一种疏花水柏枝微环境繁育的方法
技术领域
本发明涉及一种疏花水柏枝微环境繁育的方法，属于生物繁育技术领域。
背景技术
疏花水柏枝(Myricaria laxiflora(Franch.)P.Y.Zhang et Y.J.Zhang)，是柽柳科(Tamaricaceae)水柏枝属(Myricaria)多年生直立常绿灌木，水柏枝属在我国分布10种，主要分布在西北及西南较高海拔(1000-5200m)地区，耐旱耐贫瘠，而疏花水柏枝分布于湖北秭归、巴东及四川巫山峡口长江两岸地区，具有较强的抗涝性、抗瘠薄，被公认为治理消落带的优势树种，目前疏花水柏枝的原生地已被淹没，因此，开展疏花水柏枝繁育研究具有重要的意义。
目前，疏花水柏枝繁育主要集中在扦插育苗为主，但此方法存在着对插穗有要求，受时间限制，且扦插苗无主根，根系较浅，苗势瘦弱，不育性强，结实率不稳定。少有报道进行种子繁育，其中种子出苗率高达90％以上，但呈现成苗率低的现象，综上所述，寻找繁育不受时间，成苗率高，且生长强壮的疏花水柏枝实生苗的方法，显得尤为重要，推动产业化生产具有必要性。
发明内容
本发明打破了繁育时间限制，克服了疏花水柏枝种子繁殖的出苗率、成苗率低的缺点。利用微环境繁育疏花水柏枝实生苗，首先提高了成苗率高，出苗整齐，苗势健壮，其次解决了疏花水柏枝自然更新缓慢，遗传力降低等瓶颈难题，同时创新了繁育方法，实现了人工可控制主要生长因子，操作简单有效，改变主要因子，随时可以繁殖大量的实生苗，调高了繁育效率，达到了繁育高质量的实生苗木的效果。具体方案如下：
一种疏花水柏枝微环境繁育的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)筛选母株及种子
将疏花水柏枝母株经至少一年的水肥管理收集种子，并在-25～-18℃下储藏待用；
(2)种子预处理
将储藏的种子去除表面的白毛，再于-25～-18℃下储藏1-3小时；
(3)播种及控制生长因子
将预处理的种子在室温下经发芽后，置于培养基中进行光照培养，在不同生长期进行阶段养护，具体如下：
萌芽长苗阶段：采用1-2级光，温度20-25℃，湿度保持在75-80％，培养5-8天；
缓苗阶段：采用3-4级光，温度20-22℃，湿度保持在80-85％，培养12-15天；
成苗阶段：采用4-5级光，温度20-25℃，湿度保持在65-70％，培养12-15天。
种子预处理工艺是在-20℃下储藏2小时后再在室温条件下发芽6-7小时。
步骤(3)中所述的培养基包括沙子及营养土，其中沙子上铺设营养土，营养土上铺设滤纸，并充分浸湿，再将发芽的种子置于滤纸上进行光照培养。
步骤(3)中阶段性养护的优选条件如下：
萌芽长苗阶段：采用2级光，温度25℃，湿度保持在80％左右，培养5天；
缓苗阶段：采用3级光，温度22℃，湿度保持在85％左右，培养15天；
成苗阶段：采用4级光，温度20℃，湿度保持在70％左右，培养15天。
本发明的技术方案通过低温-20℃处理种子，促使种子萌发的幼苗粗壮，幼叶鲜绿；通过调控光照、温度有效地提高了疏花水柏枝出苗率、成活率、成苗率，打破了播种种植时间的限制，也可更好节省空间，出苗后可精细管护，达到长势健壮且一致，提高了苗木质量，实现批量生产。
附图说明
图1为常温处理的疏花水柏枝种子经萌发阶段养护后的萌芽长苗阶段图。
图2为常温处理的疏花水柏枝种子经萌发阶段养护后的苗木图。
图3为实施例1中疏花水柏枝萌芽长苗阶段图。
图4为实施例1中疏花水柏枝缓苗阶段图。
图5为实施例1中疏花水柏枝苗木图。
图6为-10℃处理的疏花水柏枝种子经萌发阶段养护后的萌芽长苗阶段图。
图7为-10℃处理的疏花水柏枝种子经萌发阶段养护后的苗木图。
具体实施方式
实施例1
本发明所用的疏花水柏枝材料来自长江珍稀植物研究所，采集疏花水柏枝的种子，储藏于-20℃冰箱里。
本发明所用的河沙、营养土(原装进口丹麦品氏托普泥炭土，草炭土，种植土，整包0-6mm，整包300L)、滤纸、培养皿分别进行了高温高压蒸汽灭菌，将光照培养箱喷洒酒精进行消毒。
筛选母株
选择10株长势茂盛，无病虫害，且树龄相同的疏花水柏枝母株，将这些疏花水柏枝母株进行相同的水肥管理。在11-12月时进行翻地整地，同时一次追适当的基肥(饼肥)，当进入次年2-5月，疏花水柏枝快速地进行营养生长，此时需要喷洒以氮肥为主的复合肥(氮：磷：钾＝6:3:2)，促使疏花水柏枝母株枝繁叶茂；6-9月疏花水柏枝停滞生长，进行休眠，此时每天保持喷洒水，保持空气中的湿度到到80％，并要遮阴，防止太阳灼烧叶、枝干，此时停止上肥；10-11月疏花水柏枝恢复生长，开始生殖生长，此时施一次以钾为主的复合肥(氮：磷：钾＝1:2:3)，促使分化更多的花芽，待开花时，喷洒1-2次以磷钾肥为主的复合肥(氮：磷：钾＝1:2:2)，补充开花所需的营养，发挥保花保果的效果。当疏花水柏枝结果时，收集10株的种子，将其装于离心管中，并做好记录，将种子储藏在-20℃冰箱里。
种子预处理
疏花水柏枝的种子被白色的毛包裹，通过种子发芽实验发现，白毛会影响种子的发芽率，因此将收集到的种子进行初步的处理，以提高种子的发芽率，用尖头镊子剥离挑出来，去除种子表面的白毛，经过发芽实验出苗率达100％；通过低温-20℃将收集到的种子冷冻2小时，随后播种其幼苗茎更粗壮，幼叶更绿，长势明显优于未低温处理的种子的幼苗(如图1未经低温-20℃处理的种子萌发苗，图3经低温-20℃处理的种子萌发苗)。
播种及控制生长因子
将已灭菌的沙子、营养土分别放入到培养皿中，保证沙子厚度0.5cm，营养土1.0cm，用蒸馏水浇透营养土和沙子，培养皿中不流水且保湿，将滤纸充分接触营养土，用胶头滴管吸取少量水浸湿滤纸，用尖头镊子将疏花水柏枝种子均匀平铺到滤纸上，盖上培养基的盖子，将其放入到光照培养箱中，调节光照强度、温度，得到最适宜调控参数具体参照表一，其中萌芽长苗阶段：采用2级光，温度25℃，湿度保持在80％左右，培养5天，此阶段苗木生长缓慢，柔弱，两叶，匍匐在滤纸上；其中缓苗阶段：采用4级光，温度22℃，湿度保持在85％左右，培养15天，此阶段苗木生长加快，缓缓地向上直立，每天需要对滤纸表面喷雾保湿，叶面舒展变大，光合作用变强，需要降低温度；其中成苗阶段：采用6级光，温度20℃，湿度保持在70％左右，培养15天，此阶段幼苗逐渐木质化，叶子由4片增加到8片，茎最长至1cm，完全挺拔直立，根最长可达2.5cm，根据统计成苗率可达95％以上。此后的已完全木质化的疏花水柏枝实生苗可以下地移栽，对其每半个月进行一次补施稀释后的复合肥(氮：磷：钾＝1:1:1)，有利于苗木更状。此方法克服了疏花水柏枝播种成苗率低缺点，打破了受季节限制，节约空间，操作简便，通过这种方法可繁育大量实生苗木运用于生产实践中。
表1调控后疏花水柏枝成苗率生长情况
注：“+”表示每株幼苗鲜重0～0.0006g，茎直径0～0.30mm；“++”表示每株幼苗鲜重0.0006～0.0015g，茎直径0.30～0.45mm；“+++”表示每株幼苗鲜重0.0020～0.0100g，茎直径0.30～0.50mm；“++++”表示每株幼苗鲜重0.0100～0.0200g，茎直径0.50～0.80mm。
将处理过的种子分为三组播种，采用上述相同的生长因子的生长条件下，第一组将种子去除表面的白毛立即播种，出苗率高达100％，4小时全部出苗，成苗率达70.6％，茎细，根短，叶片数4-6片，叶色淡绿色，苗木长势弱(如图1、5所示)，采用上述相同的生长因子培育后进行栽植会出现一些苗木枯死，死亡率为40-55％。
第二组-20℃处理4小时，出苗率高达100％，7小时完全发芽，成苗率高达95.0％，茎粗壮，根长，叶片数6-8片，叶色深绿色，苗木长势强(如图2、6所示)。采用上述相同的生长因子培育后进行栽植，苗木成活率高，死亡率为8％以内。这是因为在-20℃条件下使种子萌发过程有一个缓冲期，而这一缓冲期更有利于疏花水柏枝的成苗过程，稳定了植物的根基，使植株长势更稳。
第三组-10℃处理4小时，出苗率高达100％，5小时基本完全发芽，出苗率高达89.6％，茎粗壮，根长，叶片数6-8片，叶色深绿色，苗木长势强(图7)。采用上述相同的生长因子培育后进行栽植，苗木成活率高，死亡率为12-15％以内。
