一种新型犬骨骼标本制作方法
技术领域
本发明属于标本制作技术领域，具体涉及一种新型犬骨骼标本制作方法。
背景技术
制作犬骨骼标本的步骤主要包括去除软组织、脱脂、漂白以及模仿动物的正常自然姿态进行串接。其中，软组织的去除是重要的步骤，在去除软组织的过程中，极易造成骨骼的破坏，残留的油脂会造成后续制作中骨骼变黑，软组织去除的程度直接影响后续的脱脂时间、漂白效果及骨骼完整性，是制作优质犬骨骼标本的关键。由于不同物种的骨骼大小、骨骼密度等均不相同，去除软组织的方法也各异，目前最常用的是使用低浓度的氢氧化钠去除软组织及脱脂，而氢氧化钠溶液又有腐蚀性，对骨骼易产生破坏，且需要不断观察，掌握不好浓度和时间就会对骨骼标本造成不可挽回的损害，如果操作不当对人皮肤也有伤害，因此需要对犬骨标本去除软组织的方法进行改进，再改进的基础上，完善脱脂和漂白的程序，以获得完整白皙的骨骼。
发明内容
为解决现有技术存在的问题，本发明提供一种新型的犬骨骼标本制作方法。
为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案：
一种犬骨骼标本去除软组织的方法，所述方法包括以下步骤：
(1)剔除附着在骨骼上的大块肌肉，将骨骼分为头骨、脊柱、四肢骨、胸骨和肋骨四部分；
(2)配制浓度为0.3％和0.5％的碱性蛋白酶溶液；
(3)将头骨、四肢骨和胸肋骨放入0.3％的碱性蛋白酶溶液中，在50℃恒温培养箱中分别浸泡36h，66h，60h；
(4)将脊柱骨放入0.5％的碱蛋白酶溶液中，在50℃恒温培养箱中浸泡60h；
(5)取出骨骼用水冲干净即可。
上述技术方案中，进一步地，所述碱性蛋白酶溶液的pH为6.8～8.5。
本发明另一方面提供了一种犬骨骼标本去除软组织的方法，所述方法包括以下步骤：
(1)去除软组织：使用前述犬骨骼标本去除软组织的方法；
(2)脱脂：使用0.02％十二烷基苯磺酸钠(LAS)脱脂24小时；
(3)漂白：使用4％的过氧化氢进行漂白5h；
(4)串接：按照犬品种正常姿态进行串接安装。
本发明的有益效果：
1.本发明去除软组织的方法，简便易行，使用0.3％和0.5％的碱性蛋白酶溶液浸泡，并且不同部位的骨骼选用不同浓度的碱性蛋白酶，同时分别控制浸泡时间和浸泡温度，最后去除软组织后，骨骼没有被破坏，骨骼残余油脂少，有利于后续脱脂与漂白。
2.本发明的脱脂方法，使用0.02％十二烷基苯磺酸钠脱脂(LAS)24小时，LAS在犬的骨骼标本制作中脱脂效果好，所用的脱脂时间短，不损伤骨质，且廉价高效，低毒环保，不易氧化。LAS脱脂后保存的骨骼硬度较好，色白，无油脂渗出，能代替传统的有机溶剂或氢氧化钠进行脱脂。
3.本发明的漂白方法，使用4％的过氧化氢进行漂白5h，过氧化氢漂白效果好，简单易操作。
附图说明
图1本发明制备的犬骨骼标本；
图2四肢骨骨骺脱落图；
图3头骨骨裂图；
图4耻骨开裂图。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明作进一步说明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1
一种犬骨骼标本去除软组织的方法，所述方法包括以下步骤：
(1)剔除附着在骨骼上的大块肌肉，将骨骼分为头骨、脊柱、四肢骨、胸骨和肋骨四部分；
(2)配制浓度为0.3％和0.5％的碱性蛋白酶溶液：将碱性蛋白酶(g)与蒸馏水(ml)按不同浓度配制蛋白酶混合液，混合液pH 6.8～8.5，混合液体积以没过骨骼为宜；
(3)将头骨、四肢骨和胸肋骨放入0.3％的碱性蛋白酶溶液中，在50℃恒温培养箱中分别浸泡36h，66h，60h；
(4)将脊柱骨放入0.5％的碱蛋白酶溶液中，在50℃恒温培养箱中浸泡60h；
(5)取出骨骼用水冲干净即可。
去除软组织后进行脱脂，使用0.02％十二烷基苯磺酸钠脱脂24小时；脱脂后漂白，使用0.5％的过氧化氢进行漂白5h；最后进行串接即得到所需的犬骨骨骼标本。
本发明方法去除软组织后，骨骼完整(图1)，脱脂时间短，容易漂白，制作的标本骨骼色白，完整。
对比例
将头骨、脊柱、四肢骨、胸骨和肋骨四部分分别浸泡于0.1％、0.3％、0.5％、0.7％和0.9％碱性蛋白酶溶液中，结果如下表1～表4：表中****多组织残留，***局部组织残留，**少量组织残留，*微量组织残留，o无组织残留，#出现表面骨质破坏，※有骨裂现象。
表1四肢骨软组织残留量
表2肋骨及胸骨软组织残留量
表3头骨软组织残留量
表4脊柱软组织残留量
在0.5％浓度的蛋白酶分解液中脊柱在60h、胸骨肋骨及头骨48h后所有软组织完全分解，头骨54h出现表面骨质破坏；四肢骨36h后出现了骨骺断裂现象，但还残存微量结缔组织。60h后残存的微量结缔组织完全分解，骨骺脱落(图2)。
在0.7％和0.9％浓度的蛋白酶分解液中脊柱在60h、胸骨肋骨及头骨48后所有软组织完全分解；头骨54h出现表面骨质破坏，60h有骨裂现象(图3)；四肢骨36h后出现了骨骺断裂现象，但还残存微量结缔组织，48h后耻骨联合处开裂(图4)，60h后残存的微量结缔组织才完全分解。
由对比例和实施例1可以看出，本申请的方法制备的骨骼，骨质没有明显破坏，长骨的骨骼完好，颅骨的骨缝没有明显分离，肋骨没有断裂。
对于任何熟悉本领域的技术人员而言，在不脱离本发明技术方案范围情况下，都可利用上述揭示的技术内容对本发明技术方案作出许多可能的变动和修饰，或修改为等同变化的等效实施例。因此，凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同变化及修饰，均应仍属于本发明技术方案保护的范围内。
