体，其中有1个株系油酸含量高于75%，籽粒颜色为黄色;
3.以黄籽高芥酸甘蓝型油菜19D566和黄籽低芥酸甘蓝型油菜19D080杂交，对其包含300个单株的F2:1群体中单株进行近红外品质测定，结果发现其中有20个左右单株油酸含量高于70%(均为黄籽)，10个单株油酸含量高于75%(3个单株油酸含量高于80%)。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
