高产工厂化微藻培养方法
第一、技术领域
本发明涉及微藻培养技术领域，具体是指一种高产工厂化微藻培养方法。
第二、背景技术
微藻因其富含蛋白质、脂类、多糖、维生素、抗氧化剂和其它功能性营养成分，在医药原料、保健食品及生物能源领域具有广泛的应用。目前，微藻培养技术多集中于光自养体系，该培养体系存在生产效率低、占地面积大、收获成本高等不足，严重制约了微藻产业的发展。通过人工大规模培养技术提高微藻生物量是微藻资源开发利用的关键。近年来，逐渐兴起了微藻异养高细胞密度培养技术，该技术可以克服光培养体系对光的依赖，具有生长速度更快、能实现纯种培养、细胞产率高、可大大降低下游后处理成本，更便于自动化控制等优势，已成为近年来微藻培养研究的热点。本领域需要一种高产工厂化微藻培养方法。
第三、发明内容
本发明要解决的技术问题是克服以上技术缺陷，提供一种高产工厂化微藻培养方法。
为了达到上述发明目的，本发明采用的技术方案为：一种高产工厂化微藻培养方法，包括以下步骤：
(1)准备工厂化微藻扩培所需要的设施、设备，包括温室玻璃房，温室玻璃房内装配设备有：自动或半自动增温控温设备、空气湿度控制设备、CO2发生及施放装置、补光设备、配水处理系统，高位水池;
(2)藻种在250ml三角瓶中培养，光照度5000lux，22-26℃培养，每天摇动三角瓶2-3次，待生长至对数生长期，得到种子液;
(3)一级培养在250毫升-4升的容器中进行，按照10%的体积比接种，供给补充了二氧化碳的空气;
(4)取其中一部分继续用于一级培养，其余部分用来接种，开始二级培养，二级培养在一个高而窄的直立的圆桶状容器内，容器体积为20升-120升，二级培养的藻液用作幼虫饵料，或用来接种并开始三级培养;
(5)三级培养采用管道式光反应器、柱状光反应器或微藻跑道池反应器，容器最小是200升。
进一步的，所述温室玻璃房为300平米车间，占地尺寸为20米*15米，采用双屋面连接式温室。
进一步的，一级培养在20±10℃、2000±500lux的条件下培养7-14天。
进一步的，二级培养在30℃±2℃、2000±500lux的条件培养3-4天。
进一步的，三级培养在30℃±2℃、2000±500lux的条件培养3-4天。
进一步的，藻种、一级培养、二级培养、三级培养的培养液由以下质量份数的各物质组成：水10-50份;农用复合氨基酸粉10-20份;腐殖酸盐10-50份;磷酸二氢钾5-15份;尿素5-10份;硫酸亚铁1-5份;过磷酸钙1-5份;硼砂1-5份;微量元素0.1-0.5份;赤霉素0.1-0.5份。
本发明的有益效果为：本发明通过三级培养的方法，同时按照营养平衡理论制作营养液来培养微藻，可以大幅提高微藻的生长速度和数量，效果显著，大幅度降低工厂藻类培育的成本，经济适用，适合推广使用。
第四、具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例一
一种高产工厂化微藻培养方法，包括以下步骤：
(1)准备工厂化微藻扩培所需要的设施、设备，包括温室玻璃房，所述温室玻璃房为300平米车间，占地尺寸为20米*15米，采用双屋面连接式温室，温室玻璃房内装配设备有：自动或半自动增温控温设备、空气湿度控制设备、CO2发生及施放装置、补光设备、配水处理系统，高位水池;
(2)藻种在250ml三角瓶中培养，光照度5000lux，22℃培养，每天摇动三角瓶2次，待生长至对数生长期，得到种子液;
(3)一级培养在250毫升的容器中进行，按照10%的体积比接种，供给补充了二氧化碳的空气，一级培养在20℃、1500lux的条件下培养7天;
(4)取其中一部分继续用于一级培养，其余部分用来接种，开始二级培养，二级培养在一个高而窄的直立的圆桶状容器内，容器体积为20升，二级培养在28℃、1500lux的条件培养3天，二级培养的藻液用作幼虫饵料，或用来接种并开始三级培养;
(5)三级培养采用管道式光反应器、柱状光反应器或微藻跑道池反应器，容器最小是200升，三级培养在28℃、1500lux的条件培养3天。
藻种、一级培养、二级培养、三级培养的培养液由以下质量份数的各物质组成：水10份;农用复合氨基酸粉10份;腐殖酸盐10份;磷酸二氢钾5份;尿素5份;硫酸亚铁1份;过磷酸钙1份;硼砂1份;微量元素0.1份;赤霉素0.1份。
实施例二
一种高产工厂化微藻培养方法，包括以下步骤：
(1)准备工厂化微藻扩培所需要的设施、设备，包括温室玻璃房，所述温室玻璃房为300平米车间，占地尺寸为20米*15米，采用双屋面连接式温室，温室玻璃房内装配设备有：自动或半自动增温控温设备、空气湿度控制设备、CO2发生及施放装置、补光设备、配水处理系统，高位水池;
(2)藻种在250ml三角瓶中培养，光照度5000lux，25℃培养，每天摇动三角瓶3次，待生长至对数生长期，得到种子液;
(3)一级培养在2升的容器中进行，按照10%的体积比接种，供给补充了二氧化碳的空气，一级培养在25℃、2000lux的条件下培养10天;
(4)取其中一部分继续用于一级培养，其余部分用来接种，开始二级培养，二级培养在一个高而窄的直立的圆桶状容器内，容器体积为100升，二级培养在30℃、2000lux的条件培养3天，二级培养的藻液用作幼虫饵料，或用来接种并开始三级培养;
(5)三级培养采用管道式光反应器、柱状光反应器或微藻跑道池反应器，容器最小是200升，三级培养在30℃、2000lux的条件培养3天。
藻种、一级培养、二级培养、三级培养的培养液由以下质量份数的各物质组成：水30份;农用复合氨基酸粉15份;腐殖酸盐30份;磷酸二氢钾10份;尿素8份;硫酸亚铁3份;过磷酸钙3份;硼砂3份;微量元素0.3份;赤霉素0.3份。
实施例三
一种高产工厂化微藻培养方法，包括以下步骤：
(1)准备工厂化微藻扩培所需要的设施、设备，包括温室玻璃房，所述温室玻璃房为300平米车间，占地尺寸为20米*15米，采用双屋面连接式温室，温室玻璃房内装配设备有：自动或半自动增温控温设备、空气湿度控制设备、CO2发生及施放装置、补光设备、配水处理系统，高位水池;
(2)藻种在250ml三角瓶中培养，光照度5000lux，26℃培养，每天摇动三角瓶3次，待生长至对数生长期，得到种子液;
(3)一级培养在4升的容器中进行，按照10%的体积比接种，供给补充了二氧化碳的空气，一级培养在30℃、2500lux的条件下培养14天;
(4)取其中一部分继续用于一级培养，其余部分用来接种，开始二级培养，二级培养在一个高而窄的直立的圆桶状容器内，容器体积为120升，二级培养在32℃、2500lux的条件培养4天，二级培养的藻液用作幼虫饵料，或用来接种并开始三级培养;
(5)三级培养采用管道式光反应器、柱状光反应器或微藻跑道池反应器，容器最小是200升，三级培养在32℃、2500lux的条件培养4天。
藻种、一级培养、二级培养、三级培养的培养液由以下质量份数的各物质组成：水50份;农用复合氨基酸粉20份;腐殖酸盐50份;磷酸二氢钾15份;尿素10份;硫酸亚铁5份;过磷酸钙5份;硼砂5份;微量元素0.5份;赤霉素0.5份。
以上对本发明及其实施方式进行了描述，这种描述没有限制性，只是本发明的实施方式之一，实际的实施方式并不局限于此。总而言之如果本领域的普通技术人员受其启示，在不脱离本发明创造宗旨的情况下，不经创造性的设计出与该技术方案相似的实施例，均应属于本发明的保护范围。
